体细胞克隆胚胎发育效率影响因素及其改进措施

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作者 叶鸥颉 董亚铮 +1 位作者 洪林君 李紫聪 《中国畜禽种业》 2025年第10期16-26,共11页

动物体细胞克隆(体细胞核移植)技术克隆技术在复制扩繁优良种畜、保护濒危动物、制备基因修饰动物、治疗人类疾病等方面有着广泛的应用前景,但目前仍存在效率低、技术难度大等问题。该文简要回顾了动物体细胞克隆技术的主要发展历史,对... 动物体细胞克隆(体细胞核移植)技术克隆技术在复制扩繁优良种畜、保护濒危动物、制备基因修饰动物、治疗人类疾病等方面有着广泛的应用前景,但目前仍存在效率低、技术难度大等问题。该文简要回顾了动物体细胞克隆技术的主要发展历史,对动物体细胞克隆的总体操作流程做了简要介绍。随后通过总结现有科研成果,将影响动物体细胞克隆胚胎发育效率的主要因素分为“克隆操作技术复杂精细”、“卵母细胞质量有待提高”及“克隆胚胎表观遗传修饰和基因表达错误”三大层面,并归纳已研发出的解决方案,以使更多人了解该技术,并推动其创新发展与落地应用。 展开更多

关键词 动物 体细胞克隆 胚胎 发育效率

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家畜精液耐冻蛋白标志物研究进展

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作者 王鹏耀 杨文政 +2 位作者 陈伟东 洪林君 彭妙莲 《中国畜禽种业》 2025年第7期54-65,共12页

精液冷冻保存技术在种质资源保护和人工授精应用方面意义重大,但精子冻融后存在活率下降等问题,限制了该技术的推广应用。由于不同个体精子耐冻性存在差异,可通过耐冻标志物筛选耐冻性高的精液来提高冷冻效率。该文对现有的水通道蛋白... 精液冷冻保存技术在种质资源保护和人工授精应用方面意义重大,但精子冻融后存在活率下降等问题,限制了该技术的推广应用。由于不同个体精子耐冻性存在差异,可通过耐冻标志物筛选耐冻性高的精液来提高冷冻效率。该文对现有的水通道蛋白、热休克蛋白等耐冻蛋白标志物的特性和应用情况展开系统综述,剖析其在精子冷冻过程中的作用机制,旨在为深入理解精子冷冻损伤的机制提供参考资料,进而为提高精液冷冻保存的效率提供理论支持与实践指导。 展开更多

关键词 精液 冷冻保存 蛋白质 耐冻标志物

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基于微课的《养猪学》课程混合式教学探究 被引量：1

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作者 洪林君 徐铮 +3 位作者 顾婷 黄思秀 蔡更元 刘德武 《家畜生态学报》 北大核心 2022年第1期94-96,共3页

针对动物科学专业《养猪学》课程理论知识落后于现代化的生产实践,以及学生对课程的学习缺乏兴趣的问题,将在线的教学模式-微课与面授的教学模式相融合,形成特色的《养猪学》混合教学模式,从而丰富课程内容、提升学生学习积极性,最终提... 针对动物科学专业《养猪学》课程理论知识落后于现代化的生产实践,以及学生对课程的学习缺乏兴趣的问题,将在线的教学模式-微课与面授的教学模式相融合,形成特色的《养猪学》混合教学模式,从而丰富课程内容、提升学生学习积极性,最终提高教学质量。 展开更多

关键词 养猪学 微课 混合式教学

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“五维一体”教学创新模式在《养禽学》课程中的实践 被引量：2

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作者 洪林君 罗文 《中国家禽》 北大核心 2022年第10期121-124,共4页

《养禽学》课程是动物科学专业的核心课程,主要包括家禽生产、管理、疾病预防等方面的知识,是实践性很强的课程。传统的课程教学存在知识体系散、学生参与度不高、实践性不足、“三农情怀”低下等痛点。通过对《养禽学》课程开展“以学... 《养禽学》课程是动物科学专业的核心课程,主要包括家禽生产、管理、疾病预防等方面的知识,是实践性很强的课程。传统的课程教学存在知识体系散、学生参与度不高、实践性不足、“三农情怀”低下等痛点。通过对《养禽学》课程开展“以学生发展为中心”,以适应行业发展需求为导向,以高阶能力培育为目标的教学改革,从教学理念、教学内容、课程思政、教学方法以及课程评价五个维度进行教学创新与实践,形成“五维一体”的教学创新模式可以提高教学质量和效果,增强学生创新能力、实践能力和“三农情怀”。 展开更多

