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题名大豆球蛋白G3A1b抗原表位的预测及初步定位
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作者
段宇莹
席俊
王一超
付杨
吴枭
孙富宇
陈珍妮
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机构
河南工业大学粮油食品学院
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出处
《轻工学报》
CAS
北大核心
2023年第5期42-50,共9页
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基金
国家自然科学基金面上项目(32172310)
河南工业大学青年骨干教师项目(21420043)
河南工业大学创新基金支持计划专项资助项目(2020zkcj19)
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文摘
采用生物信息学软件对大豆球蛋白中G3亚基A1b酸性多肽链(G3A1b多肽链)的潜在抗原表位进行综合预测,并结合A1b酸性多肽链的氨基酸序列,重叠分段后设计合成3对引物,构建目的基因的克隆载体;利用T7噬菌体展示技术表达目的蛋白,制备热加工特异性吸收抗体后进行ELISA检测以鉴定被破坏的抗原表位。结果表明:G3A1b多肽链中可能存在27QQN29、39LKPDNRIE46、58NNK60、114PQQKGQSSRP123、134R、174QMPR177和184NQEQEF1897个线性表位;目的基因大小与预期相符,成功构建了克隆载体,组装了噬菌体;G3A1b-3片段具有较高的抗原性且在热加工过程中被破坏得最明显。该结果为精确定位大豆球蛋白G3A1b中致敏关键氨基酸提供了理论支持。
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关键词
大豆球蛋白
G3A1b多肽链
抗原表位
抗原性
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Keywords
glycinin
G3A1b polypeptide chain
antigenic epitope
antigenicity
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分类号
TS214.2
[轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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题名大豆球蛋白G5A3亚基加工破坏表位的初步定位
被引量：2
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作者
王一超
席俊
陈慧彬
李英英
段宇莹
孙富宇
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机构
河南工业大学粮油食品学院
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出处
《中国粮油学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期92-98,共7页
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基金
国家自然科学基金面上项目(32172310)
河南工业大学青年骨干教师(21420043)
河南工业大学创新基金支持计划(2020zkcj19)。
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文摘
大豆球蛋白是重要的大豆过敏原,为探究大豆球蛋白G5亚基中A3酸性多肽链的破坏表位,对A3亚基的基因进行重叠分段并设计合成引物、构建克隆载体后进行双酶切,与T7 vector arms连接构建重组噬菌体并表达目的蛋白;制作热处理及超高压联合热处理破坏抗原表位的特异性抗体,用间接竞争ELISA法检测不同肽段的抗原性高低及加工破坏表位。结果表明,A3链与其3个分段基因的长度分别为:960、420、450、450 bp,与预期片段大小相符;经间接竞争ELISA法检测后,片段1抗原性最高,通过阴性对照,超高压联合热处理对该亚基的破坏效果优于单独热处理试验,其中对片段1的破坏效果最好。因此,超高压联合热处理的方法对蛋白抗原性破坏效果显著,且对片段1破坏最强。
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关键词
过敏原G5A3
重叠分段
重组噬菌体
抗原性鉴定
破坏表位筛选
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Keywords
allergen G5A3
overlapping segmentation
recombinant phage
antigenicity identification
destruction of epitope screening
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分类号
TS214.2
[轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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