锦鲤疱疹病毒病简述 被引量：5

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作者 段宏安 周毅 +5 位作者 徐晔 姚燕林 丁超 曹洁 范广宇 孟祥龙 《中国动物检疫》 CAS 2015年第6期48-52,共5页

锦鲤疱疹病毒病是一种危害严重,尚无有效治疗方法的高致病性传染病。本文汇集大量科研成果,从病原学、流行病学、病理学三个角度对该病毒的特性进行简述,在此基础上,推荐了实验室检测技术,提出了防控建议。

关键词 锦鲤疱疹病毒病 KHV 病原学 流行病学 病理学 预防与控制 检测技术

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高效液相色谱串联质谱法对栀子中11种有机磷农药残留的检测 被引量：30

2

作者 刘庆斌 张睿 +4 位作者 王海涛 段宏安 王沫 姚燕林 张春伟 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期73-76,共4页

建立了高效液相色谱串联质谱法检测栀子中11种有机磷农药残留量的分析方法。样品以乙腈为提取溶剂,采用超声波辅助提取,经Carb/PSA固相萃取柱净化,液质联用仪测定。11种有机磷农药在125~2 000μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9955~0.9... 建立了高效液相色谱串联质谱法检测栀子中11种有机磷农药残留量的分析方法。样品以乙腈为提取溶剂,采用超声波辅助提取,经Carb/PSA固相萃取柱净化,液质联用仪测定。11种有机磷农药在125~2 000μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9955~0.9998。在50、100、500μg/kg 3个添加水平的平均加标回收率为84%~107%,相对标准偏差为1.4%~10.9%。 展开更多

关键词 高效液相色谱串联质谱 多残留检测 有机磷农药 栀子

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高效液相色谱串联质谱法对大米中26种三嗪类除草剂多残留的检测 被引量：30

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作者 李育左 张睿 +5 位作者 王海涛 段宏安 王沫 李拓 姚燕林 张春伟 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期315-318,325,共5页

建立了同时检测大米中26种三嗪类除草剂残留量的高效液相色谱串联质谱分析方法。样品经乙腈提取、OasisHLB固相萃取柱净化,液质联用仪测定。26种三嗪类除草剂在10～1000μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9973～0.9999。在10～100μg/kg... 建立了同时检测大米中26种三嗪类除草剂残留量的高效液相色谱串联质谱分析方法。样品经乙腈提取、OasisHLB固相萃取柱净化,液质联用仪测定。26种三嗪类除草剂在10～1000μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9973～0.9999。在10～100μg/kg范围内,平均加标回收率为74%～100%,相对标准偏差为2.1%～8.8%。该方法可同时满足进出口大米中多种三嗪类除草剂残留的检验需要。 展开更多

关键词 高效液相色谱串联质谱 多残留检测 三嗪类除草剂 大米

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牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：7

4

作者 周毅 吴玉石 +4 位作者 段宏安 张睿 周祖涛 毕丁仁 石德时 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期538-543,共6页

从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL... 从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 gp51蛋白 原核表达 间接ELISA

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气相色谱串联质谱法检测水产品中有机氯和菊酯农药残留 被引量：9

5

作者 孟祥龙 夏梦 +4 位作者 张云青 范广宇 徐文科 唐秀 段宏安 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第16期153-158,共6页

建立利用凝胶渗透色谱-气相色谱-三重四极杆串联质谱仪(gas chromatography-triple quadrupole-tandem mass spectrometry,GC-MS/MS)快速检测水产品中有机氯和菊酯类多种农药残留的方法,对样品提取溶剂进行优化,利用凝胶渗透色谱(gel pe... 建立利用凝胶渗透色谱-气相色谱-三重四极杆串联质谱仪(gas chromatography-triple quadrupole-tandem mass spectrometry,GC-MS/MS)快速检测水产品中有机氯和菊酯类多种农药残留的方法,对样品提取溶剂进行优化,利用凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography, GPC)结合分散固相萃取技术净化样品,并分别对农药化合物在GPC上的收集时间参数和N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)固相萃取吸附剂的添加量进行优化,在电子轰击电离源下进行多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)采集,该方法的检出限(limits of detection,LOD)为0.03 μg/kg^2.87 μg/kg,试验结果表明,该方法的回收率为60.5 %~118 %,相对标准偏差为0.75 %~15 %,该方法重现性好,精密度高,适用于泥鳅等水产品中有机氯和菊酯类农药残留的检测。 展开更多

