合成生物学概述及其在兽医领域的应用前景展望

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作者 潘俊慧 周凯钰太 +6 位作者 王素春 许铭柯 隋金钰 魏世萌 祁倩 李超 王楷宬 《中国动物检疫》 2025年第2期57-65,共9页

合成生物学是以人工设计和基因组改造为核心的一门多学科交叉融合的前沿学科,其基于工程学原理,通过人工合成生物调控元件、模块和基因线路调控网络等对底盘细胞进行设计和改造,以实现底盘细胞和基因线路的工程化。近年来,合成生物学在... 合成生物学是以人工设计和基因组改造为核心的一门多学科交叉融合的前沿学科,其基于工程学原理,通过人工合成生物调控元件、模块和基因线路调控网络等对底盘细胞进行设计和改造,以实现底盘细胞和基因线路的工程化。近年来,合成生物学在我国兽医领域得到快速发展,目前已被用于基因工程疫苗研究、病原微生物检测、抗生素替代品研发等方面,并在兽用药品与生物制品研发方面展示出了巨大应用潜力,但同时也伴随着生物安全、伦理、监管、公众认知等方面的挑战。本文对合成生物学进行概述,对其在兽医领域中的研究和应用前景进行展望,以期为合成生物学在兽医领域的深入应用提供参考。 展开更多

关键词 合成生物学 兽医领域 基因工程 应用前景

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内含赤羽病病毒S基因假病毒的构建、鉴定及初步应用

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作者 李超 潘俊慧 +6 位作者 王素春 隋金钰 魏世萌 祁倩 吴发兴 李博文 王楷宬 《中国动物检疫》 2025年第1期96-102,共7页

为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核酸诊断试剂中的阳性对照品,本研究首先合成AKAV S全基因,然后构建重组慢病毒穿梭载体pLenti-GIII-CMV-CBH-GFP-2A-Puro-AKAV,并将测序鉴定成功的重组慢病毒穿梭载体与包装载体共转染293T细胞;收... 为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核酸诊断试剂中的阳性对照品,本研究首先合成AKAV S全基因,然后构建重组慢病毒穿梭载体pLenti-GIII-CMV-CBH-GFP-2A-Puro-AKAV,并将测序鉴定成功的重组慢病毒穿梭载体与包装载体共转染293T细胞;收获纯化的细胞培养液上清,进行核酸质粒残留检测;将上清感染293T细胞,观察绿色荧光蛋白基因表达情况,并采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验检测上清中是否存在AKAV S基因片段,最终通过数字RT-PCR方法进行绝对定值。结果显示;纯化的细胞培养液上清中无核酸质粒残留,在培养72 h的293T细胞中可观察到绿色荧光;采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验均可扩增出AKAV S基因目的片段;采用数字RT-PCR方法,将制备的假病毒溶液拷贝数浓度定值为3.36×10^(3)copies/μL。结果表明,本研究成功构建了含AKAV S全基因片段的假病毒,可作为AKAV核酸检测的阳性对照品,为后续研发AKAV核酸诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 赤羽病病毒 S基因 假病毒粒子 阳性对照品

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全球兽药产业发展现状 被引量：4

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作者 潘俊慧 周凯钰太 +4 位作者 王素春 冷寅赫 陈义平 范根成 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期52-58,共7页

兽药产业是促进养殖业健康发展的基础性产业,在保障动物源性食品安全和公共卫生安全等方面具有重要作用。为了解全球兽药行业发展状况,对全球兽药产业结构、发展现状和研发投入等进行了综述分析。受全球动物疫病频发、政府支持力度加大... 兽药产业是促进养殖业健康发展的基础性产业,在保障动物源性食品安全和公共卫生安全等方面具有重要作用。为了解全球兽药行业发展状况,对全球兽药产业结构、发展现状和研发投入等进行了综述分析。受全球动物疫病频发、政府支持力度加大、公众对动物源食品卫生安全要求提高、宠物市场快速增长等因素影响,全球兽药产业市场规模快速增长,2015—2021年全球兽药总销售额从357.16亿美元增长到477.83亿美元,复合增长率为3.70%;全球兽药产业发展高度集中,北美洲、欧洲和亚洲掌控了全球80.52%的兽药市场;兽用生物制品市场份额占比持续增长,从2005年的25%增加到2020年的30%,而兽用化学药品市场份额却呈下降趋势,从63%降到59%;全球兽药产业结构逐步调整,宠物行业兽药销售额逐步上升,已接近食品动物份额;兽药研发投入持续加大,全球兽药行业专利授权数量2019年后呈现快速上升趋势。本文通过分析全球兽药产业结构及发展变化趋势,了解制约产业发展的因素及当前面临的形势和挑战,以期为我国兽药行业的高质量发展提供新思路和新举措。 展开更多

