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乙醇对重组毕赤酵母表达猪α干扰素的性能及其碳源代谢关键酶活性的影响
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作者 丁健 高敏杰 +4 位作者 侯国力 梁克学 史仲平 于瑞嵩 李震 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期150-153,158,共5页
本研究将细胞培养末期乙醇积累浓度低于2g/L的两个批次作为对照,探讨了长时间(大于4h)和瞬时的高乙醇浓度(10g/L以上)对猪α干扰素表达性能以及碳源代谢关键酶活性的影响。结果表明,长时间的高乙醇环境会大幅度降低甘油以及甲醇代... 本研究将细胞培养末期乙醇积累浓度低于2g/L的两个批次作为对照,探讨了长时间(大于4h)和瞬时的高乙醇浓度(10g/L以上)对猪α干扰素表达性能以及碳源代谢关键酶活性的影响。结果表明,长时间的高乙醇环境会大幅度降低甘油以及甲醇代谢过程中关键酶的比活性,最终导致猪α干扰素表达水平比对照组降低约4~12倍;高乙醇浓度的瞬时冲击后,上述关键酶比活性也会有一定程度的降低,猪α干扰素表达水平降低约8倍。 展开更多
关键词 毕赤酵母 乙醇积累 猪Α干扰素 酶活
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基于乙醇在线测量的DO-Stat甘油流加策略稳定重组毕赤酵母生产猪α干扰素的性能 被引量:1
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作者 侯国力 高敏杰 +4 位作者 丁健 梁克学 于瑞嵩 李震 史仲平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-7,共7页
重组毕赤酵母发酵生产猪!干扰素(pIFN-!)过程性能不稳定,高密度细胞培养阶段的性能指标直接影响到甲醇诱导期的猪!干扰素表达水平。测定分析甲醇代谢关键酶基因的转录水平以及酶活,发现甘油流加培养末期乙醇的大量(超过6 g/L)和长期积累... 重组毕赤酵母发酵生产猪!干扰素(pIFN-!)过程性能不稳定,高密度细胞培养阶段的性能指标直接影响到甲醇诱导期的猪!干扰素表达水平。测定分析甲醇代谢关键酶基因的转录水平以及酶活,发现甘油流加培养末期乙醇的大量(超过6 g/L)和长期积累(超过4h)不可逆转地抑制醇氧化酶(AOX)的启动,是导致猪!干扰素无法正常表达、发酵生产不稳定的主要原因。为此,提出了基于乙醇在线测量的改良型甘油流加控制策略,该策略可以在保证细胞快速生长的同时、将乙醇浓度有效控制在2 g/L以下的水平。与传统DO-Stat甘油流加策略(策略A)相比较,改良型甘油流加策略(策略B)可以强化猪!干扰素的诱导表达性能、确保其发酵生产的稳定:1)相同诱导条件下(甲醇/山梨醇培养基流加体积比1∶1),两个发酵批次大猪!干扰素浓度比使用策略A时优批次的大值分别提高75.5%和29.8%;2)在合理改变诱导条件时(甲醇/山梨醇培养基流加体积比4∶1),大猪!干扰素浓度仍比使用策略A时优批次的大值提高38.9%。 展开更多
关键词 毕赤酵母 发酵 甘油流加培养 外源蛋白表达 乙醇 猪!干扰素
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