关键词 气相色谱串联质谱仪 凝胶渗透色谱 分散固相萃取 多农药残留 水产品

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实时荧光定量RT-PCR检测鱼类传染性胰脏坏死病病毒方法的建立 被引量：8

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作者 徐晔 段宏安 +2 位作者 周毅 刘亭歧 姚燕林 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第31期19224-19226,共3页

[目的]建立Taqman探针荧光定量RT-PCR检测传染性胰脏坏死病病毒(IPNV)的方法。[方法]选取IPNV病毒的基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物与探针。以梯度稀释的含有IPNV目的扩增片段的质粒作为标准品,探索定量RT-PCR反应条... [目的]建立Taqman探针荧光定量RT-PCR检测传染性胰脏坏死病病毒(IPNV)的方法。[方法]选取IPNV病毒的基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物与探针。以梯度稀释的含有IPNV目的扩增片段的质粒作为标准品,探索定量RT-PCR反应条件。[结果]当标准品浓度在102～106 copies/μl之间时,标准品浓度(X)与Ct的关系为Ct=-3.426 lgX+4.481,相关系数R2为0.999 8。该法对病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、鲤春病毒血症病毒(SVC)和流行性造血器官坏死病病毒(EHNV),草鱼呼肠孤病毒(GCRV),大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214)和虹鳟的核酸都没有扩增反应。[结论]该检测方法灵敏度高,特异性好,可用于鱼类传染性胰脏坏死病病毒的快速定量检测。 展开更多

关键词 传染性胰脏坏死病病毒(IPNV) 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针

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分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定干紫菜中16种多环芳烃 被引量：4

7

作者 范广宇 吴琎 +3 位作者 孟祥龙 段蕊 段宏安 梁振纲 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1182-1187,共6页

取干紫菜样品2.00g置于50mL离心管中,加入1.00mg·L-1内标混合溶液100μL,加入4mL水浸润。再加入10mL正己烷均质20s,加入4.0g无水硫酸镁、1.0g氯化钠,涡旋混匀2min,离心,向1mL上清液中加入100mg N-丙基乙二胺(PSA)和100mg无水硫酸镁... 取干紫菜样品2.00g置于50mL离心管中,加入1.00mg·L-1内标混合溶液100μL,加入4mL水浸润。再加入10mL正己烷均质20s,加入4.0g无水硫酸镁、1.0g氯化钠,涡旋混匀2min,离心,向1mL上清液中加入100mg N-丙基乙二胺(PSA)和100mg无水硫酸镁,涡旋混匀1min,离心。取上清液采用气相色谱-质谱法测定其中16种多环芳烃(PAHs)的含量。16种PAHs的质量浓度在一定范围内与其峰面积与内标峰面积的比值呈线性关系,检出限(3S/N)为0.57～3.8μg·kg-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为78.3%～109%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.2%～14%。 展开更多

关键词 气相色谱-质谱法 分散固相萃取 多环芳烃 干紫菜

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高效液相色谱-串联质谱法测定人尿液中28种毒品的残留量 被引量：4

8

作者 王海涛 张睿 +7 位作者 吴斌 王学虎 刘建 姚燕林 段宏安 赵武生 徐聪林 徐文科 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1310-1314,共5页

提出了高效液相色谱-串联质谱法测定人尿液中鸦片类、苯丙胺类和可卡因类等28种毒品含量的方法。试样用乙酸乙酯提取,离心分离,提取液于40℃氮气吹干后,用甲醇-水(30+70)溶液1mL溶解定容,用高效液相色谱-串联质谱检测。28种毒品的质量... 提出了高效液相色谱-串联质谱法测定人尿液中鸦片类、苯丙胺类和可卡因类等28种毒品含量的方法。试样用乙酸乙酯提取,离心分离,提取液于40℃氮气吹干后,用甲醇-水(30+70)溶液1mL溶解定容,用高效液相色谱-串联质谱检测。28种毒品的质量分数均在2.0～200μg·kg-1范围内呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在1.0～2.0μg·kg-1之间。在空白尿液样品中加入5,10,50μg·kg-1混合标准溶液,测得28种毒品的回收率在61.0%～117%之间,相对标准偏差(n=6)在3.0%～14%之间。 展开更多

