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海马体C/EBPβ在痛性糖尿病周围神经病变中的作用及机制研究
1
作者 段柯杨 张钰 +2 位作者 王敬萱 王雪莹 孙涛 《中国疼痛医学杂志》 北大核心 2025年第4期259-266,共8页
目的:探讨海马体中CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)在小鼠痛性糖尿病周围神经病变(painful diabetic peripheral neuropathy,PDPN)中的作用及机制。方法:使用简单随机抽样方法将小鼠随机分为4组:对照... 目的:探讨海马体中CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)在小鼠痛性糖尿病周围神经病变(painful diabetic peripheral neuropathy,PDPN)中的作用及机制。方法:使用简单随机抽样方法将小鼠随机分为4组:对照组(Control)、模型组(PDPN)、注射阴性对照腺相关病毒组(PDPN+IE-Control)、注射抑制C/EBPβ的腺相关病毒组(PDPN+IE-CEBP/β),每组8只。通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立小鼠PDPN模型,并通过血糖升高及机械性痛觉过敏确认模型的成功建立。利用脑立体定位技术,向PDPN模型小鼠海马体注射携带C/EBPβshRNA的腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),特异性抑制C/EBPβ表达。检测机械性异常疼痛变化,使用免疫印迹检测海马体中C/EBPβ及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase-1)、胱天蛋白酶激活的细胞焦亡蛋白D(gasdermin-D,GSDMD)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)等蛋白表达水平。利用RT-qPCR检测海马体中炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA水平,以评估炎症反应。结果:注射AAV-shRNA后,海马体中C/EBPβ表达显著降低,机械性异常疼痛明显缓解,NLRP3、NF-κB、Caspase-1、GSDMD和IL-1β的蛋白表达水平下降,IL-6、IL-1β和TNF-α的mRNA水平显著减少,神经炎症减轻。结论:C/EBPβ在PDPN模型海马体中高表达,通过调控炎症信号通路及神经炎症,参与PDPN的发生和维持。 展开更多
关键词 痛性糖尿病周围神经病变 海马体 C/EBPΒ 炎症信号通路 腺相关病毒 神经炎症
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免疫球蛋白受体B在痛性糖尿病周围神经病变中的作用及其调控机制
2
作者 张钰 段柯杨 +2 位作者 王敬萱 王雪莹 孙涛 《中国疼痛医学杂志》 北大核心 2025年第8期593-601,共9页
目的:探讨配对免疫球蛋白受体B(paired immunoglobulin-like receptor B,PIRB)在痛性糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathic pain,DPNP)中的作用及其潜在机制,特别关注其在神经炎症和炎性小体活化中的作用。方法:将小鼠... 目的:探讨配对免疫球蛋白受体B(paired immunoglobulin-like receptor B,PIRB)在痛性糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathic pain,DPNP)中的作用及其潜在机制,特别关注其在神经炎症和炎性小体活化中的作用。方法:将小鼠按简单随机抽样方法随机分为4组:假手术组(Sham)、模型组(DPNP)、模型+PIRB阴性对照组(DPNP+AAV control)、模型+PIRB腺相关病毒组(DPNP+PIRB),每组8只。采用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建小鼠DPNP模型,并通过血糖升高及机械性痛觉过敏确认模型的成功建立。使用免疫印迹和qRT-PCR评估DPNP小鼠脊髓组织中PIRB的表达水平。通过鞘内注射腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)降低小鼠脊髓中PIRB的表达以进一步研究其作用。采用qRT-PCR检测神经炎症标志物(如IL-1β、IL-6、TNF-α),使用免疫印迹检测NF-κB p65的水平,并通过免疫印迹和免疫组化观察NLRP3炎性小体成分的变化。结果:与Sham组相比,DPNP组小鼠出现显著机械性痛觉过敏,并观察到PIRB的蛋白和mRNA表达水平均显著上调(P<0.05)。通过AAV介导的PIRB敲低实验中,结果显示DPNP+PIRB组小鼠机械性痛觉过敏减轻(P<0.05),并且神经炎症标志物(IL-1β、IL-6、TNF-α)的表达减少。此外,DPNP+PIRB组较DPNP+AAV control组的NF-κB p65和NLRP3炎性小体成分(如Caspase-1、GSDMD和IL-1β)的表达也显著降低。结论:PIRB可能通过调节神经炎症和激活NLRP3炎性小体在DPNP的发展中发挥了关键作用,抑制PIRB的表达可以减轻痛觉过敏现象并减少神经炎症。 展开更多
关键词 配对免疫球蛋白受体B 神经炎症 炎性小体 痛性糖尿病周围神经病变
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PGC-1α介导线粒体生物发生对骨癌痛伴发镜像痛的影响 被引量：1
3
作者 刘佳霖 张钰 +3 位作者 段柯杨 王敬萱 王雪莹 孙涛 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期653-663,共11页
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α (peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α, PGC-1α)调控线粒体生物发生对骨癌痛伴发镜像痛的影响。方法:第一部分实验:成年雌性SD大鼠按照随机数字表... 目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α (peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α, PGC-1α)调控线粒体生物发生对骨癌痛伴发镜像痛的影响。方法:第一部分实验:成年雌性SD大鼠按照随机数字表法分成2组,假手术组(Sham组)与骨癌痛组(bone cancer pain, BCP组),每组10只。第二部分实验:大鼠按照随机数字表法分成3组,Sham+vehicle组、BCP+vehicle组、BCP+ZLN(ZLN005,PGC-1α激活剂组),每组25只。将MRMT-1大鼠乳腺癌细胞注入左胫骨髓腔建立BCP大鼠模型,Sham组大鼠注射等体积Hank's平衡盐溶液。第二部分实验中,BCP+ZLN组大鼠鞘内注射ZLN005(单次单剂量100μg/30μl),Sham+vehicle组与BCP+vehicle组注射等体积溶剂。Western blot用于分析大鼠脊髓中PGC-1α、Nrf1和Tfam蛋白表达量。q PCR用于分析mt DNA相对拷贝数。免疫荧光双标染色分析PGC-1α的分布与细胞定位。结果:单侧癌细胞接种诱导BCP大鼠双侧后爪出现机械性痛觉过敏。ZLN005鞘内注射可减轻BCP大鼠双侧后爪的机械性痛觉过敏。在BCP大鼠的脊髓中观察到PGC-1α、Nrf1、Tfam和mt DNA相对拷贝数水平下降。鞘内注射ZLN005后,PGC-1α、Nrf1、Tfam和mt DNA相对拷贝数的水平升高。PGC-1α在同侧和对侧脊髓背角均有分布。PGC-1α的荧光强度在BCP大鼠双侧脊髓中出现下降。PGC-1α主要与神经元共定位。结论:脊髓中的线粒体生物发生的损伤促进了骨癌痛伴发镜像痛的发生发展。PGC-1α激活介导线粒体生物发生缓解骨癌痛及其伴发的镜像痛。 展开更多
关键词 骨癌痛 镜像痛 线粒体质量控制 线粒体生物发生 PGC-1Α
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