期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
PTD-Calbindin D28K融合蛋白的表达、纯化及其穿膜功能的鉴定
被引量：
2
1
作者
樊永峰
吕传真
+1 位作者
乔健
任惠民
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期231-234,F002,共5页
目的 构建融合蛋白PTD CalbindinD2 8K(CaBP2 8)的表达质粒 ,并进行诱导表达、纯化 ,在体外初步鉴定其跨膜转运功能。方法 提取大鼠脑组织总RNA ,反转录后用聚合酶链反应 (PCR)法扩增编码CaBP2 8的全长cD NA序列 ,重组入 pET 32a及含...
目的 构建融合蛋白PTD CalbindinD2 8K(CaBP2 8)的表达质粒 ,并进行诱导表达、纯化 ,在体外初步鉴定其跨膜转运功能。方法 提取大鼠脑组织总RNA ,反转录后用聚合酶链反应 (PCR)法扩增编码CaBP2 8的全长cD NA序列 ,重组入 pET 32a及含有PTD的pTransVector表达载体中 ,测序鉴定后转化大肠埃希菌BL2 1(DE3) ,构建重组体的表达菌株。IPTG诱导表达后 ,以NTA Ni亲和层析柱进行分离纯化 ,SDS PAGE以及Westernblot鉴定。纯化的CaBP2 8及PTD CaBP2 8用FITC标记 ,分别以一定的浓度孵育体外培养的cos7细胞 ,最后荧光显微镜下观察两者在细胞中的分布情况 ,并用流式细胞仪 (FCM)做定量分析。结果 成功地构建了含有及不含有PTD的CaBP2 8表达载体 ,插入片断 783bp ,表达产物相对分子质量分别约 30 0 0 0、5 0 0 0 0 ,经Weternblot鉴定 ,与抗CaBPD2 8K抗体均有特异性反应。孵育培养的cos7细胞后 ,CaBP2 8 FITC仅少量吸附于细胞膜表面 ,而PTD CaBP2 8 FITC则分布于胞质内 ;FCM定量分析发现 ,细胞荧光强度随着目的蛋白的孵育浓度或孵育时间增加而增加 ,并且孵育时间为 1h时荧光达到最强。结论 重组PTD CaBP2
展开更多
关键词
PTD-Calbindin
D28K融合蛋白
表达
纯化
穿膜功能
鉴定
蛋白质治疗
神经系统疾病
在线阅读
下载PDF
职称材料
颅内海绵状血管瘤CCM1基因8号外显子基因突变的分析及704insT新插入突变位点
被引量：
2
2
作者
谢嵘
陈衔城
+4 位作者
樊永峰
任惠民
高亮
夏鹰
李晓牧
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期280-283,共4页
目的 分析国人颅内海绵状血管瘤(ICCA)CCM 1基因8号外显子基因突变的情况。方法 收集2 1例ICCA患者及30例正常健康人外周静脉血,进行DNA抽提、PCR扩增8号外显子后直接测序,并与GenBank比较。结果 1例ICCA患者8号外显子在相当于CCM 1...
