耐草甘膦大豆种质资源筛选的研究 被引量：6

1

作者 王斌 张庆贺 +1 位作者 陶波 栾凤侠 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期25-30,共6页

通过田间试验结合室内生物测定的方法,对不同大豆品种(系)进行了耐草甘膦特性的筛选,以期获得耐草甘膦大豆育种的新种质资源。结果表明,在草甘膦常规剂量下,不同大豆品种(系)对草甘膦耐性程度有着较大差异。褐皮豆和绥无腥豆1号耐性程... 通过田间试验结合室内生物测定的方法,对不同大豆品种(系)进行了耐草甘膦特性的筛选,以期获得耐草甘膦大豆育种的新种质资源。结果表明,在草甘膦常规剂量下,不同大豆品种(系)对草甘膦耐性程度有着较大差异。褐皮豆和绥无腥豆1号耐性程度较强;DS系列大豆对草甘膦的耐性明显高于其他品系。通过室内生物测定对耐性程度较高的品种(系)进行进一步研究发现,DS品系等4个品系的耐性程度较高,其耐性倍数分别为4.23、3.82、2.93、2.59和2.48。室内考种数据表明,草甘膦虽然对耐性品系的株高有不同程度的抑制;但耐性品系可以正常的成熟结实,在单株荚数、百粒重等重要指标上具有可利用价值。 展开更多

关键词 草甘膦 大豆 耐性筛选 种质资源

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草甘膦对土壤微生物的影响 被引量：37

2

作者 陶波 蒋凌雪 +2 位作者 沈晓峰 栾凤侠 邱丽娟 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期162-168,179,共8页

以东北地区黑土为材料,探讨草甘膦对土壤呼吸、土壤可培养菌种群数量、大豆固氮根瘤菌和大豆根腐镰刀菌数量的影响。研究结果表明,随着草甘膦浓度的加大,土壤呼吸的抑制作用增强,土壤中草甘膦含量为1mg.kg-1、10mg.kg-1、100mg.kg-1时,... 以东北地区黑土为材料,探讨草甘膦对土壤呼吸、土壤可培养菌种群数量、大豆固氮根瘤菌和大豆根腐镰刀菌数量的影响。研究结果表明,随着草甘膦浓度的加大,土壤呼吸的抑制作用增强,土壤中草甘膦含量为1mg.kg-1、10mg.kg-1、100mg.kg-1时,危害系数分别为1.20、0.322、0.076,远小于无危害标准系数20,确定草甘膦对土壤微生物低毒或无实际危害。不同浓度的草甘膦对土壤真菌、放线菌种群数量具有一定影响。土壤可培养菌种群数量随草甘膦浓度的升高抑制作用逐渐增强,随着草甘膦加入时间的延长,真菌、细菌、放线菌的种群数量有所恢复,其中放线菌与真菌同细菌相比对草甘膦敏感,土壤细菌对草甘膦具有较强的耐受或降解能力。草甘膦对大豆根瘤菌和大豆根腐镰刀菌有一定影响,对大豆根瘤菌的抑制作用与草甘膦浓度呈正比;低浓度草甘膦对镰刀菌产生激活作用,高浓度草甘膦对镰刀菌具有抑制作用;伴随草甘膦加入时间的延长,其对大豆根瘤菌和大豆根腐镰刀菌的抑制作用逐渐减弱。 展开更多

关键词 草甘膦 土壤微生物 土壤呼吸 固氮根瘤菌 根腐镰刀菌

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实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系 被引量：7

3

作者 曹际娟 徐君怡 +3 位作者 曹冬梅 张丕桥 栾凤侠 刘洋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期156-159,共4页

目的:建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方法:以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序列分别设计引物和探针,以其他... 目的:建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方法:以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序列分别设计引物和探针,以其他多种转基因产品和非转基因小麦为对照进行特异性实验,以B73-6-1样品模拟制备10个含量梯度的添加样品进行灵敏度实验。结果:本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏度可达到0.01%(m/m)。结论:该方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确地鉴定转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系。 展开更多

关键词 转基因小麦 B73-6-1 B72-8-11b B102-1-2 品系鉴定 实时荧光聚合酶链式反应

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抗草甘膦转基因大豆对根际和非根际土壤可培养菌的影响 被引量：6

4

作者 陶波 蒋凌雪 +2 位作者 沈晓峰 栾凤侠 邱丽娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期10-16,共7页

