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异柠檬酸脱氢酶1突变对胶质瘤细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 田金成 武艳玮 +4 位作者 马霜 马志虎 游南林 曹相玫 刘仲涛 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第5期533-538,共6页
目的:观察异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变对人胶质瘤U87细胞增殖和蛋白激酶B(Akt)信号分子表达的影响。方法:分别用野生型(IDH1)和突变型(mutIDH1)重组慢病毒感染U87细胞,CCK8和平板克隆形成实验检验细胞增殖能力;Western Blot检测IDH1突变... 目的:观察异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变对人胶质瘤U87细胞增殖和蛋白激酶B(Akt)信号分子表达的影响。方法:分别用野生型(IDH1)和突变型(mutIDH1)重组慢病毒感染U87细胞,CCK8和平板克隆形成实验检验细胞增殖能力;Western Blot检测IDH1突变型基因和磷酸化Akt(p-Akt1/2/3)的蛋白表达量;TCGA数据库分析Akt在高级别胶质瘤(GBM)和低级别胶质瘤(LGG)中的表达情况;免疫组化检测Akt和p-Akt在GBM和LGG中的表达和定位。结果:IDH1和mutIDH1重组慢病毒成功感染U87细胞,CCK8实验表明mutIDH1组细胞活性减弱;平板克隆形成实验显示mutIDH1组细胞集落形成能力低于IDH1组;TCGA数据库分析显示,Akt在GBM和LGG中的表达高于正常脑组织;免疫组化显示Akt和p-Akt1/2/3在GBM和LGG中呈高表达;Western Blot显示mutIDH1组中Akt表达低于IDH1组。结论:IDH1突变能够减弱胶质瘤细胞的增殖,抑制Akt信号分子磷酸化活化。 展开更多
关键词 异柠檬酸脱氢酶1 胶质瘤 蛋白激酶B U87细胞
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雷帕霉素通过活化MAPK促进神经胶质瘤U87-MG细胞自噬 被引量:6
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作者 曹相玫 徐辉 +3 位作者 武艳玮 游南林 于佳翔 马杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期654-660,共7页
目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和... 目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和平板集落形成实验检测细胞集落形成能力,Western blot法检测mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ、beclin-1、p-S6、p70S6K、p-MAPK及GFAP蛋白水平的变化。结果:MTT实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞的活力,并呈现剂量依赖性(P<0.05)。软琼脂和平板集落形成实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞集落形成数(P<0.05)。Western blot结果显示,Rapa处理后mTOR及p-mTOR蛋白水平降低;自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1水平显著升高(P<0.05);自噬相关信号通路分子p70S6K表达趋势呈抛物线轨迹,差异无统计学意义(P>0.05);p-S6表达趋势与p70S6K相反,Rapa干预后p-S6表达显著降低,在40μmol/L Rapa干预后上升至NC组的水平;p-MAPK和GFAP水平显著增高(P<0.05)。结论:Rapa通过激活MAPK促进细胞自噬,从而抑制U87-MG细胞增殖。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 自噬 雷帕霉素
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