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3α-羟类固醇脱氢酶的亲和纯化及化学修饰提高酶稳定性
1
作者
方亚男
段敬霞
+1 位作者
张玲
杨海麟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期747-751,共5页
研究了3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)经化学修饰后的稳定性变化。已构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a-hsd经诱导表达、镍柱亲和纯化得到电泳纯的3α-HSD酶,酶蛋白得率是16.5%,活性回收率为64.7%,纯化倍数约为3.8,15%SDS-PAGE结...
研究了3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)经化学修饰后的稳定性变化。已构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a-hsd经诱导表达、镍柱亲和纯化得到电泳纯的3α-HSD酶,酶蛋白得率是16.5%,活性回收率为64.7%,纯化倍数约为3.8,15%SDS-PAGE结果显示3α-HSD酶为单一条带,相对分子质量在28 000左右。采用邻苯二甲酸酐(PA)作为修饰剂,对3α-HSD纯酶进行化学修饰,与对照组相比,修饰酶抵抗p H波动的能力有所增强,50℃水浴10 min后酶的热稳定性明显提高,37℃贮藏40 h后修饰酶的贮藏稳定性比原酶提高9倍。
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关键词
3α-羟类固醇脱氢酶
亲和纯化
邻苯二甲酸酐
化学修饰
稳定性
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职称材料
题名
3α-羟类固醇脱氢酶的亲和纯化及化学修饰提高酶稳定性
1
作者
方亚男
段敬霞
张玲
杨海麟
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期747-751,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31301540
21306064)
+1 种基金
江苏省科技支撑计划项目(BE2011625)
江苏省自然科学基金项目(BK2012119)
文摘
研究了3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)经化学修饰后的稳定性变化。已构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a-hsd经诱导表达、镍柱亲和纯化得到电泳纯的3α-HSD酶,酶蛋白得率是16.5%,活性回收率为64.7%,纯化倍数约为3.8,15%SDS-PAGE结果显示3α-HSD酶为单一条带,相对分子质量在28 000左右。采用邻苯二甲酸酐(PA)作为修饰剂,对3α-HSD纯酶进行化学修饰,与对照组相比,修饰酶抵抗p H波动的能力有所增强,50℃水浴10 min后酶的热稳定性明显提高,37℃贮藏40 h后修饰酶的贮藏稳定性比原酶提高9倍。
关键词
3α-羟类固醇脱氢酶
亲和纯化
邻苯二甲酸酐
化学修饰
稳定性
Keywords
3α-hydroxysteroid dehydrogenase
affinity purification
phthalic anhydride
chemical modification
stability
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
3α-羟类固醇脱氢酶的亲和纯化及化学修饰提高酶稳定性
方亚男
段敬霞
张玲
杨海麟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
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