采用盆栽方法,以抗草甘膦转基因大豆AZ04及其亲本非转基因大豆A04为试材,探讨抗草甘膦转基因大豆对根际土壤可培养菌数量的影响。结果表明,在大豆生长的15～60 d,抗草甘膦转基因大豆根际土壤真菌种群数量极显著(P<0.01)和显著(P<0... 采用盆栽方法,以抗草甘膦转基因大豆AZ04及其亲本非转基因大豆A04为试材,探讨抗草甘膦转基因大豆对根际土壤可培养菌数量的影响。结果表明,在大豆生长的15～60 d,抗草甘膦转基因大豆根际土壤真菌种群数量极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于亲本非转基因大豆;在大豆生长的30～90 d,抗草甘膦转基因大豆非根际土壤真菌种群数量均极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于亲本非转基因大豆,转基因大豆能够促进非根际土壤中真菌种群的生长。非转基因大豆根际土壤细菌数量在播种30～75 d显著高于转基因大豆,而90 d时转基因大豆根际细菌数量显著高于非转基因大豆;转基因大豆、非转基因大豆非根际土壤细菌数量差异在大豆出苗后的整个生长过程无明显规律,在大豆生长的15 d,转基因大豆与非转基因大豆相比显著抑制非根际土壤细菌数量(P<0.05),在大豆生长的60和90 d,转基因大豆与非转基因大豆相比显著促进非根际土壤细菌生长(P<0.05)。转基因大豆与非转基因大豆根际和非根际土壤中放线菌数量都有较大波动,在大豆生长的45～90 d,转基因大豆根际和非根际土壤放线菌数量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于非转基因大豆。研究为抗草甘膦转基因大豆对土壤微生物的影响提供理论依据。 展开更多

关键词 转基因大豆 真菌 细菌 放线菌

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抗草甘膦转基因大豆生物与环境安全性 被引量：14

5

作者 沈晓峰 栾凤侠 陶波 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期401-404,共4页

世界转基因作物发展速度迅猛,其中抗除草剂转基因大豆的种植面积和作物产量都占有较大比例,其安全性也受到人们极大关注。文章通过对抗除草剂转基因大豆多年的研究总结,并结合国内外抗除草剂转基因大豆的研究文献,阐述了抗草甘膦转基因... 世界转基因作物发展速度迅猛,其中抗除草剂转基因大豆的种植面积和作物产量都占有较大比例,其安全性也受到人们极大关注。文章通过对抗除草剂转基因大豆多年的研究总结,并结合国内外抗除草剂转基因大豆的研究文献,阐述了抗草甘膦转基因大豆现状及其发展,并对其生物和环境的安全性问题进行评价。 展开更多

关键词 草甘膦 转基因大豆 生物安全性 环境安全性

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转基因小麦B73-6-1外源基因拷贝数的确定 被引量：2

6

作者 甄贞 段俊枝 +5 位作者 于艳波 曲波 袁肖寒 高学军 栾凤侠 张明辉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第4期19-22,30,共5页

为了确定转基因小麦B73-6-1中外源基因HMW-GS的拷贝数,以期为HMW-GS基因的整合位点和遗传表达研究奠定基础,构建了含有外源基因HMW-GS的标准品,并以wx012基因作为内源参照,通过实时荧光定量PCR方法,进行了3次重复试验。结果表明,在3组... 为了确定转基因小麦B73-6-1中外源基因HMW-GS的拷贝数,以期为HMW-GS基因的整合位点和遗传表达研究奠定基础,构建了含有外源基因HMW-GS的标准品,并以wx012基因作为内源参照,通过实时荧光定量PCR方法,进行了3次重复试验。结果表明,在3组试验中得到的HMW-GS基因分子数分别为8.62×1018、4.34×1018、1.10×1018个,wx012基因分子数分别为6.27×1017、3.14×1017、7.84×1017个,经计算HMW-GS基因拷贝数分别为13.75、13.84、14.01个,由此确定转基因小麦B73-6-1中HMW-GS外源基因的拷贝数为14个。 展开更多

关键词 转基因小麦 B73-6-1 拷贝数 标准品 外源基因

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马铃薯、番茄内源基因PCR检测引物设计及特异性分析 被引量：3

7

作者 才华 栾凤侠 +2 位作者 关学佳 朱巍 白月 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第22期192-195,共4页

