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茂源链霉菌L-谷氨酸氧化酶的异源表达以及诱导条件优化
1
作者
林怡颖
刘凯文
+5 位作者
马小倩
连惠勇
李莹
王芳
张泽生
刘清岱
《中国食品添加剂》
CAS
北大核心
2023年第4期52-59,共8页
L-谷氨酸氧化酶(L-glutamate oxidase,LGOX)能够专一性氧化L-谷氨酸生成α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG),在食品领域以及临床生化检验中具有重要的价值。为了提高LGOX的活性,本文结合生物信息学方法和显色法,筛选得到一种新型...
L-谷氨酸氧化酶(L-glutamate oxidase,LGOX)能够专一性氧化L-谷氨酸生成α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG),在食品领域以及临床生化检验中具有重要的价值。为了提高LGOX的活性,本文结合生物信息学方法和显色法,筛选得到一种新型的含有LGOX基因的茂源链霉菌株(Streptomyces mobaraensis CGMCC 4.1719),以其基因组序列为模板,通过PCR技术扩增LGOX基因,与pET21b质粒连接,构建表达载体pET21b-SmLGOX,化转至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并对诱导条件加以优选。通过电泳分析结果可知,SmLGOX基因在大肠杆菌中成功表达。确定了最佳诱导条件为:IPTG终浓度0.4 mmol/L,30℃下诱导6 h。纯化后在不同pH条件下测定酶活,该重组菌最适pH为6.0,且在pH=4.0~6.0时相对酶活保持在80%以上,稳定性好,适于LGOX的工业化应用。
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关键词
茂源链霉菌
L-谷氨酸氧化酶
诱导表达
条件优化
酶活性
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职称材料
巧借转化,妙解问题——“面积”题目一组
2
作者
陈博文
林怡颖
《教育视界》
2023年第35期76-78,共3页
转化思想是将未知的、陌生的、复杂的问题通过演绎、变换、分解、整合、表征、化简等,转化为已知的、熟悉的、简单的问题,使问题能够顺利解决的一种数学思想。转化思想的教学常渗透在“图形与几何”领域内容的教学中,但相关题目往往比...
转化思想是将未知的、陌生的、复杂的问题通过演绎、变换、分解、整合、表征、化简等,转化为已知的、熟悉的、简单的问题,使问题能够顺利解决的一种数学思想。转化思想的教学常渗透在“图形与几何”领域内容的教学中,但相关题目往往比较简单,对转化思想的运用浮于表面,导致学生对转化思想的理解不够深入。基于此,笔者设计了一组有关“面积”的题目,引导学生巧借转化方法解决数学与生活中的实际问题,积累图形与几何的学习经验,感受转化思想的巧妙,为其日后运用转化思想打好基础。
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关键词
图形与几何
数学与生活
转化思想
巧借
妙解
化简
题目
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职称材料
题名
茂源链霉菌L-谷氨酸氧化酶的异源表达以及诱导条件优化
1
作者
林怡颖
刘凯文
马小倩
连惠勇
李莹
王芳
张泽生
刘清岱
机构
天津科技大学食品科学与工程学院
海南热带海洋学院食品科学与工程学院
出处
《中国食品添加剂》
CAS
北大核心
2023年第4期52-59,共8页
基金
国家自然科学基金(51967006)。
文摘
L-谷氨酸氧化酶(L-glutamate oxidase,LGOX)能够专一性氧化L-谷氨酸生成α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG),在食品领域以及临床生化检验中具有重要的价值。为了提高LGOX的活性,本文结合生物信息学方法和显色法,筛选得到一种新型的含有LGOX基因的茂源链霉菌株(Streptomyces mobaraensis CGMCC 4.1719),以其基因组序列为模板,通过PCR技术扩增LGOX基因,与pET21b质粒连接,构建表达载体pET21b-SmLGOX,化转至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并对诱导条件加以优选。通过电泳分析结果可知,SmLGOX基因在大肠杆菌中成功表达。确定了最佳诱导条件为:IPTG终浓度0.4 mmol/L,30℃下诱导6 h。纯化后在不同pH条件下测定酶活,该重组菌最适pH为6.0,且在pH=4.0~6.0时相对酶活保持在80%以上,稳定性好,适于LGOX的工业化应用。
关键词
茂源链霉菌
L-谷氨酸氧化酶
诱导表达
条件优化
酶活性
Keywords
Streptomyces mobaraensis
L-glutamate oxidase
induced expression
conditions optimization
enzymatic activity
分类号
TS202.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
巧借转化,妙解问题——“面积”题目一组
2
作者
陈博文
林怡颖
机构
江苏省南京市五老村小学
南京师范大学附属中学仙林学校小学部
出处
《教育视界》
2023年第35期76-78,共3页
基金
南京市教育科学“十四五”规划2021年度教师教育综合改革研究专项课题“知行合一:小学生数学实践智慧的培育研究”(编号:LJG202109)的阶段性研究成果。
文摘
转化思想是将未知的、陌生的、复杂的问题通过演绎、变换、分解、整合、表征、化简等,转化为已知的、熟悉的、简单的问题,使问题能够顺利解决的一种数学思想。转化思想的教学常渗透在“图形与几何”领域内容的教学中,但相关题目往往比较简单,对转化思想的运用浮于表面,导致学生对转化思想的理解不够深入。基于此,笔者设计了一组有关“面积”的题目,引导学生巧借转化方法解决数学与生活中的实际问题,积累图形与几何的学习经验,感受转化思想的巧妙,为其日后运用转化思想打好基础。
关键词
图形与几何
数学与生活
转化思想
巧借
妙解
化简
题目
分类号
G623.5 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
茂源链霉菌L-谷氨酸氧化酶的异源表达以及诱导条件优化
林怡颖
刘凯文
马小倩
连惠勇
李莹
王芳
张泽生
刘清岱
《中国食品添加剂》
CAS
北大核心
2023
0
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职称材料
2
巧借转化,妙解问题——“面积”题目一组
陈博文
林怡颖
《教育视界》
2023
0
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职称材料
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