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沉默GST-π基因表达对EC9706/cDDP细胞顺铂耐药性的影响 被引量:3
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作者 唐悦 轩小燕 +1 位作者 柳璐璐 李敏 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第1期4-8,共5页
目的:观察沉默谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP细胞耐药性的影响。方法:构建靶向GST-π基因的siRNA重组慢病毒GSTsi1、GSTsi2和无义对照GSTsiC,转染EC9706/cDDP细胞。通过RT-PCR及Weste... 目的:观察沉默谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP细胞耐药性的影响。方法:构建靶向GST-π基因的siRNA重组慢病毒GSTsi1、GSTsi2和无义对照GSTsiC,转染EC9706/cDDP细胞。通过RT-PCR及Western blot法检测GSTsi1、GSTsi2和GSTsiC感染前后EC9706/cDDP细胞中GST-πmRNA和蛋白的表达;MTT法检测感染GSTsi2、GSTsiC与未感染的EC9706/cDDP细胞对顺铂敏感性的变化。结果:感染GSTsi1、GSTsi2后EC9706/cDDP细胞GST-πmRNA的表达下调(F=3.490,P<0.001),其蛋白表达也减弱。感染GSTsi2的EC9706/cDDP细胞对顺铂的耐药指数较感染GSTsiC和未感染的EC9706/cDDP细胞降低(F=50.510,P<0.001)。结论:沉默GST-π基因的表达可降低EC9706/cDDP细胞的顺铂耐药性。 展开更多
关键词 EC9706 cDDP细胞 耐药 谷胱甘肽S转移酶-Π RNA干扰
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RNAi沉默polβ基因部分逆转食管鳞癌细胞顺铂耐药性
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作者 唐悦 王黎 +1 位作者 柳璐璐 李敏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期279-284,共6页
目的通过RNA干扰(RNAi)技术沉默DNA聚合酶polβ的表达,观察其对食管癌细胞顺铂(cDDP)耐药性的影响。方法构建靶向polβ基因的siRNA重组慢病毒pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1、pRNAT-U6.2/Lenti-polβ2及阴性对照载体pRNAT-U6.2/Lenti-polβC,... 目的通过RNA干扰(RNAi)技术沉默DNA聚合酶polβ的表达,观察其对食管癌细胞顺铂(cDDP)耐药性的影响。方法构建靶向polβ基因的siRNA重组慢病毒pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1、pRNAT-U6.2/Lenti-polβ2及阴性对照载体pRNAT-U6.2/Lenti-polβC,将其感染人食管鳞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP,通过RT-PCR、蛋白质印迹分析和免疫荧光实验观察细胞polβ的表达情况,采用MTT法观察不同浓度顺铂对细胞生长的抑制作用并计算50%细胞生长抑制所需的药物浓度(IC50)和耐药指数(RI)。结果靶向polβ的siRNA重组慢病毒pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1和pRNAT-U6.2/Lenti-polβ2感染EC9706/cDDP后均可下调polβ的mRNA和蛋白表达水平,其中前者效果更为显著。顺铂以剂量依赖方式抑制EC9706/cDDP细胞增殖,感染pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1、pRNAT-U6.2/Lenti-polβC的EC9706/cDDP细胞及未感染EC9706/cDDP细胞对顺铂的IC50分别为55.71、62.41、63.11μg/mL,耐药指数分别为13.9、15.5、15.7,其中前者与后二者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 polβ的表达与食管鳞癌细胞系EC9706/cDDP顺铂耐药性有关,沉默其表达可部分逆转EC9706/cDDP细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 食管肿瘤 肿瘤抗药性 顺铂 polβ RNA干扰
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