对马铃薯UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGPase,U20345)和番茄多聚半乳糖醛酸酶-2a基因(PG-2a,X04583.1)进行序列相似性分析和多序列比对,确定特异片段,设计特异引物,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,引物具有较高的... 对马铃薯UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGPase,U20345)和番茄多聚半乳糖醛酸酶-2a基因(PG-2a,X04583.1)进行序列相似性分析和多序列比对,确定特异片段,设计特异引物,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,引物具有较高的特异性;同时建立利用双重PCR检测马铃薯和番茄混合成分的方法,当马铃薯和番茄DNA混合质量为1.25ng时,仍可对其成分进行可靠的鉴定。新设计的马铃薯和番茄内源基因的引物及建立的双重PCR检测方法具有一定的特异性和灵敏性,适于出入境检验检疫部门对马铃薯和番茄制品进行检测。 展开更多

关键词 马铃薯 番茄 内源基因特异引物 UGPASE PG-2a 双重PCR

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高分子量谷蛋白亚基转基因小麦检测技术的研究 被引量：2

8

作者 栾凤侠 张洪祥 +1 位作者 徐宝梁 白月 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第5期645-649,共5页

针对该实验材料转入的外源基因选择了标准中通用的外源基因CaMV35S,NOS,bar和植物内源基因tRNALeu作为特异性引物,对影响定性PCR检测(反应体系:氯化镁浓度,引物和模板浓度;反应条件:退火温度和时间,循环数等)的主要条件进行了实验优化... 针对该实验材料转入的外源基因选择了标准中通用的外源基因CaMV35S,NOS,bar和植物内源基因tRNALeu作为特异性引物,对影响定性PCR检测(反应体系:氯化镁浓度,引物和模板浓度;反应条件:退火温度和时间,循环数等)的主要条件进行了实验优化和选择,同时对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明,可以检测到CaMV35S,NOS,bar外源基因预期大小的目的条带,表明定性PCR检测所优化的条件适合转基因小麦。实验还测定了定性PCR最低检测灵敏度为1%(w/w)。同时对转入外源目的基因进行了表达蛋白的检测,蛋白电泳结果表明检测出1Dx5亚基和1Dy10亚基。 展开更多

关键词 转基因小麦 定性PCR技术 蛋白检测

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小麦贸易及转入外源基因研究进展 被引量：11

9

作者 栾凤侠 陶波 《黑龙江农业科学》 2005年第1期46-48,共3页

随着小麦转基因技术进一步研究应用,转基因小麦的商品化生产和进出口贸易已指日可待,随之而来的是转基因小麦安全性和检验检疫问题。本文在前人研究基础之上系统地总结分析了小麦的贸易现状,对转基因小麦的研究和商品化生产进展缓慢的... 随着小麦转基因技术进一步研究应用,转基因小麦的商品化生产和进出口贸易已指日可待,随之而来的是转基因小麦安全性和检验检疫问题。本文在前人研究基础之上系统地总结分析了小麦的贸易现状,对转基因小麦的研究和商品化生产进展缓慢的原因进行分析,并对目前小麦转入外源基因的研究进展情况进行了阐述。 展开更多

关键词 转基因小麦 外源基因 商品化生产 转基因技术 研究应用 检验检疫 小麦贸易 贸易现状 总结分析 进出口贸易

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食用油脂中DNA高效快速提取方法及实时荧光PCR检测技术的研究 被引量：17

10

作者 栾凤侠 张洪祥 白月 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期41-43,共3页

针对食用油脂中提取高纯度和高得率DNA比较难的问题,通过与CTAB法比较研究,并用改良的试剂盒法从食用油脂中高效快速提取到了高纯度和高浓度的DNA,并用实时荧光PCR技术成功地检测出了食用油脂中的内源基因和外源基因。

关键词 食用油脂 DNA提取方法 PCR检测

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大豆精加工产品DNA提取方法及转基因检测 被引量：3

11

作者 栾凤侠 张洪祥 白月 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期232-235,共4页

针对大豆精加工产品提取DNA纯度争浓度不高的难题,对传统的CTAB法、试剂盒法及改良试剂盒法进行了比较研究,采用改良的试剂盒法快速提取了满足实时荧光定量PCR检测要求的高纯度和高产量DNA,并且利用实时荧光定量PCR定性检测出了大豆精... 针对大豆精加工产品提取DNA纯度争浓度不高的难题,对传统的CTAB法、试剂盒法及改良试剂盒法进行了比较研究,采用改良的试剂盒法快速提取了满足实时荧光定量PCR检测要求的高纯度和高产量DNA,并且利用实时荧光定量PCR定性检测出了大豆精加工产品中的内源基因和外源基因。 展开更多

