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丁壮素酸乳对PEDV和PRRSV体外增殖的影响
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作者 林秀娇 陈伟晨 +2 位作者 黄艺珠 郑新添 黄翠琴 《上海畜牧兽医通讯》 2024年第3期14-18,共5页
为探究丁壮素酸乳对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)体外增殖影响,本研究使用CCK-8法分别检测丁壮素酸乳对Vero细胞和Marc... 为探究丁壮素酸乳对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)体外增殖影响,本研究使用CCK-8法分别检测丁壮素酸乳对Vero细胞和Marc-145细胞的毒性,采用实时荧光定量PCR分别检测PEDV、PRRSV在不同质量浓度丁壮素酸乳作用下的基因组拷贝数。实验结果显示:100~500μg/mL丁壮素酸乳对Vero细胞和Marc-145细胞活性没有显著影响;200~300μg/mL丁壮素酸乳显著抑制PEDV增殖,100~300μg/mL丁壮素酸乳显著抑制PRRSV增殖。实验结果表明,200~300μg/mL丁壮素酸乳对PEDV和PRRSV的体外增殖具有显著的抑制作用,且无细胞毒性。 展开更多
关键词 中短链甘油脂肪酸 丁壮素 PEDV PRRSV 抗病毒 月桂酸甘油酯
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2019—2023年我国PRRSV系统发育、基因重组和多样性分析 被引量:1
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作者 李晓冰 李鸿喜 +5 位作者 方来杉 张连妹 林秀娇 唐歆 曹翀 陈洪博 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期30-40,共11页
为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行、核苷酸多样性和病毒重组情况,本试验对2019—2023年我国分离获得的154条PRRSV全基因组序列进行遗传进化、核苷酸多样性和基因重组分析。遗传进化分析结果显示,2019—2023年我国PRRSV流... 为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行、核苷酸多样性和病毒重组情况,本试验对2019—2023年我国分离获得的154条PRRSV全基因组序列进行遗传进化、核苷酸多样性和基因重组分析。遗传进化分析结果显示,2019—2023年我国PRRSV流行毒株主要是基因Ⅱ型的4个谱系,分别是谱系1(Lineage 1)、谱系3(Lineage 3)、谱系5.1(Lineage 5.1)和谱系(Lineage 8.7),也有基因I型流行毒株出现。PRRSV全基因组核苷酸多样性分析结果显示,相对其他基因,ORF1a基因存在较高遗传多样性。基因重组分析结果显示,PRRSV基因Ⅱ型的4个谱系均发生重组;我国PRRSV流行毒株重组热点基因为ORF1a和ORF1b基因,其中重组主要和次要亲本都以Lineage 1和Lineage 8.7为主。进一步分析基因Ⅱ型的不同谱系之间的重组情况,结果显示,谱系间重组频率高于谱系内重组频率,谱系内重组模式以Lineage 1为主。本试验结果提示,2019—2023年我国流行PRRSV毒株具有多样性,且基因Ⅱ型不同谱系间频发重组,表明临床上PRRSV流行情况越来越复杂,应加以重视。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV) 系统发育 遗传多样性 基因重组
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DNA条形码技术在蛇类鉴别中的应用
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作者 李晓冰 方来杉 +4 位作者 陈洪博 吴琼 尹会方 林秀娇 李焰 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期35-40,共6页
从NCBI中GenBank数据库下载蛇类细胞色素b基因(Cytb)序列7329条,以MT765098.1序列为标准进行对比和修剪,获得蛇类Cytb序列4665条。对蛇类Cytb序列进行核苷酸饱和度、遗传多样性、种内和种间遗传距离计算,构建系统发育树。结果表明,基于K... 从NCBI中GenBank数据库下载蛇类细胞色素b基因(Cytb)序列7329条,以MT765098.1序列为标准进行对比和修剪,获得蛇类Cytb序列4665条。对蛇类Cytb序列进行核苷酸饱和度、遗传多样性、种内和种间遗传距离计算,构建系统发育树。结果表明,基于Kimura–2–Parameter模型,蛇类平均种内遗传距离为3.3%,普遍小于6.7%,而平均种间遗传距离为19.96%,普遍高于9.3%,说明蛇类物种间遗传距离存在较大差异。根据蛇类物种间遗传距离,识别出蛇类23个物种的亚种,Pareas和Hydrophis属物种含有复合体,Atractus dunni、A.iridescen和A.occidentali互为姐妹物种。 展开更多