关键词 五维一体 混合式教学 《养禽学》 创新思维 实践能力

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组蛋白H3K27me3对骨骼肌发育调控研究进展 被引量：4

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作者 甘炎民 周健 +7 位作者 全绒 洪林君 李紫聪 郑恩琴 刘德武 吴珍芳 蔡更元 顾婷 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期285-292,共8页

组蛋白甲基化是发生在核小体核心组蛋白各亚基N-端肽链的一种修饰方式。在组成核小体的4种亚基中,H3亚基N-端肽链第4、9、27、36和79等位点的赖氨酸为甲基化热点,甲基化类型包括一、二、三甲基化(mono-, di-, tri-methylation)。H3K27me... 组蛋白甲基化是发生在核小体核心组蛋白各亚基N-端肽链的一种修饰方式。在组成核小体的4种亚基中,H3亚基N-端肽链第4、9、27、36和79等位点的赖氨酸为甲基化热点,甲基化类型包括一、二、三甲基化(mono-, di-, tri-methylation)。H3K27me3是发生在组蛋白H3亚基第27位赖氨酸的三甲基化,主要发挥转录抑制的作用,参与骨骼肌的发育调控。研究表明,H3K27me3能够与骨骼肌增殖和分化的关键转录因子(如MyoD和MyoG等)及细胞周期蛋白特异性结合,并与其他表观遗传调控因子lncRNA及miRNA等互作,对骨骼肌的增殖和分化时间以及程度进行精细调控。本文系统介绍了组蛋白甲基化的类型以及H3K27甲基化和去甲基化的生物学过程,总结了目前已报道的H3K27me3在骨骼肌成肌细胞增殖和分化过程中发挥的作用,以期辅助科研工作者了解H3K27me3在骨骼肌发育过程中的作用,以及为进一步提高哺乳动物肌肉品质提供参考。 展开更多

关键词 组蛋白 甲基化 骨骼肌 H3K27me3

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广东地方畜禽遗传资源保护与开发利用 被引量：11

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作者 黄思秀 蔡更元 +1 位作者 吴珍芳 洪林君 《中国畜禽种业》 2021年第3期3-5,共3页

地方畜禽遗传资源是国家战略性的生物资源,对维系生物多样性和促进畜牧业可持续发展具有重要意义。广东省地方畜禽遗传资源丰富,畜禽种业基础好,政府历来重视畜禽遗传资源保护与管理工作。文章对目前广东省在地方畜禽保护体系建设、保... 地方畜禽遗传资源是国家战略性的生物资源,对维系生物多样性和促进畜牧业可持续发展具有重要意义。广东省地方畜禽遗传资源丰富,畜禽种业基础好,政府历来重视畜禽遗传资源保护与管理工作。文章对目前广东省在地方畜禽保护体系建设、保种技术研发、遗传资源开发利用等方面取得的成效进行介绍,并针对保种中存在的问题及今后的发展提出建议。以期能为广东省及我国地方畜禽资源的保护及其合理开发利用提供参考。 展开更多

关键词 畜禽 遗传资源 保护 开发利用 对策

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传统猪场精细化管理探讨 被引量：2

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作者 周臣 胡群 +7 位作者 贺艳娟 顾婷 郑恩琴 洪林君 蔡更元 刘德武 吴珍芳 徐铮 《现代农业科技》 2019年第5期205-206,211,共3页

本文从设备老化、兽药滥用、水料浪费、管理松懈4个方面对传统猪场存在的问题进行了分析,并从生产管理和人员管理2个方面提出了建议,以期为猪场经济效益的提高提供参考。

关键词 传统猪场 问题 生产管理 人员管理

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猪精液冷冻保存技术研究进展 被引量：10

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作者 谢言射 徐志谦 +3 位作者 蔡更元 吴珍芳 洪林君 黄思秀 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第10期78-83,共6页

