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LC-MS结合网络药理学探讨紫锥菊抗猪流行性腹泻病毒的作用机制
1
作者
毛驰文
黄明凤
+5 位作者
李淼淼
陈兰
罗怡泓
连凯琪
马圣明
朱二鹏
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025年第9期4471-4483,共13页
【目的】采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)和网络药理学探究紫锥菊(Echinacea purpurea,EP)抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的活性成分、靶点及潜在作用机制,为进一步...
【目的】采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)和网络药理学探究紫锥菊(Echinacea purpurea,EP)抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的活性成分、靶点及潜在作用机制,为进一步开发新型抗PEDV的治疗药物提供理论依据。【方法】构建PEDV感染IPEC-J2细胞模型,利用不同浓度EP提取物处理细胞模型。采用实时荧光定量PCR检测PEDV N蛋白mRNA转录水平,并分析EP提取物对PEDV复制的影响;采用LC-MS对EP中的化学成分进行定性定量分析;利用TCMSP、SwissTargetPrediction、NCBI数据库检索EP药用活性成分与抗PEDV作用相关的分子靶点,取交集靶点输入STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络并筛选关键靶点;构建“EP-活性成分-交集靶点”网络,同时用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,预测EP抗PEDV作用的核心成分、关键靶点及潜在机制。利用分子对接验证主要核心成分与关键靶点的结合能力。【结果】体外试验结果表明,与对照组相比,EP提取物显著抑制了PEDV N蛋白mRNA转录水平(P<0.05)。LC-MS检测发现,EP中含有甜菜碱、鞣花酸、菊苣酸等81种化学成分,分类占比最高的主要为酚类、萜类、黄酮类等。基于网络药理学筛选,EP中鞣花酸、(+)-儿茶素、苦参碱等18种药用活性成分可能作用于144个靶点发挥抗PEDV作用,重要核心成分有山奈酚、漆黄素、木犀草素等,关键靶点包括肿瘤蛋白p53(tumor protein 53,TP53)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、类固醇受体辅激活因子(steroid receptor coactivator,SRC)、丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)等,主要涉及Th17细胞分化、NOD样受体信号通路、FoxO信号通路等,参与细胞免疫、细胞凋亡、细胞周期等过程。分子对接结果显示,鞣花酸与TP53、IL-6、SRC、MAPK1结合能均<-29.308 kJ/mol,且鞣花酸与MAPK1结合力最强。【结论】本研究分析预测EP是基于多成分、多靶点、多途径的协同复杂作用,利用山柰酚、漆黄素、木犀草素等核心成分作用于TP53、IL-6、SRC、MAPK1等靶点,通过调控Th17细胞分化、NOD样受体、FoxO等信号通路发挥抗PEDV作用。
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关键词
猪流行性腹泻病毒(PEDV)
紫锥菊
液相色谱-质谱联用
网络药理学
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职称材料
题名
LC-MS结合网络药理学探讨紫锥菊抗猪流行性腹泻病毒的作用机制
1
作者
毛驰文
黄明凤
李淼淼
陈兰
罗怡泓
连凯琪
马圣明
朱二鹏
机构
贵州大学动物科学学院
安阳工学院生物与食品工程学院
出处
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025年第9期4471-4483,共13页
基金
贵州省基础研究计划项目(黔科合基础-ZK[2022]一般158)
安阳工学院博士启动资金项目(BSJ2021007、BHJ2022009)。
文摘
【目的】采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)和网络药理学探究紫锥菊(Echinacea purpurea,EP)抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的活性成分、靶点及潜在作用机制,为进一步开发新型抗PEDV的治疗药物提供理论依据。【方法】构建PEDV感染IPEC-J2细胞模型,利用不同浓度EP提取物处理细胞模型。采用实时荧光定量PCR检测PEDV N蛋白mRNA转录水平,并分析EP提取物对PEDV复制的影响;采用LC-MS对EP中的化学成分进行定性定量分析;利用TCMSP、SwissTargetPrediction、NCBI数据库检索EP药用活性成分与抗PEDV作用相关的分子靶点,取交集靶点输入STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络并筛选关键靶点;构建“EP-活性成分-交集靶点”网络,同时用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,预测EP抗PEDV作用的核心成分、关键靶点及潜在机制。利用分子对接验证主要核心成分与关键靶点的结合能力。【结果】体外试验结果表明,与对照组相比,EP提取物显著抑制了PEDV N蛋白mRNA转录水平(P<0.05)。LC-MS检测发现,EP中含有甜菜碱、鞣花酸、菊苣酸等81种化学成分,分类占比最高的主要为酚类、萜类、黄酮类等。基于网络药理学筛选,EP中鞣花酸、(+)-儿茶素、苦参碱等18种药用活性成分可能作用于144个靶点发挥抗PEDV作用,重要核心成分有山奈酚、漆黄素、木犀草素等,关键靶点包括肿瘤蛋白p53(tumor protein 53,TP53)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、类固醇受体辅激活因子(steroid receptor coactivator,SRC)、丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)等,主要涉及Th17细胞分化、NOD样受体信号通路、FoxO信号通路等,参与细胞免疫、细胞凋亡、细胞周期等过程。分子对接结果显示,鞣花酸与TP53、IL-6、SRC、MAPK1结合能均<-29.308 kJ/mol,且鞣花酸与MAPK1结合力最强。【结论】本研究分析预测EP是基于多成分、多靶点、多途径的协同复杂作用,利用山柰酚、漆黄素、木犀草素等核心成分作用于TP53、IL-6、SRC、MAPK1等靶点,通过调控Th17细胞分化、NOD样受体、FoxO等信号通路发挥抗PEDV作用。
关键词
猪流行性腹泻病毒(PEDV)
紫锥菊
液相色谱-质谱联用
网络药理学
Keywords
Porcine epidemic diarrhea virus(PEDV)
Echinacea purpurea
LC-MS
network pharmacology
分类号
S853.74 [农业科学—临床兽医学]
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LC-MS结合网络药理学探讨紫锥菊抗猪流行性腹泻病毒的作用机制
毛驰文
黄明凤
李淼淼
陈兰
罗怡泓
连凯琪
马圣明
朱二鹏
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025
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