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miR-215-5p在肾透明细胞癌中的表达及其对786-O细胞功能的影响
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作者 赵月 林志弟 +1 位作者 王洁 杨小丽 《山西医科大学学报》 2025年第4期363-368,共6页
目的探讨miR-215-5p在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其对786-O细胞功能的影响。方法利用TCGA数据库分析miR-215-5p在ccRCC中的表达模式。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测293T、786-O、ACHN细胞中miR215-5p的表达水平。将786-... 目的探讨miR-215-5p在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其对786-O细胞功能的影响。方法利用TCGA数据库分析miR-215-5p在ccRCC中的表达模式。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测293T、786-O、ACHN细胞中miR215-5p的表达水平。将786-O细胞分为inhibitor NC组和miR-215-5p inhibitor组,运用瞬时转染技术进行转染,RT-qPCR检测miR-215-5p的转染效率。通过细胞划痕检测细胞迁移能力,Transwell检测细胞侵袭能力,CCK-8测定细胞增殖能力,Western blot测定上皮细胞间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。结果TCGA数据库显示miR-215-5p在ccRCC组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05),且在男性高于女性(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,miR-215-5p在ccRCC细胞中的表达高于正常肾细胞(P<0.05)。与inhibitor NC组相比,miR-215-5 p inhibitor组细胞迁移、增殖、侵袭能力减弱(P<0.01),Vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-215-5p在肾癌细胞中呈高表达,且miR-215-5p敲低抑制肾癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT过程,为ccRCC的治疗提供了新的潜在靶点。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 miR-215-5p 786-O细胞 功能实验 侵袭 迁移 增殖 EMT
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高表达重组人组织激肽释放酶7基因的前列腺癌单克隆细胞株的构建
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作者 林志弟 莫林键 +5 位作者 张成东 宣强 张悦宁 莫曾南 滕若冰 杨小丽 《山东医药》 CAS 2014年第10期1-3,共3页
目的建立稳定高表达重组人组织激肽释放酶7基因(KLK7)的前列腺癌细胞株DU145,为前列腺癌发生机制的研究奠定基础。方法 PCR法扩增KLK7 cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1上;经过限制性内切酶酶切、DNA测序验证正确后,以脂质体法转染人... 目的建立稳定高表达重组人组织激肽释放酶7基因(KLK7)的前列腺癌细胞株DU145,为前列腺癌发生机制的研究奠定基础。方法 PCR法扩增KLK7 cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1上;经过限制性内切酶酶切、DNA测序验证正确后,以脂质体法转染人前列腺癌DU145细胞;通过G418筛选,每个单克隆细胞扩大培养,建立稳定转染KLK7的DU145单克隆细胞株。采用Western blot法检测DU145细胞株KLK7表达。结果酶切鉴定及DNA测序分析显示pcDNA3.1-KLK7真核表达载体成功构建;转染后,成功获得稳定高表达KLK7的DU145单克隆细胞株。Western blot结果显示,pcDNA3.1-KLK7转染的DU145细胞KLK7表达量明显高于转染空载体组细胞(P<0.01)。结论 pcDNA3.1-KLK7真核表达载体的建立及稳定高表达KLK7的前列腺癌单克隆细胞株的建立,为研究KLK7在前列腺癌发生发展中的作用提供了条件。 展开更多
关键词 重组人组织激肽释放酶基因7 前列腺癌 稳定细胞株 真核表达载体
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