关键词 细胞色素B基因 DNA条形码 遗传距离
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重症脑卒中患者压力性损伤发生特征及影响因素分析 被引量:40
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作者 林秀娇 万琼红 胡荣 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期41-44,共4页
目的 了解重症脑卒中患者压力性损伤发生特征并分析影响因素,为临床防治提供依据.方法 回顾性选择上报的院内获得性压力性损伤重症脑卒中患者308例为病例组,以性别进行1∶1匹配,选取同期住院的308例未发生压力性损伤患者为对照组,进行... 目的 了解重症脑卒中患者压力性损伤发生特征并分析影响因素,为临床防治提供依据.方法 回顾性选择上报的院内获得性压力性损伤重症脑卒中患者308例为病例组,以性别进行1∶1匹配,选取同期住院的308例未发生压力性损伤患者为对照组,进行多因素Logistic回归分析探讨影响因素.结果 3 573例重症脑卒中患者发生压力性损伤308例,压力性损伤发生率为8.62%;压力性损伤发生部位骶尾部最多(占33.97%),分期以1期为主(占55.49%).住院时间、空腹血糖>6.1 mmol/L、留置导管、机械通气、发热、贫血、瘫痪、大小便失禁是重症脑卒中患者压力性损伤的独立危险因素,而营养支持、使用气垫床、使用预防性敷料是保护因素(P<0.05,P<0.01).结论 应针对重症脑卒中患者压力性损伤危险因素采取针对性预防措施,并加强营养,预防性使用保护器具,以降低压力性损伤的发生. 展开更多
关键词 脑卒中 压力性损伤 危险因素 部位 分期 医疗器械相关性压力性损伤 病例对照研究
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南平市延平区猪场猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体水平监测及分析 被引量:1
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作者 李晓冰 方来杉 +5 位作者 黄文华 陈洪博 尹会方 陈星星 林秀娇 范克伟 《福建畜牧兽医》 2023年第4期8-10,共3页
为了解南平市延平区规模化猪场猪瘟(Clssical Swine Fever,CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的免疫水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2019-2022年收集到的1 926份猪血清进行CSF和P... 为了解南平市延平区规模化猪场猪瘟(Clssical Swine Fever,CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的免疫水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2019-2022年收集到的1 926份猪血清进行CSF和PRRS抗体检测。结果发现2019-2022年CSF抗体阳性率总体在95%以上,相比之下,PRRS抗体阳性率存在波动,其阳性率总体也在83%以上;对春秋两季猪群CSF和PRRS抗体阳性率检测显示,CSF和PRRS抗体阳性率在春秋两季差异均不显著(P>0.05),然而2种疫病的抗体阳性率在春季普遍较高。说明猪场除了重点加强PRRS的免疫防控,也要特别注重秋季对CSF和PRRS的免疫防控来减少猪场损失。 展开更多
关键词 猪瘟 猪繁殖与呼吸综合征 抗体 监测 分析
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鹌鹑PGCs的传代培养及鉴定
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作者 李玉芳 洪志勇 +5 位作者 李明 张兴峰 林秀娇 李鸿翔 庄益芬 张文昌 《福建畜牧兽医》 2013年第3期5-8,共4页
试验采用鸡胚胎制作的成纤维细胞饲养层培养细胞,成功实现鹌鹑原始生殖细胞(PGCs)的传代培养;并通过对比试验,验证了生长因子LIF、SCF、bFGF能够显著提高PGCs存活率和抑制其分化。
关键词 鹌鹑 PGCS 传代 生长因子
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人血清白蛋白基因的克隆及其真核表达载体构建