关键词 大豆 精加工产品 DNA提取

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转基因小麦的定性PCR筛选检测技术 被引量：2

12

作者 栾凤侠 张洪祥 白月 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期378-381,共4页

为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uid A、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检... 为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uid A、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检测,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基因麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D)和Ubiquitin启动子的引物序列,并对PCR反应条件进行了优化,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,可以检测到预期大小的目的片段。同时对PCR产物用实时荧光定量PCR进行了确证实验,并得到预期的结果。定性PCR最低检测灵敏度为0.5%(w/w)。建立的转基因小麦定性PCR筛选检测方法具有通用性。 展开更多

关键词 小麦 转基因 PCR 定性检测

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多重PCR结合变性高效液相色谱技术转基因小麦检测方法的建立 被引量：7

13

作者 白月 栾凤侠 +1 位作者 王珣 关学佳 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期577-581,共5页

为了满足对小麦转基因成分高通量快速检测的需要,建立了一种新的转基因小麦检测方法。通过对不同稀释倍数的转基因小麦品系B73-6-1中的内源基因Wx012、外源基因ubiquitin、bar、nos、uidA进行单一PCR和多重PCR扩增,应用琼脂糖凝胶和变... 为了满足对小麦转基因成分高通量快速检测的需要,建立了一种新的转基因小麦检测方法。通过对不同稀释倍数的转基因小麦品系B73-6-1中的内源基因Wx012、外源基因ubiquitin、bar、nos、uidA进行单一PCR和多重PCR扩增,应用琼脂糖凝胶和变性高效液相色谱(DHPLC,denaturing high performance liq-uid chromatography)技术分离PCR产物,进行灵敏度分析,并用非转基因小麦京花1号籽粒、大豆籽粒、麦片、转基因小麦B73-6-1加工成的油炸制品为样本,对建立的检测体系进行检测。结果表明,样品经多重PCR扩增和DHPLC分离后,能够得到准确可靠的转基因图谱。与凝胶电泳方法比较,本研究所建立的多重PCR-DHPLC具有更高的检测通量和灵敏度(能够同时检测5个基因,灵敏度达到1 ng.μL-1),能够满足小麦转基因成分的高通量快速检测的要求,同时也为转基因产品检测提供了一种新的技术手段。 展开更多

关键词 转基因小麦 多重PCR 变性高效液相色谱 检测

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应用多重PCR-DHPLC方法快速检测转基因马铃薯及EH92-527-1品系鉴定 被引量：5

14

作者 白月 栾凤侠 高宏伟 《中国马铃薯》 2011年第3期129-134,共6页

以EH92-527-1转基因马铃薯为试材,应用多重PCR技术同时扩增马铃薯的内源基因(UGPase)和外源基因(NOS终止子、NPTII结构基因和EH92-527-1品系特异基因),将扩增产物在DHPLC非变性条件下分离,分析几个基因扩增的结果;将模板进行稀释,确定... 以EH92-527-1转基因马铃薯为试材,应用多重PCR技术同时扩增马铃薯的内源基因(UGPase)和外源基因(NOS终止子、NPTII结构基因和EH92-527-1品系特异基因),将扩增产物在DHPLC非变性条件下分离,分析几个基因扩增的结果;将模板进行稀释,确定了方法的检测灵敏度,并与凝胶电泳结果相比较,建立了马铃薯转基因成分筛选检测及品系鉴定的多重PCR-变性高效液相色谱(DHPLC)方法。试验结果表明,该方法能够同时筛选检测转基因马铃薯的四个内、外源基因,且与凝胶成像相比,有更好的检测灵敏度,可达到1 ng/μL。本文首次建立的马铃薯多重PCR-DHPLC检测方法,能够高通量快速准确的检测马铃薯中的转基因成分及对品系进行鉴定。 展开更多

关键词 转基因马铃薯 多重PCR 变性高效液相色谱 筛选检测 品系鉴定

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草甘膦的发展与环境安全性评价 被引量：8

15

作者 赵宝广 闫彩燕 +2 位作者 栾凤侠 曹宝祥 陶波 《大豆科技》 2019年第4期25-33,共9页

近几年草甘膦一直处于国内外研究的热点,随着抗草甘膦转基因作物在世界各地的发展与推广,草甘膦的使用量与日俱增。草甘膦在环境中大量投放引起人们对其安全性高度重视。因此对草甘膦的发展、理化性质、作用机制、环境行为以及对生物的... 近几年草甘膦一直处于国内外研究的热点,随着抗草甘膦转基因作物在世界各地的发展与推广,草甘膦的使用量与日俱增。草甘膦在环境中大量投放引起人们对其安全性高度重视。因此对草甘膦的发展、理化性质、作用机制、环境行为以及对生物的毒性作了总结,期望人们更好的了解与正确使用草甘膦除草剂。 展开更多

