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大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
被引量：
5
1
作者
林翠红
刘光辉
+4 位作者
杨田野
赵利
王航
史常旋
孟春
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期911-916,共6页
目的建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法。方法无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜。按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片...
目的建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法。方法无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜。按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片法组、单纯消化法组和单纯压片法组,并进行对应的处理和培养,通过倒置相差显微镜观察VECs形态,免疫荧光法鉴定VECs的细胞标记物。结果消化压片法组在接种后48～72h即有VECs自血管段中迁移出,原代细胞约10～11d可达到近融合状态,子代细胞生长速度加快,5d后达到融合状态,呈典型的"铺路石"样特征。相对于其他两组,消化压片法组VECs的迁移速度快、细胞数量多。免疫学鉴定显示细胞标志物Ⅷ因子、vWF和CD31的阳性率高达99%。所培养的VECs传代培养至第10代,未见明显的细胞形态特征变化,免疫荧光鉴定至第8代,未见明显的细胞免疫特征变化。结论本研究成功建立了一种简单经济的大鼠主动脉VECs分离、纯化和培养方法。
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关键词
大鼠
主动脉
血管内皮细胞
分离
纯化
细胞培养
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职称材料
基于预孵法纯化培养小鼠原代视网膜微血管周细胞
2
作者
刘光辉
林翠红
+5 位作者
杨田野
徐朝阳
郑永征
赵利
孟春
潘铭东
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期774-778,共5页
目的建立简便的小鼠原代视网膜微血管周细胞(RMPs)分离、纯化、培养方法.方法在体视显微镜下机械分离获取小鼠视网膜,并碎化、胶原酶消化、过滤处理,收集视网膜碎片,预孵24h后用接种于含有体积分数20%胎牛血清的低糖型DMEM6孔板进行培养...
目的建立简便的小鼠原代视网膜微血管周细胞(RMPs)分离、纯化、培养方法.方法在体视显微镜下机械分离获取小鼠视网膜,并碎化、胶原酶消化、过滤处理,收集视网膜碎片,预孵24h后用接种于含有体积分数20%胎牛血清的低糖型DMEM6孔板进行培养,并采用差异消化法纯化原代RMPs.通过倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫荧光法鉴定周细胞标志物,周细胞/内皮细胞共培养系统鉴定周细胞的功能.结果经预孵的视网膜碎片再次孵育24h后,细胞开始从视网膜碎片中迁移出,逐渐增生形成大小不一的细胞集落.原代或子代细胞胞体呈不规则三角形,多个长突触,无接触性抑制.免疫荧光显示第3代细胞绝大部分α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)表达阳性,极少部分胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,vonWillebrand因子(vWF)表达阴性,RMPs纯度达97%以上.体外培养的小鼠RMPs能被血管内皮细胞所募集,共同形成微血管样条索.结论本实验成功建立了一种简便的小鼠原代RMPs分离、纯化、培养方法,所培养的小鼠原代RMPs为功能性RMPs.
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关键词
视网膜微血管周细胞
预孵
分离
纯化
培养
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职称材料
一种方便快捷的前置式拉紧装置
3
作者
李君臣
林翠红
《机械工艺师》
CSCD
北大核心
2001年第2期45-45,共1页
目前,各活塞生产厂家用普通车床对活塞实施拉紧加工时,普遍采用长拉杆从床头后部拉紧的方法加工。此种装夹、拉紧方式有如下缺点:1.装夹、拉紧分离。操作者在工作位置装夹工件时,需到床头箱左侧实施拉紧。2.当加工完毕,卸工件时仍需到...