7
作者 洪志勇 李玉芳 +4 位作者 张兴峰 林秀娇 李鸿翔 庄益芬 张文昌 《福建畜牧兽医》 2013年第5期1-5,共5页
利用RT-PCR扩增并克隆了含人血清白蛋白序列长约1.8 kb的片段,酶切鉴定并进行序列分析,测序结果与GenBank中登录的人血清白蛋白cDNA序列的同源性为97%;以鹌鹑卵清蛋白5’调控区POV来启动HAS的表达。用限制性内切酶kpnⅠ和HindⅢ双酶切质... 利用RT-PCR扩增并克隆了含人血清白蛋白序列长约1.8 kb的片段,酶切鉴定并进行序列分析,测序结果与GenBank中登录的人血清白蛋白cDNA序列的同源性为97%;以鹌鹑卵清蛋白5’调控区POV来启动HAS的表达。用限制性内切酶kpnⅠ和HindⅢ双酶切质粒pOV和pHSA,然后用T4连接酶定向连接成重组质粒pOV-pHSA,经酶切鉴定,两者成功融合。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 鹌鹑 卵管特异性表达载体
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人血清白蛋白基因在鹌鹑两种细胞上表达的研究
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作者 洪志勇 李玉芳 +5 位作者 李明 张兴峰 林秀娇 李鸿翔 庄益芬 张文昌 《福建畜牧兽医》 2013年第3期11-14,共4页
培养鹌鹑输卵管上皮细胞和鹌鹑胚胎成纤维细胞作为检测平台,将重组后的人血清白蛋白表达载体用脂质体包埋法转染以上两种细胞,通过荧光显微镜观察到报告基因绿色荧光蛋白的表达,结果表明构建的表达载体在成纤维细胞上未见表达;而原代输... 培养鹌鹑输卵管上皮细胞和鹌鹑胚胎成纤维细胞作为检测平台,将重组后的人血清白蛋白表达载体用脂质体包埋法转染以上两种细胞,通过荧光显微镜观察到报告基因绿色荧光蛋白的表达,结果表明构建的表达载体在成纤维细胞上未见表达;而原代输卵管上皮细胞上有表达。取转染细胞的基因组DNA,设计特异性的检测引物,用PCR筛选法检测了报告基因表达的阳性细胞克隆,SDS-PAGE银染色法确定鹌鹑输卵管上皮细胞分泌蛋白的分子量,结果显示在转染的鹌鹑输卵管上皮细胞培养上清中含有分子量约为68kDa的HSA。表明构建的表达载体是有效的,而且表达构件已经初步整合到阳性鹌鹑输卵管上皮细胞的染色体中。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 鹌鹑 细胞表达
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不同因素对猪卵母细胞体外成熟培养的影响 被引量:4
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作者 林筱璐 林秀娇 +7 位作者 王秀爱 刘凤军 庄益芬 张兴锋 李鸿翔 洪志勇 刘芳 张文昌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期205-209,共5页
本试验旨在探讨不同外源激素组合的添加、胰岛素—转铁蛋白—亚硒酸钠(ITS)的添加、不同培养皿、石蜡油的添加对卵母细胞体外成熟培养(IVM)的影响。结果显示:1孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素+促卵泡素(PMSG+HCG+FSH)组高于促卵... 本试验旨在探讨不同外源激素组合的添加、胰岛素—转铁蛋白—亚硒酸钠(ITS)的添加、不同培养皿、石蜡油的添加对卵母细胞体外成熟培养(IVM)的影响。结果显示:1孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素+促卵泡素(PMSG+HCG+FSH)组高于促卵泡素+促黄体素(FSH+LH)组和尿促性腺激素(hMG)组,相互之间差异显著(80.1%、68.3%、53.3%,P<0.05);2添加1%ITS到猪卵母细胞培养液中对卵母细胞成熟率无显著提高(P>0.05),但显著提高了孤雌激活后孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(63.3%、55.1%,18.7%、12.1%,P<0.05);3凹槽皿组猪卵母细胞成熟率显著高于四孔板和30mm塑料皿组(73.3%、68.0%、68.3%,P<0.05);4石蜡油的添加对卵丘细胞扩展和卵母细胞体外成熟率均有显著提高(84.8%、69.9%,P<0.05)。结果表明培养液中添加PMSG+HCG+FSH和ITS及选用凹槽皿、成熟培养液上覆石蜡油可提高猪卵母细胞IVM效果。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟培养(IVM) 培养方式 石蜡油 外源激素 胰岛素—转铁蛋白—亚硒酸钠(ITS)
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