关键词 草甘膦 转基因作物 作用机制 环境行为

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小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限 被引量：1

16

作者 白月 栾凤侠 王珣 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期199-205,共7页

为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用... 为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。 展开更多

关键词 转基因小麦 PCR 实时荧光PCR绝对检测低限 相对检测低限

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转G2_EPSPS和GAT基因大豆栽培地生存竞争能力以及对节肢动物多样性的影响

17

作者 赵宝广 曹宝祥 +4 位作者 栾凤侠 陶波 李松宇 李荣兴 刘章雄 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期954-962,共9页

转基因作物的全球快速发展,其对环境的安全性影响成为人们关注的热点。我国转基因大豆的发展还处于试验研究阶段,对转基因大豆环境安全性进行科学严谨评价是我国转基因大豆商业发展的有力支撑,具有非常重要的理论和实践生产意义｡本研究... 转基因作物的全球快速发展,其对环境的安全性影响成为人们关注的热点。我国转基因大豆的发展还处于试验研究阶段,对转基因大豆环境安全性进行科学严谨评价是我国转基因大豆商业发展的有力支撑,具有非常重要的理论和实践生产意义｡本研究以转G2_EPSPS和GAT双价基因抗草甘膦大豆材料GE−J16与受体材料Jack以及当地主栽品种中黄37为研究对象。采用田间栽培试验,比较其生长时期的竞争能力以及成熟期繁育和生存能力的差异,研究了转基因和非转基因大豆栽培环境生存竞争安全性;连续3年调查供试大豆品种田间节肢动物的种类与数量,分析其多样性指数､优势集中性指数､均匀性指数的动态变化,明确转基因和非转基大豆以及草甘膦除草剂对豆田节肢动物群落多样性的影响｡试验结果显示,不同生育时期的3个大豆品种的株高、复叶数、田间覆盖度、繁育系数和落粒性都基本一致无差异显著性,无栽培地生存竞争优势;转基因大豆GE−J16人工除草､转基因大豆GE−J16喷施草甘膦和非转基因大豆Jack人工除草三个处理3年的节肢动物的多样性指数､均匀性指数､优势集中性指数变化趋势一致,且3个处理同一生育时期之间各指标无显著性差异,说明耐草甘膦转基因大豆以及草甘膦除草剂并不会引起豆田节肢动物群落多样性的明显变化。 展开更多

关键词 转基因耐草甘膦大豆 生存竞争 节肢动物 杂草化 多样性

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转基因作物及产品检测技术的研究进展 被引量：1

18

作者 胡珅 程阳 栾凤侠 《黑龙江农业科学》 2013年第11期135-140,共6页

为了规范管理转基因产品,以建立转基因产品的检测技术标准为前提,通过分析转基因作物商业化的18a中转基因作物种植面积持续增长的态势,以核酸检测方法为主,介绍了基因芯片、PCR技术、变性高效液相色谱和环介导等温扩增技术在转基因检测... 为了规范管理转基因产品,以建立转基因产品的检测技术标准为前提,通过分析转基因作物商业化的18a中转基因作物种植面积持续增长的态势,以核酸检测方法为主,介绍了基因芯片、PCR技术、变性高效液相色谱和环介导等温扩增技术在转基因检测领域的研究进展,并对今后转基因检测技术标准的发展进行了展望。 展开更多

关键词 转基因作物 检测 核酸 变性高效液相色谱 环介导等温扩增

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小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系

19

作者 程阳 胡珅 栾凤侠 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1100-1104,共5页

为了满足转基因小麦检测中对内源参照基因的检测要求,以小麦属特异的内源基因γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)作为目的基因,采用环状等温扩增技术(LAMP)建立了小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系。针对小麦内源基因GAG56D特异靶序列的6个区... 为了满足转基因小麦检测中对内源参照基因的检测要求,以小麦属特异的内源基因γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)作为目的基因,采用环状等温扩增技术(LAMP)建立了小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系。针对小麦内源基因GAG56D特异靶序列的6个区域设计4条特异性引物,通过显色法进行LAMP检测,并对时间、温度等反应条件及反应灵敏度、特异性、稳定性进行探索。结果表明,该检测体系最适反应温度为63℃,反应时间60min,定性检测低限达到0.5%(w/w)。该检测方法具有高度的特异性、灵敏度和稳定性,操作简单、快速。 展开更多

关键词 小麦内源基因 GAG56D 环状等温扩增技术(LAMP) 快速检测

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