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基于多波长切换HPLC同时测定荆芥-防风药对9种化学成分及指纹图谱研究 被引量:5
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作者 管娜 拜年 +1 位作者 刘冰 毛小文 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2021年第9期99-104,共6页
目的建立多波长切换HPLC同时测定荆芥-防风药对中木犀草苷、橙皮苷、木犀草素、芹菜素、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、印枳树皮苷、亥茅酚苷含量的方法,并建立HPLC指纹图谱。方法采用Agilent SB C18色谱柱(250 mm×4.6 ... 目的建立多波长切换HPLC同时测定荆芥-防风药对中木犀草苷、橙皮苷、木犀草素、芹菜素、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、印枳树皮苷、亥茅酚苷含量的方法,并建立HPLC指纹图谱。方法采用Agilent SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇(1∶1,A)-0.03%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0→19 min,12%→13%A;19→25 min,13%→14%A;25→40 min,14%→25%A;40→53 min,25%→45%A;53→70 min,45%→60%A;70→90 min,60%→80%A),多波长切换检测(0~61 min为283 nm,61~90 min为254 nm),流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果测定了20批荆芥-防风药对中9种成分的含量,建立了HPLC指纹图谱。方法学考察表明,仪器精密度良好,RSD均小于2.24%;方法重复性良好,RSD均小于3.14%;供试品溶液在48 h内稳定;9种成分的加样回收率为97.05%~102.64%,RSD均小于3.27%;9种成分在各自线性范围内均有良好的线性关系,相关系数为0.9997~1.0000。所建立的指纹图谱与特征图谱的相似度均大于0.9,标定了24个共有峰,各色谱峰分离度较好。结论本研究建立的方法操作简便,准确度高,灵敏度及重复性好,可用于荆芥-防风药对中9种成分及指纹图谱的测定,实现多指标质量控制。 展开更多
关键词 荆芥-防风药对 高效液相色谱法 多波长切换 同时测定 多指标质量控制 指纹图谱
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锁阳黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马组织ROS含量及NADPH氧化酶、NLRP3表达的影响 被引量:8
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作者 吕鑫 顾志荣 +3 位作者 祁梅 郭燕 毛小文 葛斌 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第4期82-87,共6页
目的 观察锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织活性氧(ROS)含量及NADPH氧化酶、Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响,探讨其神经保护作用的机制。方法 70只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假手术... 目的 观察锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织活性氧(ROS)含量及NADPH氧化酶、Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响,探讨其神经保护作用的机制。方法 70只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、多奈哌齐组及锁阳黄酮低、中、高剂量组,每组10只。大鼠于双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型。假手术组注射等体积生理盐水,空白组不予任何处理。多奈哌齐组和锁阳黄酮低、中、高剂量组予相应药物灌胃,空白组、假手术组和模型组予等体积生理盐水灌胃,连续28 d。Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马组织病理变化,免疫组化检测海马组织Aβ_(1-42)表达,ELISA检测海马组织及血清ROS含量,Western blot检测海马组织NADPH氧化酶亚基(gp91^(phox)、p22^(phox)、p67^(phox)、p47^(phox))、NLRP3、白细胞介素(IL)-1β蛋白表达,RT-PCR检测海马组织NADPH氧化酶各亚基(gp91^(phox)、p22^(phox)、p67^(phox)、p47^(phox))mRNA表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P<0.01),跨平台次数和目标象限停留时间明显减少(P<0.01);海马CA1区锥体细胞凋亡明显,局部锥体细胞排列紊乱,海马组织Aβ_(1-42)表达明显升高(P<0.05);海马组织及血清ROS含量明显增加(P<0.01),海马组织NADPH氧化酶各亚基和NLRP3、IL-1β蛋白表达明显升高(P<0.01),NADPH氧化酶各亚基mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,锁阳黄酮高剂量组大鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),跨平台次数和目标象限停留时间明显增加(P<0.05,P<0.01);海马CA1区病理形态有所改善,海马组织Aβ_(1-42)表达明显降低(P<0.05);海马组织及血清ROS含量明显减少(P<0.01),海马组织NADPH氧化酶各亚基和NLRP3、IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),NADPH氧化酶各亚基mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 锁阳黄酮可通过调节AD大鼠海马组织ROS含量及NADPH氧化酶、NLRP3表达,抑制氧化应激和炎症反应,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 锁阳黄酮 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 NADPH氧化酶 活性氧 NLRP3 大鼠
