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MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用
1
作者
王各各
李娇娜
+4 位作者
杜峰
邓舒
梁佳元
曹雅明
罗恩杰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1068-1072,共5页
目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒...
目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。
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关键词
疟原虫
质粒
基因打靶
MultiSite
GATEWAY技术
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职称材料
题名
MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用
1
作者
王各各
李娇娜
杜峰
邓舒
梁佳元
曹雅明
罗恩杰
机构
中国医科大学基础医学院免疫学教研室
沈阳市中医药学校基础教研室
中国医科大学基础医学院病原生物学教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1068-1072,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30972572)
文摘
目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。
关键词
疟原虫
质粒
基因打靶
MultiSite
GATEWAY技术
Keywords
Plasmodium
plasmid
gene targeting
multisite gateway technology
分类号
R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用
王各各
李娇娜
杜峰
邓舒
梁佳元
曹雅明
罗恩杰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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