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基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测
被引量：
1
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作者
范子豪
田原
+6 位作者
徐玲
曹亚玲
陈思思
潘桢桢
张向颖
段钟平
任锋
《临床检验杂志》
CAS
2022年第2期87-91,共5页
目的建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测HBV DNA的方法,并实现对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA的精准检测。方法构建pUC57-HBV质粒作为阳性对照质粒,设计合成HBV DNA ddPCR引物及探针,以梯度稀释的阳性对照质...
目的建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测HBV DNA的方法,并实现对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA的精准检测。方法构建pUC57-HBV质粒作为阳性对照质粒,设计合成HBV DNA ddPCR引物及探针,以梯度稀释的阳性对照质粒为模板进行ddPCR检测,完成标准曲线构建和检出限分析,并进行检测的重复性和特异性分析。收集首都医科大学附属北京佑安医院19例乙型肝炎低病毒血症患者的血浆样本(HBV DNA<10 IU/mL),提取HBV DNA后进行ddPCR检测。结果建立的基于ddPCR技术检测HBV DNA的方法检测下限低至1 copy/μL(阳性质粒稀释法);对3种不同拷贝的阳性对照质粒(1×10^(2)、1×10^(1)、1×10^(0) copies/μL)重复检测的变异系数分别为18.8%、9.9%、9.7%,且具有100%特异性;应用该方法在低于临床检测下限的乙型肝炎低病毒血症患者中,以1 copy/μL为临界值,HBV DNA的阳性检出率为68.42%。结论建立的ddPCR检测低病毒载量HBV DNA检测方法能够高灵敏和高特异地对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA实现绝对定量。
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关键词
微滴式数字PCR
乙型肝炎病毒
低病毒血症
HBV
DNA
精准检测
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职称材料
题名
基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测
被引量：
1
1
作者
范子豪
田原
徐玲
曹亚玲
陈思思
潘桢桢
张向颖
段钟平
任锋
机构
首都医科大学附属北京佑安医院
出处
《临床检验杂志》
CAS
2022年第2期87-91,共5页
基金
国家自然科学基金(81770611,82002243)
北京自然科学基金和北京市教委联合资助重点项目(KZ202010025035)
+3 种基金
首都卫生发展科研专项重点攻关项目(首发2020-1-1151,首发2021-1G-2181)
北京市科技计划“首都临床诊疗技术研究及示范应用”专项课题(Z191100006619096、Z191100006619097)
北京市优秀人才培养项目(2018000021469G289)
北京市医院管理中心“青苗”计划专项(QML20201702)。
文摘
目的建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测HBV DNA的方法,并实现对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA的精准检测。方法构建pUC57-HBV质粒作为阳性对照质粒,设计合成HBV DNA ddPCR引物及探针,以梯度稀释的阳性对照质粒为模板进行ddPCR检测,完成标准曲线构建和检出限分析,并进行检测的重复性和特异性分析。收集首都医科大学附属北京佑安医院19例乙型肝炎低病毒血症患者的血浆样本(HBV DNA<10 IU/mL),提取HBV DNA后进行ddPCR检测。结果建立的基于ddPCR技术检测HBV DNA的方法检测下限低至1 copy/μL(阳性质粒稀释法);对3种不同拷贝的阳性对照质粒(1×10^(2)、1×10^(1)、1×10^(0) copies/μL)重复检测的变异系数分别为18.8%、9.9%、9.7%,且具有100%特异性;应用该方法在低于临床检测下限的乙型肝炎低病毒血症患者中,以1 copy/μL为临界值,HBV DNA的阳性检出率为68.42%。结论建立的ddPCR检测低病毒载量HBV DNA检测方法能够高灵敏和高特异地对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA实现绝对定量。
关键词
微滴式数字PCR
乙型肝炎病毒
低病毒血症
HBV
DNA
精准检测
Keywords
droplet digital PCR
hepatitis B virus
low-load viremia
HBV DNA
accurate detection
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测
范子豪
田原
徐玲
曹亚玲
陈思思
潘桢桢
张向颖
段钟平
任锋
《临床检验杂志》
CAS
2022
1
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