目前,中国生猪养殖主要利用新鲜精液人工授精繁殖为主,但鲜精体外保存时间较短且精子质量下降较快,极大地影响了公猪精液的利用效率。为了降低冷冻过程中猪精子损伤、提高精子解冻后活力和受精能力,国内外科研工作者对精液稀释液、解冻... 目前,中国生猪养殖主要利用新鲜精液人工授精繁殖为主,但鲜精体外保存时间较短且精子质量下降较快,极大地影响了公猪精液的利用效率。为了降低冷冻过程中猪精子损伤、提高精子解冻后活力和受精能力,国内外科研工作者对精液稀释液、解冻剂、冷冻程序等方面进行了深入探索并取得了突破性进展。该文主要介绍了猪精液冷冻保存技术的发展简况、影响猪精液冷冻过程精子质量的因素、猪精液稀释液的机理,综述了猪精液冷冻保存的研究进展,旨在为相关研究以及生产实际应用提供理论参考。 展开更多

关键词 猪 精液 冷冻保存 研究进展

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Toll样受体7/8在公猪生殖系统中的表达及其配体对猪X/Y精子分选效果评价 被引量：5

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作者 吴昌华 陈伟东 +4 位作者 杨文政 莫健新 洪林君 张献伟 黄思秀 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1490-1499,共10页

旨在分析Toll样受体7/8(TLR7/8)在公猪精子及生殖器官中的表达情况,并探讨是否能通过其配体处理的方式分离猪X精子和Y精子。本研究采用qRT-PCR分析3头健康成年公猪睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾以及精子中TLR 7和TLR 8基因的mRNA表达水... 旨在分析Toll样受体7/8(TLR7/8)在公猪精子及生殖器官中的表达情况,并探讨是否能通过其配体处理的方式分离猪X精子和Y精子。本研究采用qRT-PCR分析3头健康成年公猪睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾以及精子中TLR 7和TLR 8基因的mRNA表达水平,利用免疫组化检测公猪睾丸和附睾中TLR7和TLR8蛋白的表达,并通过细胞免疫荧光分析其在不同物种(健康成年小鼠、公牛和公猪)精子中的表达情况,将其配体R848与猪精子共孵育,研究其对精子活力以及X/Y精子分离的影响。结果表明,TLR 7和TLR 8 mRNA在公猪睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾组织以及精子中均表达;免疫组化结果显示,TLR7/8蛋白在睾丸中主要表达于生殖细胞,在附睾中主要表达于柱状细胞微绒毛中;细胞免疫荧光结果表明,TLR7和TLR8蛋白只表达于小鼠和牛X精子尾部,Y精子中不表达,但TLR7和TLR8蛋白在公猪X和Y精子中都表达且表达模式无显著差异,TLR7蛋白主要表达于猪精子头部顶体区域,TLR8蛋白主要表达于猪精子尾部;与对照组相比,用TLR7和TLR8配体R848孵育猪精子后,精子活力降低,但上层精子的性别比例无显著差异(P>0.05)。以上结果表明,TLR7和TLR8在猪X精子和Y精子间表达无显著差异,但其表达模式与小鼠和牛存在差异,因此TLR7/8可能不适用于猪X精子和Y精子的分离。 展开更多

关键词 TLR7/8 R848 公猪 性别控制

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猪妊娠过程中胎盘发育及其调控基因研究进展 被引量：9

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作者 胡群 叶南 +5 位作者 史泽宇 顾婷 蔡更元 刘德武 吴珍芳 洪林君 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1633-1638,共6页

胎盘是母体与胎儿进行营养物质、气体及废弃物交换的重要器官。妊娠过程中,猪胎盘功能是影响母猪产仔数、死胎数及断奶前死亡率的最重要因素之一。作者介绍了猪妊娠早期胎盘的建立过程及形态变化、妊娠中期胎盘褶皱的形成、妊娠后期胎... 胎盘是母体与胎儿进行营养物质、气体及废弃物交换的重要器官。妊娠过程中,猪胎盘功能是影响母猪产仔数、死胎数及断奶前死亡率的最重要因素之一。作者介绍了猪妊娠早期胎盘的建立过程及形态变化、妊娠中期胎盘褶皱的形成、妊娠后期胎盘的进一步发育,阐述了这3个妊娠阶段猪胎盘的形态变化与其对应的胎盘功能之间的关系,并介绍了目前所发现的调控猪胎盘建立和发育的相关基因,包括透明质酸酶(HYAL)、组织蛋白酶(CTSB和CTSL1)及乙酰肝素酶(HPSE)基因,为提高母猪胎盘效率、增加母猪繁殖力提供科学依据。 展开更多

