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铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测 被引量:1
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作者 宋若楠 刘春草 +9 位作者 李航 王真真 贾楠楠 朱杰 李传峰 程松 梁留存 刘光清 王金泉 孟春春 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期91-96,共6页
为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质... 为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE),蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定,获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后,使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性,效价确定为8×104 IU/mg,显示出良好的应用前景。 展开更多
关键词 铁蛋白 犬α干扰素 融合表达 抗病毒活性
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猫泛白细胞减少症病毒SH0918株的分离鉴定及遗传进化分析 被引量:1
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作者 林亮亮 吴赛 +10 位作者 汤傲星 刘春草 谈晓梅 程松 梁留存 滕耀鹏 朱世强 朱杰 李传锋 孟春春 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期152-161,共10页
本文对2015—2022年收集的25份疑似猫瘟样本进行了PCR检测和病原分离,同时还根据测定的VP2基因序列,对本文分离的FPV流行毒株与国内外参考毒株的同源性以及遗传演化进行了分析。检测结果表明,在25份可疑样本中有6份FPV阳性样品。在对其... 本文对2015—2022年收集的25份疑似猫瘟样本进行了PCR检测和病原分离,同时还根据测定的VP2基因序列,对本文分离的FPV流行毒株与国内外参考毒株的同源性以及遗传演化进行了分析。检测结果表明,在25份可疑样本中有6份FPV阳性样品。在对其VP2基因进行测序鉴定以后,我们重点对1株在F81细胞中增殖滴度较高的FPV(SH0918株)进行了分离和鉴定,并详细研究了该毒株的生物学特性。研究结果表明,SH0918株可以在F81中良好增殖,并产生特异性致病变效应,其TCID_(50)为10^(-5.11)/0.1mL;IFA的检测结果进一步证明在感染细胞中存在FPV的特异性蛋白表达;电镜检测结果表明,纯化的细胞培养物中存在典型的FPV病毒粒子;血凝试验结果表明,FPV能够凝集猪红细胞,血凝效价为1∶32。测定的FPV SH0918株的全基因组长5124 bp;序列比对分析结果显示,本文分离的毒株与参考毒株之间的核苷酸序列同源性为98.4%~100%;进化树结果表明:本研究中的FPV分离毒株基本属于同一分支,其中SH0918株与国内分离株JN-FPV-96、TZ-FPV-112的亲缘关系较近,但与欧洲分离株以及疫苗株亲缘关系较远。本研究内容一方面丰富了我国FPV的流行病学资料,另一方面对新型猫瘟疫苗的研发也具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 猫细小病毒 分离鉴定 生物学特性 VP2基因 遗传进化分析
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上海市宠物疫病发生特点及防治建议
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作者 王笑 程松 +5 位作者 梁留存 汤傲星 孟春春 李传峰 朱杰 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期201-205,共5页
为了解上海地区宠物疫病发生和流行的特点,本文对来自上海某宠物医院收治的近2000例门诊病例进行了统计和分析。结果表明,在宠物病毒性病例中发病较多的病原有犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)、犬冠状病毒(Canine coronavirus,C... 为了解上海地区宠物疫病发生和流行的特点,本文对来自上海某宠物医院收治的近2000例门诊病例进行了统计和分析。结果表明,在宠物病毒性病例中发病较多的病原有犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)、犬冠状病毒(Canine coronavirus,CCV)、猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)和猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV);在宠物寄生虫病例中,主要以球虫、跳蚤、耳螨感染为主;在宠物皮肤病病例中,多以细菌或真菌感染病例居多。根据上述统计结果,我们认为病毒性传染病、传染性皮肤病和体表寄生虫感染是当前对宠物健康危害较大的疫病,我们应以此作为宠物疫病重点防控的方向。 展开更多
关键词 宠物 门诊病例 统计分析 传染病
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副猪嗜血杆菌平板凝集检测方法的建立与应用 被引量:4
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作者 高艳 张定全 +6 位作者 杨增岐 梁留存 刘海金 吴朋朋 高小龙 常旭东 杜恩岐 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第1期21-25,30,共6页
【目的】建立快速检测副猪嗜血杆菌抗体的平板凝集试验方法,以便能够对副猪嗜血杆菌病进行快速、准确的诊断。【方法】利用9株(Ea、Ec、Ew、A1、A2、B1、B2、C1、C2)副猪嗜血杆菌陕西分离株制备平板凝集抗原,用其免疫健康家兔制备血清抗... 【目的】建立快速检测副猪嗜血杆菌抗体的平板凝集试验方法,以便能够对副猪嗜血杆菌病进行快速、准确的诊断。【方法】利用9株(Ea、Ec、Ew、A1、A2、B1、B2、C1、C2)副猪嗜血杆菌陕西分离株制备平板凝集抗原,用其免疫健康家兔制备血清抗体,建立副猪嗜血杆菌平板凝集检测方法,对制备抗原的优势菌株进行筛选,并对该方法的特异性、敏感性、抗原最佳工作浓度进行检测。【结果】选出Ew株作为制备抗原的种子菌株,成功建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的平板凝集试验方法;该方法具有良好的特异性和敏感性,抗原最适工作浓度为8×109 CFU/mL。采用本试验建立的副猪嗜血杆菌平板凝集试验方法对临床血清样品的检测结果与临床诊断结果基本一致。【结论】建立的副猪嗜血杆菌平板凝集试验方法能够对副猪嗜血杆菌病做出较为快速、准确的诊断;陕西省存在副猪嗜血杆菌不同程度的感染,规模猪场集中饲养的猪感染副猪嗜血杆菌的比率明显高于散户。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 抗原制备 平板凝集 抗体检测
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