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硝酸盐、镁盐对林可霉素生物合成的促进作用 被引量:8
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作者 焦瑞身 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期709-715,共7页
在林肯链霉菌生物合成林可霉素代谢调节的研究中,发现硝酸盐可明显促进林可霉素的生物合成.加入硝酸钾0.8%,林肯链霉菌合成林可霉素的产量可增加37%.在发酵96h之前加入硝酸盐均能促进林可霉毒的合成,但产量的增加随加入... 在林肯链霉菌生物合成林可霉素代谢调节的研究中,发现硝酸盐可明显促进林可霉素的生物合成.加入硝酸钾0.8%,林肯链霉菌合成林可霉素的产量可增加37%.在发酵96h之前加入硝酸盐均能促进林可霉毒的合成,但产量的增加随加入时间的延迟而降低.硝酸钾在促进产量的同时,使菌体生长减少,看来硝酸盐对林可霉素的合成与菌体生长之间起着调节作用.洗涤菌体试验指出,硝酸盐的加入诱导了林可霉素合成所需要的酶系,这可能是加入硝酸盐后,产生进一步氮代谢的结果;蛋白胨不能代替硝酸盐,进一步说明硝酸钾的作用并不是作为氮源利用.在蛋白质合成抑制剂氯霉素存在下,硝酸盐不再能促进林可霉素的合成,说明氯霉素抑制了硝酸盐或其代谢中间物所诱导的酶系的合成.同时还报导了镁盐促进林可霉素生物合成现象的初步观察结果.硫酸镁在促进林可霉素产量提高的同时,使菌体生长延迟.硫酸镁的这种作用机制可能是通过磷酸镁铵沉淀,降低了培养基中游离氨和可溶性磷酸盐浓度,解除了铵盐和磷酸盐对林可霉素合成的抑制. 展开更多
关键词 林肯链霉菌 林可霉素 合成 硝酸钾 硫酸镁
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丙酸盐对利福霉素生物合成的调控 被引量:12
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作者 张蔚文 焦瑞身 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期268-272,共5页
外源添加10mmol/L的丙酸盐能促进地中海拟无枝酸杆菌(Amycolatopsismediterranei)U32合成利福霉素SV30%:研究发现丙酸盐由两条酶学途径,即酰基CoA合成酶系统、脂肪酸激酶偶联酰基磷酸... 外源添加10mmol/L的丙酸盐能促进地中海拟无枝酸杆菌(Amycolatopsismediterranei)U32合成利福霉素SV30%:研究发现丙酸盐由两条酶学途径,即酰基CoA合成酶系统、脂肪酸激酶偶联酰基磷酸转移酶系统激活形成丙酰CoA,进而由丙酰COA羧化酶催化形成利福霉素合成前体(2S)-甲基丙二酰CoA,因而促进了利福霉素的合成。在两个丙酸盐激活酶系统中,丙酰CoA合成酶为组成型表达,而丙酸激酶/丙酰磷酸转移酶可由丙酸盐所诱导。过量的氨盐能阻遏丙酸盐激活酶系统以及利福霉素的合成。添加丙酸盐使受氨盐抑制的利福霉素的合成部分恢复,是由于促进了活化三碳单位的供应。 展开更多
关键词 丙酸盐 利福霉素合成 调控
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地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA转羧基酶的纯化及酶学特性 被引量:1
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作者 张蔚文 焦瑞身 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期176-181,共6页
经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温... 经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温度分别为7.0和35℃。纯化MCT酶对底物丙酰CoA和草酰乙酸的米氏常数分别为0.027mmol/L0.03509mmol/L.经SephadexG-150测定酶分子量为200000,SDS-取丙烯酰胺电泳凝胶显示一条分子量68000的亚基蛋白带,说明该酶由三个等大小亚基组成.薄层等电聚焦测定酶等电点为pI6.0.二价金属离子Co ̄(2+)和Fe ̄(3+)促进酶活力.采用原生质体裂解的方法发现MCT酶是可能分布于胞浆和细胞膜上. 展开更多
关键词 地中海菌 拟无枝酸杆菌 甲基丙二酰 转羧基酶
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地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis mediteranei)U-32硝酸还原酶的定位、纯化及性质 被引量:2
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作者 李果龙 杨蕴刘 焦瑞身 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期710-714,共5页
在力复霉素SV研究中,发现硝酸盐对抗生素合成呈现多效性作用,不仅大幅度提高产量,还对产生菌——地中海拟无枝菌酸菌生理产生多方面的影响,从而提出整体性调节的结论.这一多效性作用是由硝酸盐所引起的,为此对硝酸还原酶进行了... 在力复霉素SV研究中,发现硝酸盐对抗生素合成呈现多效性作用,不仅大幅度提高产量,还对产生菌——地中海拟无枝菌酸菌生理产生多方面的影响,从而提出整体性调节的结论.这一多效性作用是由硝酸盐所引起的,为此对硝酸还原酶进行了研究.首先,通过原生质体渗透裂解发现地中海拟无枝菌酸菌U-32的硝酸还原酶是一个胞质酶.该酶极不稳定,缓冲液中加入硝酸钾、甘油等保护剂能极大地提高其稳定性.通过硫酸鱼精蛋白沉淀,硫酸铵分级分离,Phenyl-SepharoseCL4B、Bio-GelA1.5mDEAE-Sephacel和SephadexG-75柱层析等多步纯化得到了电泳纯的硝酸还原酶.该酶为一79kD的单亚基酶,每分子酶含有约2.29原子的钼,但并不含有非血红素铁、酸不稳定硫、FMN及FAD,其等电点为6.2,反应最适pH为7.2,最适温度为40℃.对硝酸根的Km值为13.3μmol/L.同时分析了该酶的吸收光谱. 展开更多
关键词 硝酸还原酶 定位 纯化 A.mediterranei
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