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基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析
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作者 江锦秀 张靖鹏 +3 位作者 林裕胜 刘维巍 胡奇林 万春和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1684-1695,共12页
热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实... 热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并进一步了解其遗传变异情况,本研究基于GenBank中Movi的Hsp70基因特征,设计特异性的引物及探针,建立了基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体qPCR检测方法。应用建立的检测方法对88份山羊鼻拭子样品及43份疑似羊支原体性肺炎(Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats, MPSG)病料进行检测。将检测结果为Movi阳性的肺组织样品进行分离鉴定,并对分离株Hsp70基因进行序列分析。结果显示,建立的qPCR检测方法其相关系数为1.00,扩增效率为96.0%,斜率为-3.411,Y轴截距为37.29。特异性强,与丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri, Mmc)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae, Mccp)、莱氏无胆甾原体(Acholeplasmalaidlawii, AL)、无乳支原体(Mycoplasma agalactiae, Maga)、伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis, CP)、羊口疮病毒(orf virus, ORFV)、牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)等牛羊常见病原均无交叉反应;敏感性高,最低检测限为5.72 copies·μL^(-1);重复性优,组内变异系数和组间变异系数均小于1.00%。6株Movi分离株Hsp70基因全长均为1 818 bp,与其它Movi参考株核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.4%和98.0%~100.0%;进一步分析发现,山羊源Movi均比绵羊源多1个N-糖基化位点。遗传演化分析表明,其均处于ClusterⅠA亚分支(均为山羊源)。综上,本研究建立了特异性强、敏感性高、重复性优的基于Hsp70基因的Movi的qPCR检测方法。序列分析发现,不同来源Movi的Hsp70基因核苷酸同源性高;遗传演化分析证实,Movi福建株与山羊源分离株遗传关系较近。本研究不仅为Movi临床诊断提供了技术支持,更为进一步了解Movi遗传演化规律提供参考。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 HSP70基因 TaqMan实时荧光定量PCR方法 序列分析
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山羊莱氏无胆甾原体FJ-NP株的分离鉴定 被引量:2
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作者 江锦秀 林裕胜 +2 位作者 游伟 胡奇林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3329-3335,共7页
为明确福建省某羊场发生的疑似羊支原体性肺炎病例的病原,利用支原体培养基对发病羊肺脏组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,并对分离株16SrRNA进行测序分析。结果显示,分离株菌落呈油煎蛋状,有棕黄色... 为明确福建省某羊场发生的疑似羊支原体性肺炎病例的病原,利用支原体培养基对发病羊肺脏组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,并对分离株16SrRNA进行测序分析。结果显示,分离株菌落呈油煎蛋状,有棕黄色中心突起;能发酵葡萄糖,不能水解精氨酸,不分解尿素,氯化四氮唑还原反应、胆固醇需要试验、血细胞吸附试验及溶血试验的结果均为阴性,美兰还原反应阳性。经PCR扩增出莱氏无胆甾原体支原体(Acholeplasma laidlawii,AL)大小为505bp的特异性目的片段,分离株16SrRNA序列与莱氏无胆甾原体标准株PG8同源性为99.8%。鉴定结果表明,本次从山羊肺脏组织分离到的支原体为莱氏无胆甾原体,命名为FJ-NP株,但该分离株与山羊发病性的关系有待进一步研究。 展开更多
关键词 山羊支原体性肺炎 莱氏无胆甾原体 分离 鉴定
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论黄梅戏《天仙配》非常态人生中的草根情怀 被引量:1
