文摘目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)H19对乳腺癌细胞顺铂(cisplatin/cisdiamminodichloroplatinum,DDP)耐药性的作用及其分子机制。方法:构建耐DDP人乳腺癌细胞株MCF7-Re;采用RT-qPCR检测lncRNA H19在人正常乳腺上皮细胞株MCF10A及人乳腺癌细胞株MCF7和MCF7-Re中的表达水平。构建lncRNA H19干扰质粒;采用CCK-8法检测DDP处理后MCF7-Re细胞的活力;采用TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、ATP结合盒蛋白B亚家族成员1(ATP-binding cassette protein subfamily B member 1,ABCB1)、Notch1和发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)的表达;构建Notch1过表达质粒,进行逆转实验验证lncRNA H19的作用机制。结果:lncRNA H19在MCF7-Re细胞中表达显著增加。干扰H19在DDP处理后进一步降低MCF7-Re细胞活力(P<0.01),耐药蛋白ABCB1表达显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著减少(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.01),并且Notch信号通路相关蛋白(Notch1和Hes1)的表达减少(P<0.01)。转染Notch1过表达质粒后,干扰lncRNA H19表达的MCF7-Re细胞活力得到一定程度的上升(P<0.01),耐药蛋白ABCB1表达显著增加(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著增加(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:干扰lncRNA H19通过抑制Notch信号通路抑制耐DDP乳腺癌细胞的增殖,并增强该细胞对DDP的敏感性。