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锁阳药材质量多指标评价体系构建及权重分配方法优化 被引量:8
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作者 张锐 顾志荣 +4 位作者 吕鑫 毛小文 郭燕 祁梅 葛斌 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2021年第12期74-81,共8页
目的构建锁阳药材质量的多指标评价体系,优化各评价指标的权重分配。方法从无机成分和有机成分两方面构建锁阳药材质量的多指标评价体系,采用层次分析法(AHP)、熵权法、主成分分析法(PCA)、变异系数法、CRITIC法及独立性权重法建立各评... 目的构建锁阳药材质量的多指标评价体系,优化各评价指标的权重分配。方法从无机成分和有机成分两方面构建锁阳药材质量的多指标评价体系,采用层次分析法(AHP)、熵权法、主成分分析法(PCA)、变异系数法、CRITIC法及独立性权重法建立各评价指标的权重分配方法。结果AHP确定的锁阳药材质量评价的多指标权重排序为:总多糖>没食子酸>As>总黄酮>Na>儿茶素>Cu>K>Fe>Ag>Ca>原儿茶酸>Hg>Mg>Pb>Zn>Cd>Mn>Co>Ni;熵权法为:Na>儿茶素>原儿茶酸>Co>Mg>Mn>没食子酸>Zn>Fe>Ni>总多糖>Hg>K>总黄酮>Cd>Ca>As>Ag>Cu>Pb;变异系数法为:没食子酸>Na>Co>Hg>Cd>Ag>Cu>儿茶素>原儿茶酸>Fe>Ni>Mg>As>Pb>Zn>Ca>总黄酮>总多糖>Mn>K;CRITIC法为:Zn>儿茶素>Hg>As>Mn>Pb>没食子酸>Fe>总多糖>K>原儿茶酸>Ni>Mg>总黄酮>Na>Cd>Cu>Co>Ca>Ag;独立性权重法为:Na>Hg>K>Pb>Cd>Ni>Zn>Co>Mg>没食子酸>As>Mn>原儿茶酸>总黄酮>Cu>Ca>总多糖>Ag>Fe>儿茶素。结论AHP、熵权法与CRITIC法确定的锁阳药材质量评价指标权重排序与传统经验认知较为符合,推荐作为锁阳药材质量的多指标评价权重分配方法。 展开更多
关键词 锁阳 层次分析法 熵权法 主成分分析 变异系数法 CRITIC法 独立性权重法
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基于BDNF/TrkB信号通路的锁阳黄酮对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响 被引量:8
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作者 吕鑫 顾志荣 +3 位作者 祁梅 郭燕 毛小文 葛斌 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第7期94-100,共7页
目的基于BDNF/TrkB信号通路探讨锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响及潜在机制。方法70只SPF级Wistar雄性大鼠随机选取10只作为空白组、10只作为假手术组,余50只采用双侧海马注射Aβ_(1-42)... 目的基于BDNF/TrkB信号通路探讨锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响及潜在机制。方法70只SPF级Wistar雄性大鼠随机选取10只作为空白组、10只作为假手术组,余50只采用双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型,将造模大鼠再随机分为模型组、多奈哌齐组(0.5 mg/kg)和锁阳黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),连续灌胃相应药液28 d。跳台实验评价大鼠认知功能损伤程度,TUNEL染色观察海马组织细胞凋亡情况,透射电镜观察海马组织神经细胞和突触超微结构变化,ELISA测定海马及血清胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)含量,Western blot检测海马组织Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠跳台实验学习和记忆阶段错误次数明显增加,潜伏期明显缩短(P<0.01);海马组织细胞凋亡率明显升高(P<0.01),神经细胞和突触结构严重损伤;海马组织及血清ChAT、ACh含量明显减少(P<0.01),AChE含量明显增加(P<0.01);海马组织Bcl-2、BDNF和TrkB蛋白表达明显降低(P<0.01),Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,锁阳黄酮高剂量组大鼠认知功能损伤程度减轻,海马组织细胞凋亡率降低,神经细胞和突触结构有所改善,海马组织及血清ChAT、ACh含量增加,AChE含量减少,海马组织Bcl-2、BDNF和TrkB蛋白表达升高,Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论锁阳黄酮能明显改善Aβ_(1-42)诱导的AD大鼠认知功能损伤,增加中枢胆碱能系统ACh含量,抑制细胞凋亡及增加突触可塑性,其机制可能与上调海马组织BDNF/TrkB信号通路有关。 展开更多
关键词 锁阳黄酮 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 BDNF/TrkB信号通路 海马 大鼠
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