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牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究
被引量：
12
1
作者
赵蓓
殷亦男
+3 位作者
王程燕
毕凌
许玲
焦丽静
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第20期2456-2461,共6页
目的:探讨牡荆素对M1/M2型巨噬细胞的调控作用和机制。方法:利用脂多糖(LPS)和IL-4诱导M1/M2型鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过CCK8法检测不同浓度牡荆素对RAW264.7细胞的活力影响来确定牡荆素的最适浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-ti...
目的:探讨牡荆素对M1/M2型巨噬细胞的调控作用和机制。方法:利用脂多糖(LPS)和IL-4诱导M1/M2型鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过CCK8法检测不同浓度牡荆素对RAW264.7细胞的活力影响来确定牡荆素的最适浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR)法检测牡荆素对巨噬细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、精氨酸酶1(Arg-1)、甘露糖受体(MR)基因表达的影响;通过Griess反应法检测牡荆素对巨噬细胞上清液中NO含量的影响;Transwell小室迁移实验检测由IL-4诱导的M2型巨噬细胞对非小细胞肺癌A549的体外迁移及牡荆素干预的影响;流式实验检测牡荆素对M2型巨噬细胞表型CD206的影响。Western blot检测磷酸化信号传导及转录激活因子3表达。结果:牡荆素在25、50、100μmol/L浓度时对小鼠巨噬细胞无明显细胞毒性,确定25、50、100μmol/L浓度进行后续实验。RT-PCR实验表明牡荆素呈剂量依赖性抑制M1表型标记物iNOS和IL-1β基因的mRNA表达,抑制M2型巨噬细胞表型中Arg-1和MR基因的mRNA表达。Griess反应法表明牡荆素呈浓度依赖抑制巨噬细胞M1表型中NO含量,同时抑制由M2型巨噬细胞诱发肺腺癌A549细胞的迁移能力的加剧。流式细胞术结果显示牡荆素能够抑制M2表型CD206的表达且呈浓度依赖性。Western blot结果显示牡荆素能够降低p-STAT3蛋白水平。结论:牡荆素通过调控STAT信号通路,调节巨噬细胞M1/M2的表型极化和标志性产物的表达,抑制巨噬细胞向M2极化,从而降低肺腺癌细胞A549细胞体外迁移力。
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关键词
牡荆素
巨噬细胞
侵袭
肺腺癌
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职称材料
题名
牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究
被引量：
12
1
作者
赵蓓
殷亦男
王程燕
毕凌
许玲
焦丽静
(
指导
)
机构
上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院肿瘤一科
上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院临床免疫研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第20期2456-2461,共6页
基金
国家自然基金项目(81704035,81973810,81904163)
中华中医药学会青年人才托举工程(QNRC2-C15)
+2 种基金
上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划(ZY(2018-2020)-CCCX-2004-09)
上海中医药大学2020年“研究生创新培养项目”(2020038)
上海市科学技术委员会“扬帆计划”(19YF1450000)资助项目。
文摘
目的:探讨牡荆素对M1/M2型巨噬细胞的调控作用和机制。方法:利用脂多糖(LPS)和IL-4诱导M1/M2型鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过CCK8法检测不同浓度牡荆素对RAW264.7细胞的活力影响来确定牡荆素的最适浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR)法检测牡荆素对巨噬细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、精氨酸酶1(Arg-1)、甘露糖受体(MR)基因表达的影响;通过Griess反应法检测牡荆素对巨噬细胞上清液中NO含量的影响;Transwell小室迁移实验检测由IL-4诱导的M2型巨噬细胞对非小细胞肺癌A549的体外迁移及牡荆素干预的影响;流式实验检测牡荆素对M2型巨噬细胞表型CD206的影响。Western blot检测磷酸化信号传导及转录激活因子3表达。结果:牡荆素在25、50、100μmol/L浓度时对小鼠巨噬细胞无明显细胞毒性,确定25、50、100μmol/L浓度进行后续实验。RT-PCR实验表明牡荆素呈剂量依赖性抑制M1表型标记物iNOS和IL-1β基因的mRNA表达,抑制M2型巨噬细胞表型中Arg-1和MR基因的mRNA表达。Griess反应法表明牡荆素呈浓度依赖抑制巨噬细胞M1表型中NO含量,同时抑制由M2型巨噬细胞诱发肺腺癌A549细胞的迁移能力的加剧。流式细胞术结果显示牡荆素能够抑制M2表型CD206的表达且呈浓度依赖性。Western blot结果显示牡荆素能够降低p-STAT3蛋白水平。结论:牡荆素通过调控STAT信号通路,调节巨噬细胞M1/M2的表型极化和标志性产物的表达,抑制巨噬细胞向M2极化,从而降低肺腺癌细胞A549细胞体外迁移力。
关键词
牡荆素
巨噬细胞
侵袭
肺腺癌
Keywords
Vitexin
Macrophages
Migration
Lung adenocarcinoma
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究
赵蓓
殷亦男
王程燕
毕凌
许玲
焦丽静
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
12
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