关键词 高效液相色谱-串联质谱法 毒品 人尿液

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氢化物发生-原子荧光法测定食品添加剂碳酸钙中的铅 被引量：3

9

作者 王雪婷 姜郁 +2 位作者 刘亚军 秦立俊 段宏安 《中国调味品》 CAS 北大核心 2014年第6期115-117,120,共4页

建立了氢化物发生一原子荧光光谱法测定食品添加剂碳酸钙中铅的分析方法。考察了仪器工作条件、载流的酸度、还原剂浓度、氧化剂的用量以及共存元素对测量体系的影响。在优化实验条件下，该方法的线性范围为0～60μg／L（r=0．9998），... 建立了氢化物发生一原子荧光光谱法测定食品添加剂碳酸钙中铅的分析方法。考察了仪器工作条件、载流的酸度、还原剂浓度、氧化剂的用量以及共存元素对测量体系的影响。在优化实验条件下，该方法的线性范围为0～60μg／L（r=0．9998），方法检出限为3．2μg／kg，相对标准偏差（n=11）为0．74％。以3个批次的样品为例，加入铅浓度分别为12，24，36μg／L，每个浓度进行6次平行测定，铅的回收率介于95．20％～104．3％之间，RSD≤2．53。与国家标准方法分析结果进行比较，两种方法测定值基本一致。 展开更多

关键词 氢化物原子荧光法 食品添加剂 碳酸钙 铅

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养殖鱼类屠宰过程中的动物福利 被引量：3

10

作者 张望 陈秀开 +1 位作者 蔺国强 段宏安 《科学养鱼》 北大核心 2012年第12期52-53,共2页

动物福利是人类倡导的可持续发展的重要表现之一，正受到全球各国越来越多的关注。伴随着经济全球化和贸易自由化，传统非关税壁垒不断被消除或规范。

关键词 动物福利 屠宰过程 养殖鱼类 可持续发展 贸易自由化 经济全球化 非关税壁垒

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毛细管气相色谱法检测食品中溴甲烷残留量 被引量：13

11

作者 王海涛 张睿 +3 位作者 段宏安 徐文科 嵇均光 姜良郎 《口岸卫生控制》 2004年第1期16-18,共3页

本文探讨了气相色谱法测定食品中溴甲烷残留量的检测方法。对色谱柱选择、色谱条件及提取方法等方面进行了实验研究 ,制定了本方法。本方法分离效果好 ,出峰尖锐 ,检测灵敏度高 ,回收率高。本方法的线性范围为 1mg/kg～ 2 0mg/kg ,检测... 本文探讨了气相色谱法测定食品中溴甲烷残留量的检测方法。对色谱柱选择、色谱条件及提取方法等方面进行了实验研究 ,制定了本方法。本方法分离效果好 ,出峰尖锐 ,检测灵敏度高 ,回收率高。本方法的线性范围为 1mg/kg～ 2 0mg/kg ,检测限为 0 .2mg/kg(以 3倍信噪比计 ) ,标准曲线的相关系数为 0 .9979,相对标准偏差为 5 .3% ,回收率为 87.7%。 展开更多

关键词 毛细管气相色谱法 检测 食品 溴甲烷 残留量 色谱柱 提取方法

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鱼立克次氏体病研究进展 被引量：1

12

作者 徐晔 段宏安 +2 位作者 周毅 丁超 刘健 《安徽农业科学》 CAS 2013年第23期9662-9666,共5页

鱼立克次氏体病是由鱼立克次氏体(Piscirickettsia salmonis)引起的鲑科鱼病,1989年首次报道在智利饲养的银大马哈鱼中发现该病。该病主要危害银大马哈鱼、大鳞大马哈鱼、马苏大马哈鱼、虹鳟、细鳞大马哈鱼和大西洋鲑等鱼类。阐述了鱼... 鱼立克次氏体病是由鱼立克次氏体(Piscirickettsia salmonis)引起的鲑科鱼病,1989年首次报道在智利饲养的银大马哈鱼中发现该病。该病主要危害银大马哈鱼、大鳞大马哈鱼、马苏大马哈鱼、虹鳟、细鳞大马哈鱼和大西洋鲑等鱼类。阐述了鱼立克次氏体病的病原、流行病学、发病机理与病理学,概述了该病的检疫与诊断以及防控与预警方法,旨在为该病的检疫工作提供理论参考。 展开更多

