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木薯MebZIP27基因的克隆与原核表达分析
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作者 曾力旺 张小燕 +7 位作者 林墁 杨静琳 林素妍 潘子墨 雷鑫芳 吴春来 曾坚 胡伟 《福建农业学报》 北大核心 2025年第1期1-9,共9页
【目的】碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)蛋白是真核生物中一类独特的转录因子,在植物的生长、发育和生理代谢调控中发挥着关键作用。特别是A类bZIPs通常负责调控携带ABA依赖元件的基因,进而引发ABA响应或实现环境适应。深... 【目的】碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)蛋白是真核生物中一类独特的转录因子,在植物的生长、发育和生理代谢调控中发挥着关键作用。特别是A类bZIPs通常负责调控携带ABA依赖元件的基因,进而引发ABA响应或实现环境适应。深入研究A类木薯bZIPs转录因子的功能,可进一步了解其调控ABA表达的分子机理。【方法】通过RT-PCR技术克隆MebZIP27基因,并运用生物信息学方法对其进行基因和蛋白质水平的分析。此外,通过荧光定量PCR检测MebZIP27基因的时空表达模式及其对逆境的响应,并尝试通过原核表达获得MebZIP27蛋白。【结果】MebZIP27基因位于木薯第5号染色体上,编码区全长1251 bp,具备典型的bZIP结构域特征。该基因与麻风树(Hevea brasiliensis)和橡胶树(Jatropha curcas)的A类bZIP序列一致性分别高达80.00%和85.41%,表明其属于A类bZIP亚族成员。亚细胞定位结果显示,MebZIP27基因位于细胞核。qRT-PCR分析结果表明,MebZIP27基因在木薯储藏根中表达最为显著。在甘露醇、NaCl和低温处理下,MebZIP27基因未表现出显著诱导表达,但在ABA和H2O2处理下表现出显著诱导。通过原核表达成功获得了MebZIP27基因编码的蛋白,并通过谷胱甘肽琼脂糖珠微球分离技术对GST-MebZIP27蛋白进行了纯化。【结论】木薯中的MebZIP27基因属于A类bZIP基因家族,定位于细胞核,在木薯储藏根中的表达最为显著。此外,MebZIP27基因在ABA和H2O2处理下表现出显著诱导。这些结果为深入研究MebZIP27基因在ABA信号调控中的作用提供了参考依据。 展开更多
关键词 木薯 bZIPs 非生物胁迫 原核表达
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木薯MebZIP11基因克隆与原核表达分析
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作者 雷鑫芳 潘子墨 +4 位作者 林素妍 罗佳科 吴春来 曾坚 胡伟 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期299-308,共10页
【目的】研究木薯A类碱性亮氨酸拉链11(Manihot esculenta basic leucine zipper11,MebZIP11)基因的功能,为探讨其转录因子在逆境胁迫中的作用提供依据。【方法】利用RT-PCR技术克隆木薯中的MebZIP11基因,并进行生物信息学分析。通过荧... 【目的】研究木薯A类碱性亮氨酸拉链11(Manihot esculenta basic leucine zipper11,MebZIP11)基因的功能,为探讨其转录因子在逆境胁迫中的作用提供依据。【方法】利用RT-PCR技术克隆木薯中的MebZIP11基因,并进行生物信息学分析。通过荧光定量PCR技术,分析MebZIP11基因在木薯不同组织和块根发育不同阶段中的表达模式,并评估其在多种逆境条件下的响应机制。【结果】MebZIP11基因位于木薯的第5号染色体,编码区全长1221 bp,具有典型的bZIP结构特征。序列比对显示,MebZIP11与麻风树和橡胶树的A类bZIP转录因子的序列同源性分别为80.00%和85.41%,确认其属于A类bZIP亚族。亚细胞定位试验显示,MebZIP11位于细胞核内。MebZIP11基因在储藏根的表达量最高。MebZIP11基因的表达量在甘露醇、NaCl和脱落酸处理下均显著升高,在H_(2)O_(2)和低温处理下其表达量均下降。通过原核表达系统获得了MebZIP11蛋白。【结论】木薯中的MebZIP11基因属于A类bZIP家族。MebZIP11基因在不同逆境和激素处理下表现出不同的响应程度。 展开更多
关键词 木薯 非生物胁迫 碱性亮氨酸拉链 逆境响应 原核表达
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