目的 分析国人颅内海绵状血管瘤(ICCA)CCM 1基因8号外显子基因突变的情况。方法 收集2 1例ICCA患者及30例正常健康人外周静脉血,进行DNA抽提、PCR扩增8号外显子后直接测序,并与GenBank比较。结果 1例ICCA患者8号外显子在相当于CCM 1基因第70 4、70 5位碱基G和A之间插入碱基T(70 4insT) ,产生移码效应,使得编码的KRIT1蛋白氨基酸序列在第2 4 6位出现终止密码子TAA ,肽链合成提前终止。其余检测均无异常。结论 国人ICCA患者8号外显子存在CCM 1基因的突变,新发现的8号外显子70 4insT插入突变导致编码的KRIT1蛋白功能缺失,与ICCA发病有关。
展开更多
关键词
海绵状血管瘤
CCM1基因
基因突变
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
PTD-Calbindin D28K融合蛋白的表达、纯化及其穿膜功能的鉴定
被引量：
2
1
作者
樊永峰
吕传真
乔健
任惠民
机构
复旦大学上海医学院神经病学系-华山医院神经科
出处
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期231-234,F002,共5页
文摘
目的 构建融合蛋白PTD CalbindinD2 8K(CaBP2 8)的表达质粒 ,并进行诱导表达、纯化 ,在体外初步鉴定其跨膜转运功能。方法 提取大鼠脑组织总RNA ,反转录后用聚合酶链反应 (PCR)法扩增编码CaBP2 8的全长cD NA序列 ,重组入 pET 32a及含有PTD的pTransVector表达载体中 ,测序鉴定后转化大肠埃希菌BL2 1(DE3) ,构建重组体的表达菌株。IPTG诱导表达后 ,以NTA Ni亲和层析柱进行分离纯化 ,SDS PAGE以及Westernblot鉴定。纯化的CaBP2 8及PTD CaBP2 8用FITC标记 ,分别以一定的浓度孵育体外培养的cos7细胞 ,最后荧光显微镜下观察两者在细胞中的分布情况 ,并用流式细胞仪 (FCM)做定量分析。结果 成功地构建了含有及不含有PTD的CaBP2 8表达载体 ,插入片断 783bp ,表达产物相对分子质量分别约 30 0 0 0、5 0 0 0 0 ,经Weternblot鉴定 ,与抗CaBPD2 8K抗体均有特异性反应。孵育培养的cos7细胞后 ,CaBP2 8 FITC仅少量吸附于细胞膜表面 ,而PTD CaBP2 8 FITC则分布于胞质内 ;FCM定量分析发现 ,细胞荧光强度随着目的蛋白的孵育浓度或孵育时间增加而增加 ,并且孵育时间为 1h时荧光达到最强。结论 重组PTD CaBP2
关键词
PTD-Calbindin
D28K融合蛋白
表达
纯化
穿膜功能
鉴定
蛋白质治疗
神经系统疾病
Keywords
Biological membranes
Brain
Cloning
DNA
Living systems studies
Patient monitoring
Proteins
RNA
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
颅内海绵状血管瘤CCM1基因8号外显子基因突变的分析及704insT新插入突变位点
被引量：
2
2
作者
谢嵘
陈衔城
樊永峰
任惠民
高亮
夏鹰
李晓牧
机构
复旦大学附属华山医院神经外科上海华山神经外科(集团)研究所
复旦大学神经病学研究所
附属中山医院内分泌科
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期280-283,共4页
文摘
目的 分析国人颅内海绵状血管瘤(ICCA)CCM 1基因8号外显子基因突变的情况。方法 收集2 1例ICCA患者及30例正常健康人外周静脉血,进行DNA抽提、PCR扩增8号外显子后直接测序,并与GenBank比较。结果 1例ICCA患者8号外显子在相当于CCM 1基因第70 4、70 5位碱基G和A之间插入碱基T(70 4insT) ,产生移码效应,使得编码的KRIT1蛋白氨基酸序列在第2 4 6位出现终止密码子TAA ,肽链合成提前终止。其余检测均无异常。结论 国人ICCA患者8号外显子存在CCM 1基因的突变,新发现的8号外显子70 4insT插入突变导致编码的KRIT1蛋白功能缺失,与ICCA发病有关。
关键词
海绵状血管瘤
CCM1基因
基因突变
Keywords
cavernous angiomas
CCMI gene
gene mutat ion
分类号
R743.7 [医药卫生—神经病学与精神病学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PTD-Calbindin D28K融合蛋白的表达、纯化及其穿膜功能的鉴定
樊永峰
吕传真
乔健
任惠民
《复旦学报（医学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
颅内海绵状血管瘤CCM1基因8号外显子基因突变的分析及704insT新插入突变位点
谢嵘
陈衔城
樊永峰
任惠民
高亮
夏鹰
李晓牧
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