关键词 鱼立克次氏体 鱼立克次氏体病 病理 检疫

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产毒微囊藻PCR检测方法的建立

13

作者 周毅 徐晔 +5 位作者 钱伟 姚燕林 王海涛 张敬友 王维志 段宏安 《安徽农业科学》 CAS 2013年第1期43-45,共3页

[目的]建立产毒微囊藻的PCR检测方法。[方法]根据GenBank上发表的mcyA基因序列保守区域设计一对引物,建立和优化检测产毒微囊藻的PCR方法,并以此方法检测产毒和非产毒微囊藻参考株系。[结果]经PCR检测,产毒藻株出现特异性扩增条带,而不... [目的]建立产毒微囊藻的PCR检测方法。[方法]根据GenBank上发表的mcyA基因序列保守区域设计一对引物,建立和优化检测产毒微囊藻的PCR方法,并以此方法检测产毒和非产毒微囊藻参考株系。[结果]经PCR检测,产毒藻株出现特异性扩增条带,而不产毒株未出现特异性条带;以10倍系列稀释纯培养的蓝藻细胞作为PCR反应的模板,检测限均为2.46×103细胞/ml;运用建立的方法从天然水体中检测到了产毒微囊藻,对PCR产物序列进行比对,发现PCR扩增片段与铜绿微囊藻(PCC7806)核苷酸序列的同源性为98%。[结论]该研究为水华产毒微囊藻的监测提供了一种新方法。 展开更多

关键词 产毒微囊藻 mcyA PCR 检测 同源性

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欧盟鱼病水平测试样品中DNA病毒检测

14

作者 徐晔 段宏安 +1 位作者 周毅 丁超 《安徽农业科学》 CAS 2012年第34期16624-16626,共3页

[目的]通过参加欧盟鱼病水平测试,评价试验室检测能力,加强对检测方法的掌握。[方法]按照水平测试说明的方法进行病毒分离鉴定,测试的10个样品在病毒分离后用PCR方法检测DNA病毒。[结果]PTⅡ检测为流行性造血器官坏死病毒(Epizootic hae... [目的]通过参加欧盟鱼病水平测试,评价试验室检测能力,加强对检测方法的掌握。[方法]按照水平测试说明的方法进行病毒分离鉴定,测试的10个样品在病毒分离后用PCR方法检测DNA病毒。[结果]PTⅡ检测为流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haemato-poietic necrosis virus,EHNV),PTⅢ为欧洲鮰病毒(European catfish virus,ECV),PTⅧ和PTⅩ为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus disease vi-rus,KHDV),PTⅨ为流行性溃疡综合征(Epizootic ulcerative syndrome,EUS)。[结论]该实验室检出了2011年欧盟鱼病水平测试样品中的4种DNA病毒,与最后公布的测试结果完全一致。 展开更多

关键词 鱼病水平测试 DNA病毒 欧盟

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eDNA技术在水生动物疫病监测中的适用性 被引量：2

15

作者 段宏安 徐晔 +2 位作者 王凤芝 周毅 丁超 《中国动物检疫》 CAS 2023年第1期80-87,共8页

使用环境DNA(environmental DNA,eDNA)监测水生系统是一个快速发展的研究方向。eDNA技术采用快速、经济、非损伤性采样方案,更适用于稀有、珍贵的水生动物,或难以收集的野生动物的疫病检测和监测。本文结合世界动物卫生组织(WOAH)水生... 使用环境DNA(environmental DNA,eDNA)监测水生系统是一个快速发展的研究方向。eDNA技术采用快速、经济、非损伤性采样方案,更适用于稀有、珍贵的水生动物,或难以收集的野生动物的疫病检测和监测。本文结合世界动物卫生组织(WOAH)水生动物委员会(AAC)讨论性文件,综述了eDNA技术在水生动物疫病监测中样品的收集和处理、方法的验证与确认以及在监测方面的适用性等;提出了eDNA方法无法获得诊断性能的准确评估,不适合用来支持WOAH名录中疫病的无疫声明,但阳性结果可能是可疑病例的适当判定标准等。未来可发挥其优势,进一步尝试将eDNA方法用于出入境食用、种用和观赏用水生动物养殖场、隔离暂养场等水生动物疫病监测,特别是特种高货值水生动物及大型水面水生动物疫病的监测。 展开更多