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作者 江锦秀 《音乐创作》 北大核心 2013年第9期166-167,共2页
《天仙配》作为黄梅戏作品中最经典的代表作品之一,文章通过对故事中卖身葬父、仙女下凡、槐荫允婚、一夜织锦、天庭震怒、槐荫泪别等非常态人生的分析,从题材选择上仙子之爱的补偿心理、主题表达中乐达知足的平民情态、人物形象中敬畏... 《天仙配》作为黄梅戏作品中最经典的代表作品之一,文章通过对故事中卖身葬父、仙女下凡、槐荫允婚、一夜织锦、天庭震怒、槐荫泪别等非常态人生的分析,从题材选择上仙子之爱的补偿心理、主题表达中乐达知足的平民情态、人物形象中敬畏天帝与自然的人性本能、和槐荫树下的草根宿命的角度探寻其内在的草根情怀。 展开更多
关键词 黄梅戏 天仙配 非常态人生 草根情怀
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深化教师角色意识 有效开发潜在课程价值效能
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作者 江锦秀 《北方音乐》 2012年第12期62-62,共1页
潜在课程的隐蔽性、非预期性、广泛性、多样性、长效性等特点为潜在课程的教学提出了新的命题——潜在课程价值的效能亟待开发。作者认为,深化教师的角色意识是开发潜在课程价值效能的首要前提。
关键词 潜在课程 教师角色 价值效能 深化
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羊传染性脓疱病毒研究进展 被引量:16
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作者 林裕胜 江锦秀 +1 位作者 林甦 胡奇林 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期91-96,共6页
羊传染性脓疱病毒是羊传染性脓疱(羊口疮)的病原,能够感染山羊、绵羊和野生小反刍动物,也能够感染人,主要引起口腔黏膜、眼睛、外阴、蹄等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮,病畜因衰竭和继发感染而死亡。论文对羊传染性脓疱病毒的特... 羊传染性脓疱病毒是羊传染性脓疱(羊口疮)的病原,能够感染山羊、绵羊和野生小反刍动物,也能够感染人,主要引起口腔黏膜、眼睛、外阴、蹄等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮,病畜因衰竭和继发感染而死亡。论文对羊传染性脓疱病毒的特征、致病性、致病机理、免疫机理、免疫逃逸机制、检测方法和疫苗研究进行了综述。 展开更多
关键词 羊传染性脓疱病毒 致病机理 免疫机理 检测方法 疫苗
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福建省羊传染性脓疱病毒F1L、B2L和VIR基因的遗传变异分析 被引量:6
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作者 林裕胜 江锦秀 +2 位作者 游伟 胡奇林 《动物医学进展》 北大核心 2017年第2期1-6,共6页
为探明2014年-2015年在福建省流行的羊传染性脓疱病毒(ORFV)遗传变异情况,对10株ORFV流行毒株的F1L、B2L和VIR基因进行克隆、测序及分析。结果表明,10株ORFV F1L基因之间的核苷酸序列同源性为97.6%~100%,与国内株的核苷酸序列同源性为96... 为探明2014年-2015年在福建省流行的羊传染性脓疱病毒(ORFV)遗传变异情况,对10株ORFV流行毒株的F1L、B2L和VIR基因进行克隆、测序及分析。结果表明,10株ORFV F1L基因之间的核苷酸序列同源性为97.6%~100%,与国内株的核苷酸序列同源性为96.8%~99.7%,与NZ2参考株的核苷酸序列同源性为96.3%~97.1%;同NZ2参考株比较,FJ-YT2014缺失2个氨基酸;10株ORFV B2L基因之间核苷酸序列同源性为97.5%~99.9%,与国内株的核苷酸序列同源性为96.7%~99.5%,与NZ2参考株的核苷酸序列同源性为96.7%~97.7%;10株ORFV VIR基因之间的核苷酸序列同源性为95.8%~99.5%,与国内株的核苷酸序列同源性为94.6%~99.6%,与NZ2参考株的核苷酸序列同源性为94.6%~96.4%。基于基因核苷酸序列的遗传进化分析表明,10株ORFV F1L基因与福建省分离株、山西株和新疆株亲缘关系较近;10株ORFV B2L基因与新疆、山西、德国毒株亲缘关系较近;10株ORFV VIR基因与台湾、新疆株亲缘关系较近。结果提示,当前福建省流行的ORFV F1L、B2L和VIR基因尚未出现明显变异,但是其F1L、B2L和VIR基因核苷酸序列之间普遍存在异质性。 展开更多
关键词 羊传染性脓疱病毒 F1L基因 B2L基因 VIR基因 变异分析
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福建省部分养殖场鸡圆圈病毒3型病原检测及VP2基因分析 被引量:4
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作者 林裕胜 余明兴 +6 位作者 陈长福 张龙 江锦秀 张靖鹏 刘维巍 刘庆华 胡奇林 《中国动物检疫》 CAS 2022年第8期12-16,共5页