关键词 兽药产业 生物制品 发展现状 全球

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动物疫病活载体疫苗研究进展 被引量：2

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作者 周凯钰太 潘俊慧 +5 位作者 王素春 禹兰平 杨文静 梁晚枫 孙福亮 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期47-57,共11页

活载体疫苗是以细菌或病毒作为载体表达外源抗原和治疗因子的载体系统,具有安全性高、毒力返祖风险低、成本低,可诱导免疫机体产生高水平的体液免疫、细胞免疫或黏膜免疫等优点,是目前最具发展潜力的基因工程疫苗之一,在动物疫病防控领... 活载体疫苗是以细菌或病毒作为载体表达外源抗原和治疗因子的载体系统,具有安全性高、毒力返祖风险低、成本低,可诱导免疫机体产生高水平的体液免疫、细胞免疫或黏膜免疫等优点,是目前最具发展潜力的基因工程疫苗之一,在动物疫病防控领域应用较多。病毒载体包括DNA病毒(如腺病毒、腺相关病毒和痘病毒等)和RNA病毒(如新城疫病毒、流感病毒等);细菌载体包括减毒致病菌与非致病菌两类,主要包括乳酸菌、沙门氏菌、大肠杆菌等。活载体疫苗常用的抗原呈递策略有载体-宿主平衡致死系统、微生物表面展示系统。多种疫苗载体的开发及抗原呈递策略的选择,使得活载体疫苗的使用价值最大化。不同载体疫苗在预防疫病方面均有不同优缺点,应根据实际情况选择最优最适合的活载体疫苗。本文综述了动物疫病防控领域的病毒和细菌活载体疫苗研究进展及其抗原呈递方式,以期为活载体疫苗的进一步研究提供参考。 展开更多

关键词 活载体疫苗 病毒载体 细菌载体 疫苗开发 抗原呈递

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猫冠状病毒病诊断技术研究进展

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作者 魏世萌 郝英男 +4 位作者 潘俊慧 王素春 周凯钰太 祁倩 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2024年第8期76-82,共7页

猫冠状病毒病是由猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)感染引起的一种以上呼吸道、肠道和胸腹膜炎症为主的猫传染性疾病,主要通过粪口途径传播,在全世界均有流行,目前无有效疫苗和特效治疗药物。其中由猫传染性腹膜炎病毒引发的猫传染... 猫冠状病毒病是由猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)感染引起的一种以上呼吸道、肠道和胸腹膜炎症为主的猫传染性疾病,主要通过粪口途径传播,在全世界均有流行,目前无有效疫苗和特效治疗药物。其中由猫传染性腹膜炎病毒引发的猫传染性腹膜炎致死率极高,且不易诊断和预防,已成为病死率最高的猫病毒性疾病之一。猫冠状病毒病的临床诊断和大部分实验室检测技术均不具有特异性,对于区分猫肠道冠状病毒和猫传染性腹膜炎病毒感染还存在一些困难。目前,基于PCR技术的RT-PCR和RT-qPCR特异性相对较高,RT-LAMP和RT-RAA等新技术的开发和应用可逐步填补临床快速检测的空白。本文通过对猫冠状病毒病诊断技术研究进展进行综述,以期为建立猫冠状病毒病快速诊断方法和制定诊断技术标准奠定基础。 展开更多

关键词 猫冠状病毒 猫传染性腹膜炎病毒 诊断技术 临床诊断 实验室诊断

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赤羽病病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

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作者 李超 王素春 +5 位作者 隋金钰 潘俊慧 魏世萌 祁倩 周凯钰太 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2024年第9期111-117,共7页

为建立一种快速、灵敏的赤羽病病毒(Akabanediseasevirus,AKAV)核酸检测方法,以AKAV S基因为靶基因,设计特异性引物和Taq Man探针,通过优化反应体系和条件,建立了AKAV荧光定量RT-PCR检测方法,随后开展了敏感性、特异性及重复性评估,并... 为建立一种快速、灵敏的赤羽病病毒(Akabanediseasevirus,AKAV)核酸检测方法,以AKAV S基因为靶基因,设计特异性引物和Taq Man探针,通过优化反应体系和条件,建立了AKAV荧光定量RT-PCR检测方法,随后开展了敏感性、特异性及重复性评估,并利用该方法与AKAV检疫行业标准推荐方法同时对临床采集的80份牛羊血液样品进行检测,以检验方法的临床应用效果。结果显示:本研究建立的检测方法敏感性较高,最低检测限为13.4 copies/μL;特异性良好,与口蹄疫病毒、牛冠状病毒、牛结节性皮肤病病毒、牛病毒性腹泻病毒、传染性牛鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒、牛白血病病毒等均无交叉反应;组内试验变异系数为0.93%~2.47%,组间试验为1.25%~2.76%,重复性良好;利用建立的方法从80份临床样品中检出AKAV阳性样品21份,该检测结果与AKAV检疫行业标准推荐方法的符合率为98.75%。结果表明,本研究建立的AKAV荧光定量RT-PCR检测方法敏感性高,特异性及重复性好,适用于赤羽病临床检测,为赤羽病病原学监测和诊断技术标准开发提供了技术支撑。 展开更多