关键词 猪 妊娠 胎盘发育

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猪胎盘特异基因1(PLAC1)的克隆、组织表达及遗传方式研究

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作者 邓大栋 洪林君 +2 位作者 潘丽 刘榜 余梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期37-43,共7页

旨在研究猪胎盘特异性基因PLAC1的表达规律,并对其基因结构、生物功能和遗传方式进行初步鉴定。本研究以妊娠26、50和95天的猪胎盘组织为材料,利用RACE-PCR及RT-PCR技术克隆猪PLAC1基因及其不同转录本的全长序列,同时通过原位杂交验证... 旨在研究猪胎盘特异性基因PLAC1的表达规律,并对其基因结构、生物功能和遗传方式进行初步鉴定。本研究以妊娠26、50和95天的猪胎盘组织为材料,利用RACE-PCR及RT-PCR技术克隆猪PLAC1基因及其不同转录本的全长序列,同时通过原位杂交验证其在胎盘中的表达模式。并检测猪PLAC1基因的序列变异。结果表明,猪PLAC1基因存在3种不同的转录本,3种转录本的CDS区完全相同,长525bp,编码174个氨基酸;组织表达谱和原位杂交结果显示,PLAC1基因特异性表达于猪胎盘绒毛膜上皮细胞中,并在不同妊娠时期差异表达,妊娠50和95天PLAC1mRNA的表达显著高于妊娠26天(P<0.01)。猪群中PLAC1基因的SNP基因分型检测结果表明该基因遵循半合基因的遗传方式。本试验结果为研究猪PLAC1基因在胎盘发育过程中的生物功能奠定了基础。 展开更多

关键词 猪 胎盘 绒毛膜 PLAC1

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DNA甲基化在猪胚胎发育过程中的研究进展 被引量：2

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作者 甘建宇 张芯 +2 位作者 蔡更元 洪林君 黄思秀 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3287-3295,共9页

猪的胚胎发育需要经历受精、卵裂、孵化、形态转变、附植、器官分化等一系列重要的生理阶段。虽然在胚胎发育过程中基因的严格表达与正确指导是胚胎能否正常发育的决定性条件,但研究表明DNA甲基化修饰对胚胎的发育也起着必不可少的作用... 猪的胚胎发育需要经历受精、卵裂、孵化、形态转变、附植、器官分化等一系列重要的生理阶段。虽然在胚胎发育过程中基因的严格表达与正确指导是胚胎能否正常发育的决定性条件,但研究表明DNA甲基化修饰对胚胎的发育也起着必不可少的作用。DNA甲基化是一种常见且重要的表观遗传修饰,虽然不改变DNA的一级序列,但也包含可遗传信息,并在基因的转录调控中起重要作用。在猪的胚胎发育中,DNA甲基化呈现出高度动态的过程,这一过程受孕期母体营养和发育环境条件影响。本文将从胚胎早期发育、体细胞核移植和孕期母体营养三个方面来阐述DNA甲基化对胚胎发育的影响,为进一步研究猪胚胎在发育过程中的DNA甲基化机制和提高体细胞核移植的成功率提供参考。 展开更多

关键词 猪 DNA甲基化 胚胎发育 体细胞核移植 孕期营养 印记基因

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猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对胚胎附植的影响 被引量：1

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作者 匡婧靖 贺艳娟 +4 位作者 胡群 顾婷 吴珍芳 蔡更元 洪林君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1122-1132,共11页

旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响。本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白... 旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响。本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白在子宫中的表达定位。进一步用外泌体与猪胚胎滋养层细胞(porcine trophoblast,PTr2)共培养试验研究外泌体对TIMP2蛋白的靶向运输作用,最后在PTr2细胞中干扰和超表达TIMP2基因,利用CCK-8、EdU及划痕试验研究TIMP2蛋白对PTr2细胞增殖和迁移的影响。通过超速离心法成功分离到子宫腔液外泌体,其粒径主要分布在30~150 nm之间,WB试验结果表明,妊娠第12天猪子宫腔液外泌体中TIMP2蛋白含量显著增高(P<0.05),外泌体与滋养层细胞共培养试验表明,TIMP2蛋白能通过外泌体靶向运输到滋养层细胞。免疫组化结果发现,TIMP2蛋白在子宫内膜和胚胎中均表达,且在妊娠第12天子宫内膜中的表达量极显著高于妊娠第9天(P<0.01)。进一步通过体外细胞试验发现,干扰PTr2中的TIMP2基因,细胞增殖能力极显著增强(P<0.01),迁移能力显著增强(P<0.05);超表达该基因,细胞增殖能力极显著减弱(P<0.01),迁移能力也显著减弱(P<0.05)。以上结果表明,子宫腔液外泌体来源TIMP2蛋白可能由母体子宫内膜所分泌,并能通过外泌体靶向进入胚胎滋养层细胞调控其增殖和迁移,从而影响胚胎附植。 展开更多