关键词 EDNA 水生动物疫病监测 适用性

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家禽应激的控制 被引量：1

16

作者 段宏安 《国外兽医学（畜禽疾病）》 CSCD 1996年第1期19-20,共2页

家禽应激的控制段宏安摘译薛登民校在应激条件下，家禽的体况如血压、血液成分发生改变，必需营养物质如蛋白和盐分的排出增加，食物和水分摄取减少，生长停止或受阻；同时，由于防御体系中起主要作用的某些激素活性下降，家禽对疾病的... 家禽应激的控制段宏安摘译薛登民校在应激条件下，家禽的体况如血压、血液成分发生改变，必需营养物质如蛋白和盐分的排出增加，食物和水分摄取减少，生长停止或受阻；同时，由于防御体系中起主要作用的某些激素活性下降，家禽对疾病的抵抗力会被削弱。有经验的农场主对正... 展开更多

关键词 家禽 应激 控制

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引起母猪繁殖力降低的病毒 被引量：1

17

作者 段宏安 《国外畜牧科技》 1994年第5期49-52,共4页

全世界引起母猪繁殖力下降的病原主要是病毒,包括:猪瘟病毒(HCV)、日本乙型脑炎病毒、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV),以及母猪繁殖及呼吸综合征病毒(PRRSV)。这些病毒虽然在理化特性上差别显著,引起产后母猪临床疾患的能力也不同,... 全世界引起母猪繁殖力下降的病原主要是病毒,包括:猪瘟病毒(HCV)、日本乙型脑炎病毒、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV),以及母猪繁殖及呼吸综合征病毒(PRRSV)。这些病毒虽然在理化特性上差别显著,引起产后母猪临床疾患的能力也不同,但都可通过胎盘感染孕体。 展开更多

关键词 母猪 繁殖力 病毒 猪 感染

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改善猪舍环境 预防呼吸道传染病 被引量：1

18

作者 段宏安 《国外畜牧科技》 1995年第6期50-51,共2页

猪群间呼吸道疾病的临床表现互不相同。在详细研究了猪肺炎及胸膜炎发病率与猪场环境之间关系的基础上,发现了几种导致呼吸道病暴发的危险性因素。控制或消灭这些因素,可以提高整个猪群的健康状况。

关键词 猪病 猪舍环境 呼吸道传染病 防治

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猪呼吸道病的疫苗接种原则 被引量：1

19

作者 段宏安 《国外畜牧科技》 1995年第6期48-49,共2页

在控制猪传染性呼吸道病的各种综合措施中,疫苗接种常可以有效地缓解临床症状,减少经济损失。根据疫病的流行病学状况,疫苗或可保护未感染动物免受疾病侵袭,或可缓解感染猪的临床症状,或者可以降低密集饲养猪群的感染压力。现在疫苗接... 在控制猪传染性呼吸道病的各种综合措施中,疫苗接种常可以有效地缓解临床症状,减少经济损失。根据疫病的流行病学状况,疫苗或可保护未感染动物免受疾病侵袭,或可缓解感染猪的临床症状,或者可以降低密集饲养猪群的感染压力。现在疫苗接种还是根除某些传染病的首选措施。 展开更多

关键词 猪病 呼吸道疾病 疫苗接种

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病毒引起的母猪繁殖障碍

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作者 段宏安 《国外兽医学（畜禽疾病）》 CSCD 1995年第1期37-40,共4页

病毒引起的母猪繁殖障碍ＭｅｎｇｅｌｉｎｇＷ．Ｌ．ｅｔａｌ目前引起母猪繁殖障碍的病原最主要是病毒如：猪瘟病毒，日本乙型脑炎病毒，伪狂犬病毒，猪细小病毒以及猪繁殖障碍和呼吸道综合症病毒（ＰＲＲＳＶ）等。这些病毒虽然在理化... 病毒引起的母猪繁殖障碍ＭｅｎｇｅｌｉｎｇＷ．Ｌ．ｅｔａｌ目前引起母猪繁殖障碍的病原最主要是病毒如：猪瘟病毒，日本乙型脑炎病毒，伪狂犬病毒，猪细小病毒以及猪繁殖障碍和呼吸道综合症病毒（ＰＲＲＳＶ）等。这些病毒虽然在理化特性，所致临床症状等方面有所不同，... 展开更多

关键词 猪病 母猪 病毒 繁殖障碍

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