关键词 赤羽病病毒 实时荧光定量RT-PCR 方法建立 初步应用

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GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒的病原特性分析 被引量：2

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作者 王素春 周凯钰太 +9 位作者 潘俊慧 肖志宇 徐太辉 李金积 张富友 禹兰平 杨文静 崔成都 孙福亮 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2023年第7期8-16,共9页

为了解GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)的病原特性,筛选6株GI-19型IBV进行EID_(50)测定以及鸡胚致病力和雏鸡致病性试验,并应用高通量测序技术进行基因组测序,分析病毒基因组和主要结构蛋白编码基... 为了解GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)的病原特性,筛选6株GI-19型IBV进行EID_(50)测定以及鸡胚致病力和雏鸡致病性试验,并应用高通量测序技术进行基因组测序,分析病毒基因组和主要结构蛋白编码基因生物特性。结果显示:IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株对鸡胚有致病性,导致鸡胚表现胚体蜷缩、矮小等典型病变特征,经SPF鸡胚传代至第5代,表现较为稳定的EID_(50)(10^(-5.33)/0.1 mL),但其对雏鸡无致病性;IBV/Chicken/Sichuan/C1452/2021分离株对鸡胚没有致病性,但将其接种1日龄雏鸡,可导致雏鸡出现33.33%(5/15)的发病率,引起的典型病变为雏鸡肾脏尿酸盐沉积。对6株GI-19型IBV分离株的基因组和主要结构蛋白编码基因进行系统进化分析和生物特性分析,发现IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株与其他分离株存在明显差异,且在1a和1b基因区域存在重组现象。结果表明:我国流行的部分IBV毒株对鸡胚和雏鸡的致病性存在差异;IBV毒株S1基因的变异可能会影响其致病力,而N基因的变异可能会影响其感染细胞的能力。本研究分析了部分GI-19型IBV毒株的病原学特征,为揭示IBV的致病机理和免疫机制奠定了基础,为制定鸡传染性支气管炎防控策略提供了依据。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 致病性 高通量测序 病原特性

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等温扩增技术概述及其在动物病原检测中的应用 被引量：13

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作者 禹兰平 王楷宬 +6 位作者 潘俊慧 张富友 杨文静 周凯钰太 崔成都 孙福亮 王素春 《中国动物检疫》 CAS 2022年第12期96-103,共8页

等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行体外核酸扩增的技术,近几年其研究热度很高。本文从技术原理、优缺点及在动物病原检测应用等方面,对环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶等温扩增技术、依赖核酸序列扩增技术(NASBA)、交叉引物等... 等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行体外核酸扩增的技术,近几年其研究热度很高。本文从技术原理、优缺点及在动物病原检测应用等方面,对环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶等温扩增技术、依赖核酸序列扩增技术(NASBA)、交叉引物等温扩增技术(CPA)和赖解旋酶等温扩增技术(HDA)等5种常见等温扩增技术进行了综述。LAMP技术操作简单,不依赖特殊设备,但引物设计较为复杂,研发多重LAMP检测方法有很大困难。重组酶等温扩增技术不受场地条件约束,扩增时间短,但容易造成气溶胶污染,因此一般用于实验研究。NASBA技术扩增效率高,不易产生污染,但成本偏高,操作相对复杂,在目前疫病检测研究中的应用逐渐减少。CPA技术操作相对简单,灵敏度高,特异性好,但结果判断受主观因素影响易造成假阳性或假阴性。HDA技术引物设计相对简单,但反应体系较为复杂,因此不适合扩增长序列。不同的等温扩增技术需要根据实际需求和场景条件来选择。等温扩增技术作为一种新兴技术具备许多优点,但仍需要不断改进,未来与微流体芯片、纳米金、CRISPR等技术联合应用,将会实现更加快捷、准确、简便的检测,从而为动物疫病检测提供更好的服务。 展开更多

关键词 等温扩增技术 动物病原检测 研究进展

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禽产气荚膜梭菌研究进展 被引量：4

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作者 杨文静 张富友 +10 位作者 刘娜 王琳 王素春 潘俊慧 禹兰平 周凯钰太 张炜 田睿 梁晚枫 孙福亮 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2023年第3期46-53,共8页

