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基于Red重组系统的阴沟肠杆菌基因重组技术 被引量:2
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作者 张忠喜 顾金杰 +3 位作者 林汉标 廖鲜艳 史吉平 郝健 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期134-140,151,共8页
目的:开发一种基于Red重组系统的E.cloacae基因重组技术。方法:将Red重组酶基因连接于表达载体形成pSC-MSC-red,将Flp重组酶基因连接于表达载体形成pSC-MSC-flp。以budA基因(编码乙酰乳酸脱羧酶)为例,构建了不同长度同源臂的抗性盒。将... 目的:开发一种基于Red重组系统的E.cloacae基因重组技术。方法:将Red重组酶基因连接于表达载体形成pSC-MSC-red,将Flp重组酶基因连接于表达载体形成pSC-MSC-flp。以budA基因(编码乙酰乳酸脱羧酶)为例,构建了不同长度同源臂的抗性盒。将这些DNA片段分别转化入携带p SC-MSC-red质粒的E.cloacae进行基因重组。结果:使用同源臂长度为39和100 bp的抗性盒不能得到重组子;同源臂长度为200 bp的抗性盒可以获得重组子E.cloacaeΔbudA-773,重组效率为6.1 CFU/μg DNA;同源臂长度为500 bp时,重组效率提高到131.5 CFU/μg DNA。将表达Flp重组酶的质粒pSC-MSC-flp转化入重组菌株中传代培养成功消除了抗性标记。对重组菌株E.cloacae ΔbudA进行发酵培养实验,菌株丧失了合成乙偶姻和2,3-丁二醇的能力,表明budA基因被成功敲除。结论:本文建立了一种适用于E.cloacae的基因重组方法。 展开更多
关键词 RED重组系统 阴沟肠杆菌 Α-乙酰乳酸脱羧酶 基因敲除
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社会化生态环境监测机构如何提升质量管理水平 被引量:3
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作者 林汉标 《皮革制作与环保科技》 2022年第22期184-185,189,共3页
在环境监测工作过程中,应全面促进质量管理工作的有效落实,各项工作应以促进质量管理水平提升为主要目的,形成严格的管理模式,保障全过程质量管理的系统性和完善性,全面优化环境监测工作成效,以促进环境监测水平的不断提升。
关键词 社会化 环境监测 质量管理 监测水平 提升措施
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生态环境监测LIMS管理系统开发的思考 被引量:2
3
作者 林汉标 《皮革制作与环保科技》 2022年第23期37-39,共3页
本文对生态环境监测LIMS管理系统应用存在的常见问题进行分析,结合其发展和所处阶段,从系统设计单元选定和系统前瞻性进行论述,为系统开发设计提供参考,以构建高效率、高水平、多维度的生态环境监测LIMS管理体系。
关键词 生态环境监测 LIMS 设计单元 前瞻性 监测指标
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