目前,各活塞生产厂家用普通车床对活塞实施拉紧加工时,普遍采用长拉杆从床头后部拉紧的方法加工。此种装夹、拉紧方式有如下缺点:1.装夹、拉紧分离。操作者在工作位置装夹工件时,需到床头箱左侧实施拉紧。2.当加工完毕,卸工件时仍需到床头箱左侧松开螺栓才能将工件卸下。3.进行拉紧时,因是螺旋拉紧,此时工件会随主轴旋转,给拉紧带来困难。因此,生产效率低,劳动强度大等弊端。
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关键词
普通车床
车床夹具
前置式拉紧装置
原文传递
题名
大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
被引量：
5
1
作者
林翠红
刘光辉
杨田野
赵利
王航
史常旋
孟春
机构
福州大学生物科学与工程学院
福建中医药大学附属人民医院
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期911-916,共6页
基金
福建省医学创新项目(No.2015-CXB-23)
福建省自然科学基金面上项目(No.2016J01574)
国家自然科学基金面上项目(No.81774369)~~
文摘
目的建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法。方法无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜。按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片法组、单纯消化法组和单纯压片法组,并进行对应的处理和培养,通过倒置相差显微镜观察VECs形态,免疫荧光法鉴定VECs的细胞标记物。结果消化压片法组在接种后48～72h即有VECs自血管段中迁移出,原代细胞约10～11d可达到近融合状态,子代细胞生长速度加快,5d后达到融合状态,呈典型的"铺路石"样特征。相对于其他两组,消化压片法组VECs的迁移速度快、细胞数量多。免疫学鉴定显示细胞标志物Ⅷ因子、vWF和CD31的阳性率高达99%。所培养的VECs传代培养至第10代,未见明显的细胞形态特征变化,免疫荧光鉴定至第8代,未见明显的细胞免疫特征变化。结论本研究成功建立了一种简单经济的大鼠主动脉VECs分离、纯化和培养方法。
关键词
大鼠
主动脉
血管内皮细胞
分离
纯化
细胞培养
Keywords
rat
aorta
vascular endothelial cell
isolation
purification
cell cultivation
分类号
Q2-3 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
基于预孵法纯化培养小鼠原代视网膜微血管周细胞
2
作者
刘光辉
林翠红
杨田野
徐朝阳
郑永征
赵利
孟春
潘铭东
机构
福建中医药大学附属人民医院眼科
福州大学生物科学与工程学院
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期774-778,共5页
基金
国家自然科学基金项目(81774369)
福建省自然科学基金项目(2016J01574)
福建省医学创新项目(2015-CXB-23).
文摘
目的建立简便的小鼠原代视网膜微血管周细胞(RMPs)分离、纯化、培养方法.方法在体视显微镜下机械分离获取小鼠视网膜,并碎化、胶原酶消化、过滤处理,收集视网膜碎片,预孵24h后用接种于含有体积分数20%胎牛血清的低糖型DMEM6孔板进行培养,并采用差异消化法纯化原代RMPs.通过倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫荧光法鉴定周细胞标志物,周细胞/内皮细胞共培养系统鉴定周细胞的功能.结果经预孵的视网膜碎片再次孵育24h后,细胞开始从视网膜碎片中迁移出,逐渐增生形成大小不一的细胞集落.原代或子代细胞胞体呈不规则三角形,多个长突触,无接触性抑制.免疫荧光显示第3代细胞绝大部分α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)表达阳性,极少部分胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,vonWillebrand因子(vWF)表达阴性,RMPs纯度达97%以上.体外培养的小鼠RMPs能被血管内皮细胞所募集,共同形成微血管样条索.结论本实验成功建立了一种简便的小鼠原代RMPs分离、纯化、培养方法,所培养的小鼠原代RMPs为功能性RMPs.
关键词
视网膜微血管周细胞
预孵
分离
纯化
培养
Keywords
Retinal microvascular pericyte
Pre-incubation
Isolation
Purification
Cultivation
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
一种方便快捷的前置式拉紧装置
3
作者
李君臣
林翠红
机构
山东栖霞活塞厂
出处
《机械工艺师》
CSCD
北大核心
2001年第2期45-45,共1页
文摘
目前,各活塞生产厂家用普通车床对活塞实施拉紧加工时,普遍采用长拉杆从床头后部拉紧的方法加工。此种装夹、拉紧方式有如下缺点:1.装夹、拉紧分离。操作者在工作位置装夹工件时,需到床头箱左侧实施拉紧。2.当加工完毕,卸工件时仍需到床头箱左侧松开螺栓才能将工件卸下。3.进行拉紧时,因是螺旋拉紧,此时工件会随主轴旋转,给拉紧带来困难。因此,生产效率低,劳动强度大等弊端。
关键词
普通车床
车床夹具
前置式拉紧装置
分类号
TG751.1 [金属学及工艺—刀具与模具]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
林翠红
刘光辉
杨田野
赵利
王航
史常旋
孟春
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于预孵法纯化培养小鼠原代视网膜微血管周细胞
刘光辉
林翠红
杨田野
徐朝阳
郑永征
赵利
孟春
潘铭东
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
一种方便快捷的前置式拉紧装置
李君臣
林翠红
《机械工艺师》
CSCD
北大核心
2001
0
原文传递
已选择
0
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