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)是重要的食源性病原体之一,可对人类和动物健康造成严重威胁。CP在家禽中主要引起禽坏死性肠炎,严重影响了全球肉鸡贸易与生产。关于禽CP的研究当前主要集中于检测及分型方法、疫苗和耐药性方... 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)是重要的食源性病原体之一,可对人类和动物健康造成严重威胁。CP在家禽中主要引起禽坏死性肠炎,严重影响了全球肉鸡贸易与生产。关于禽CP的研究当前主要集中于检测及分型方法、疫苗和耐药性方面。目前禽CP疫苗多处于实验室研发阶段,因此禽CP感染的防治主要依靠抗生素,而抗生素的频繁使用又导致了菌株耐药性问题,防治效果有限。因此,CP耐药性研究以及临床诊断技术完善及疫苗研发推进迫在眉睫。本文简述了CP的病原特点、致病机理及禽间的优势流行分型,梳理了禽CP不同检测方法的优点及分型方法,阐述了禽CP耐药现状以及疫苗研发方向及进展,提出了禽CP感染辅助防治措施,以期为CP感染防控提供参考。 展开更多

关键词 禽产气荚膜梭菌 流行病学 病原学 诊断技术 动物模型

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2020—2022年我国部分地区牛赤羽病回溯性监测与分析 被引量：4

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作者 李超 迟田英 +5 位作者 李博文 潘俊慧 王楷宬 康京丽 陈义平 吴发兴 《中国动物检疫》 CAS 2023年第12期12-15,32,共5页

为了解赤羽病近几年在我国的流行状况和分布特征,采用竞争ELISA检测方法,对2020—2022年采集自我国12个省份150个场点的1327份牛血清样品进行赤羽病病毒抗体回溯性监测与分析。结果显示:赤羽病病毒抗体场群阳性率达67.3%,个体阳性率达41... 为了解赤羽病近几年在我国的流行状况和分布特征,采用竞争ELISA检测方法,对2020—2022年采集自我国12个省份150个场点的1327份牛血清样品进行赤羽病病毒抗体回溯性监测与分析。结果显示:赤羽病病毒抗体场群阳性率达67.3%,个体阳性率达41.5%;从空间上看,赤羽病流行呈现明显的“南高北低”特点,尤其以炎热、潮湿的广西和广东流行率最高,说明赤羽病在我国呈区域性流行态势;从时间上看,赤羽病流行没有规律的时间变化特点。本研究初步摸清了近几年赤羽病在我国部分地区的流行情况,并提出了针对性建议,为我国赤羽病防控提供了数据支撑和参考。 展开更多

关键词 赤羽病 竞争ELISA 回溯性监测 虫媒病

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禽传染性支气管炎概述 被引量：3

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作者 周凯钰太 王素春 +6 位作者 肖志宇 潘俊慧 禹兰平 杨文静 崔成都 孙福亮 王楷宬 《中国动物检疫》 CAS 2023年第5期61-66,共6页

禽传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种禽类传染病,主要造成禽呼吸系统和泌尿生殖系统病变。IBV具有高度传染性,可引起雏鸡死亡,肉鸡增重减缓,蛋鸡产蛋下降。IBV易发生变异,血清型和基因型众多,不同基因型毒株之... 禽传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种禽类传染病,主要造成禽呼吸系统和泌尿生殖系统病变。IBV具有高度传染性,可引起雏鸡死亡,肉鸡增重减缓,蛋鸡产蛋下降。IBV易发生变异,血清型和基因型众多,不同基因型毒株之间存在较大的抗原差异,导致疫苗及药物研发存在较大难度,给该病防治带来一定挑战。多种血清学和分子生物学技术已用于IBV检测,如酶联免疫吸附试验、反转录聚合酶链式反应、重组酶介导扩增技术等。针对新型IBV仍需研究敏感性、特异性好的检测方法及开发安全性高、免疫效果好的新型疫苗。本文围绕IB的病原学、流行病学以及病毒分型方法、变异机制及检测方法等进行综述,以期为该病后期研究提供参考。 展开更多

关键词 禽传染性支气管炎 病原学 流行病学 变异机制 检测方法

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中国煤炭开采技术现状分析 被引量：6

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作者 潘俊慧 《能源与节能》 2018年第10期11-12,共2页

随着中国经济和科技发展,煤炭开采机械化取得了重大进展。通过对中国煤炭开采技术的分析,指出了中国煤矿未来发展的趋势,以期促进相关工作的发展。

关键词 煤矿开采 开采技术 展望

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