关键词 外泌体 TIMP2 PTr2 胚胎附植

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长链非编码RNA MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞分化及肌纤维转化的影响 被引量：1

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作者 杨玉铭 赵鑫铭 +6 位作者 谭宝华 肖丽窈 芦格言 翟立君 黄奕扬 洪林君 顾婷 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期453-461,共9页

[目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞(PSCs)成肌分化及不同类型肌纤维转化的影响。[方法]选择3头6月龄杜洛克猪,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、背最长肌、腿肌、比目鱼肌和趾长伸肌组织,利用... [目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞(PSCs)成肌分化及不同类型肌纤维转化的影响。[方法]选择3头6月龄杜洛克猪,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、背最长肌、腿肌、比目鱼肌和趾长伸肌组织,利用实时荧光定量PCR检测MSTRG.14200在不同组织中的表达情况。构建MSTRG.14200过表达载体pcDNA3.1-14200并转染PSCs细胞,诱导分化3 d后收集细胞。通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测肌球蛋白重链(MyHC)、肌细胞生成素(MyoG)和肌分化因子(MyoD)、MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx mRNA和蛋白表达情况;利用免疫荧光法检测MyHC、MyHCⅠ和MyHCⅡb阳性细胞比率。[结果]MSTRG.14200在杜洛克猪不同组织中均有表达,且在背最长肌中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),在趾长伸肌和比目鱼肌中的表达量存在显著差异(P<0.05)。过表达MSTRG.14200后,细胞分化相关基因MyoD和MyHC的mRNA水平极显著升高(P<0.01),MyoD、MyoG和MyHC蛋白水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),MyHC阳性细胞比率极显著升高(P<0.01);肌纤维类型转化相关基因MyHCⅠ的mRNA和蛋白表达量及阳性细胞比例率均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),MyHCⅡb基因mRNA和蛋白表达量以及阳性细胞比率均显著升高(P<0.05)。[结论]MSTRG.14200具有促进猪骨骼肌成肌分化以及促进慢肌纤维向快肌纤维转化的作用。研究结果为探究猪骨骼肌纤维类型转化的分子机制提供理论基础。 展开更多

关键词 猪 长链非编码RNA(lncRNA) MSTRG.14200 成肌分化 肌纤维转化

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外泌体调控胚胎发育的研究进展 被引量：1

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作者 卢永昌 甘建宇 +1 位作者 黄思秀 洪林君 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第2期91-96,共6页

外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质... 外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质、RNA或其他因子通过调节胚胎微环境影响胚胎的生长发育。该文综述了外泌体中RNA及蛋白影响胚胎生长发育的调控作用,为深入探究外泌体对胚胎发育的影响机制提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 外泌体 胚胎发育 蛋白质 RNA

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哺乳动物子宫腔胞外囊泡的组分及功能研究进展

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作者 高威 周臣 洪林君 《现代畜牧兽医》 2019年第6期53-59,共7页

胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是细胞间通讯的一种媒介,包含两个大亚类-微泡和外泌体。胞外囊泡能选择性地包裹着脂质、蛋白质、mRNAs、miRNAs以及DNA等物质,可以远距离的运输到靶细胞,通过调控靶细胞的转录、翻译等来影响细胞... 胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是细胞间通讯的一种媒介,包含两个大亚类-微泡和外泌体。胞外囊泡能选择性地包裹着脂质、蛋白质、mRNAs、miRNAs以及DNA等物质,可以远距离的运输到靶细胞,通过调控靶细胞的转录、翻译等来影响细胞的功能。哺乳动物子宫腔液中含有丰富的胞外囊泡,它们对精子获能,胚胎与母体子宫间的相互识别以及胚胎附植都具有重要作用。本文主要对子宫腔液中胞外囊泡的组分及其在胚胎附植过程中的作用进行综述。 展开更多

关键词 哺乳动物 子宫 胞外囊泡 胚胎

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