为了解福建省鸡场圆圈病毒3型(GyV3)的流行及其VP2基因变异情况,2021年在南平市、龙岩市和福州市的36个鸡场,采集365份疑似GyV3感染病鸡的腺胃样品,通过PCR进行GyV3核酸检测。结果显示:共检出GyV3核酸阳性55份,阳性检出率为15.06%。对5... 为了解福建省鸡场圆圈病毒3型(GyV3)的流行及其VP2基因变异情况,2021年在南平市、龙岩市和福州市的36个鸡场,采集365份疑似GyV3感染病鸡的腺胃样品,通过PCR进行GyV3核酸检测。结果显示:共检出GyV3核酸阳性55份,阳性检出率为15.06%。对5份GyV3阳性样品进行VP2基因序列分析发现,5份样品的VP2基因核苷酸和推导氨基酸序列相似性分别为98.6%~99.9%和98.3%~100%,与参考株山东肉鸡分离株SDAU-1和巴西家鸡分离株核苷酸和推导氨基酸序列的相似性分别为98.3%~99.2%和97.5%~99.2%,均属于Group A分支中的GyV3小分支。结果表明:福建省鸡场存在GyV3流行;其VP2基因遗传序列稳定,可作为GyV3感染流行病学监测的首选基因。本研究为GyV3的后续研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 鸡圆圈病毒3型 VP2基因 流行病学 序列分析
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福建省福清市山羊地方性鼻内肿瘤病毒2型感染流行病学调查 被引量:2
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作者 张靖鹏 陈芹 +12 位作者 刘维巍 陈勇 江锦秀 吴丹 林裕胜 方玉琴 郑晓何 黄守愚 杨陈文 林秀敏 林银娇 胡奇林 毛坤明 《中国动物检疫》 CAS 2023年第6期25-30,共6页
为了解福建省福清市山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)流行及遗传变异情况,通过Taq Man qPCR检测方法,对998份山羊鼻拭子样品进行ENTV-2核酸检测,并对阳性样品SU蛋白编码基因进行遗传进化分析。结果显示:在福清市16个镇街40个山羊养殖场户... 为了解福建省福清市山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)流行及遗传变异情况,通过Taq Man qPCR检测方法,对998份山羊鼻拭子样品进行ENTV-2核酸检测,并对阳性样品SU蛋白编码基因进行遗传进化分析。结果显示:在福清市16个镇街40个山羊养殖场户中,共检测出19个阳性场户、89份阳性样品,场阳性率为47.50%,个体阳性率为8.92%;9份阳性样品的SU蛋白编码基因均与ENTV-2位于同一进化分支,其中2份阳性样品处于相对独立的分支,与ENTV-2流行株同源性约为96%,且各有5处氨基酸突变,其他阳性样品与ENTV-2流行株同源性在99%以上,氨基酸序列一致。结果表明,ENTV-2在福清市流行较为广泛,流行毒株出现了一定的变异,需要持续加强监测,采取综合措施控制该病流行。本研究有助于了解和掌握ENTV-2在山羊群中的感染情况和遗传变异特征,为提高该病防治效果奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊地方性鼻内肿瘤病毒2型 流行病学 福清 qPCR
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初中音乐课堂中多声部歌唱思维和能力构建的探究 被引量:2
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作者 司晓萌 江锦秀 《戏剧之家》 2023年第18期190-192,共3页
多声部歌唱把音高、旋律、节奏等音乐要素有逻辑性地交织在一起,成为了一种全面表现歌曲的歌咏形式,在音乐课堂中开展多声部歌唱的教学不仅能够使学生更加高效地学习节奏、旋律、和声等音乐知识,是有效落实核心素养的重要途径。多声部... 多声部歌唱把音高、旋律、节奏等音乐要素有逻辑性地交织在一起,成为了一种全面表现歌曲的歌咏形式,在音乐课堂中开展多声部歌唱的教学不仅能够使学生更加高效地学习节奏、旋律、和声等音乐知识,是有效落实核心素养的重要途径。多声部歌唱能力的构建会更有效地提高学生们的音乐素养,让他们更准确地理解音乐所表达的情感。 展开更多
关键词 多声部歌唱 初中音乐课堂 能力构建
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柯达伊教学法在多声部音乐教学中的运用 被引量:1
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作者 胡钦月 江锦秀 《戏剧之家》 2021年第6期79-80,共2页
在各种版本的音乐教材中,不难发现其中都包含有关多声部的教学内容,教师如何利用这些教学内容培养出学生多声部的音乐能力是值得思考和探索的问题。柯达伊教学法中对于培养学生的多声部音乐能力有很多论述,教师应当不断地汲取新方式、... 在各种版本的音乐教材中,不难发现其中都包含有关多声部的教学内容,教师如何利用这些教学内容培养出学生多声部的音乐能力是值得思考和探索的问题。柯达伊教学法中对于培养学生的多声部音乐能力有很多论述,教师应当不断地汲取新方式、新方法,开拓自己的视野,进而为教学提供新的思路和方向。 展开更多
关键词 柯达伊教学法 多声部音乐教学 节奏 歌唱
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