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5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立 被引量:5
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作者 苏霞 周宏专 +5 位作者 常彦嫣 齐颀 林路路 张进 徐福洲 杨兵 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2211-2219,共9页
为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(ca... 为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2~3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10~100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。 展开更多
关键词 犬腹泻病毒 基因芯片 诊断
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犬细小病毒VP2基因序列分析及BJ-1株的分离鉴定 被引量:1
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作者 周宏专 苏霞 +4 位作者 林路路 齐颀 张进 徐福洲 杨兵 《动物医学进展》 北大核心 2020年第7期21-26,共6页
为分离犬细小病毒毒株,对临床经胶体金试纸条检测CPV阳性的8份犬粪便样品进行VP2全长编码片段扩增与测序。VP2片段序列分析结果显示,8株临床样品的VP2基因全长均为1755 bp,氨基酸的同源性为98.5%~100%。遗传进化分析显示,所有分离的毒... 为分离犬细小病毒毒株,对临床经胶体金试纸条检测CPV阳性的8份犬粪便样品进行VP2全长编码片段扩增与测序。VP2片段序列分析结果显示,8株临床样品的VP2基因全长均为1755 bp,氨基酸的同源性为98.5%~100%。遗传进化分析显示,所有分离的毒株均与所参考的中国分离株在一个分支上。其中1株属于New CPV-2b,其余7株均为New CPV-2a。在序列分析基础上,选择北京地区的1份犬粪便样品,接种F81细胞进行病毒分离。粪便样品接种F81细胞盲传5代后出现典型的病变。对该毒株进行电镜观察、免疫荧光试验以及蛋白电泳鉴定。电镜观察显示病毒粒子的外形结构为圆形或六边形,直径约25 nm,可见实心和空心病毒粒子。间接免疫荧光结果显示,接种病毒液的细胞出现特异性亮绿色荧光信号,对照细胞无荧光信号。纯化后的病毒蛋白电泳显示两条清晰的条带分别为VP1(76 ku)、VP2(64 ku)。结果表明,成功分离到1株New CPV-2a亚型毒株,并将其命名为CPV BJ-1株。 展开更多
关键词 犬细小病毒 进化分析 基因型 病毒分离鉴定
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混合核SVM财务欺诈识别 被引量:1
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作者 邵朝 林路路 周谋 《西安邮电大学学报》 2017年第2期81-83,88,共4页
通过线性组合构造混合核函数,建立一种基于混合核学习的支持向量机财务欺诈检测模型。利用蜂群算法对混合核函数参数进行寻优,获取最佳参数,并对给定的训练样本进行学习,得出最佳输入输出关系,从而对财务数据进行识别检测。实例测试结... 通过线性组合构造混合核函数,建立一种基于混合核学习的支持向量机财务欺诈检测模型。利用蜂群算法对混合核函数参数进行寻优,获取最佳参数,并对给定的训练样本进行学习,得出最佳输入输出关系,从而对财务数据进行识别检测。实例测试结果表明,该模型与单核的支持向量机模型相比,识别精度和鲁棒性都有所提高。 展开更多
关键词 混合核函数 支持向量机 蜂群算法 财务欺诈
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试论动车组轮对压装工艺项点
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作者 宋宇晗 林路路 《内燃机与配件》 2019年第2期87-88,共2页
轮对作为转向架的重要部件,不仅承载着高速行驶中的列车的全部重量,还承受着来自于轨道、车体等方面的多重作用力,受力情况相当复杂,轮对的压装质量直接关系到车辆运行的安全。本文在对轮对冷压装、注油压装、热压装工艺方法简单分析的... 轮对作为转向架的重要部件,不仅承载着高速行驶中的列车的全部重量,还承受着来自于轨道、车体等方面的多重作用力,受力情况相当复杂,轮对的压装质量直接关系到车辆运行的安全。本文在对轮对冷压装、注油压装、热压装工艺方法简单分析的基础上,根据多年工作经验,总结了一套关于动车组轮对压装的工艺项点,为动车组轮对压装作业提供技术参考。 展开更多
关键词 动车组 轮对压装 工艺项点
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