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布罗索尤单抗治疗X连锁低磷性佝偻病临床分析
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作者 杨帆 李娟 +7 位作者 张网林 常国营 李辛 李芸芸 佘佳笑 林卡娜 李浩 王秀敏 《临床儿科杂志》 北大核心 2025年第2期105-111,119,共8页
目的 总结布罗索尤单抗治疗X连锁低磷性佝偻病(XLH)的疗效和安全性。方法回顾性分析2022年8月于内分泌代谢科住院,采用布罗索尤单抗治疗因PHEX基因变异导致XLH的1例患儿的临床资料,并进行相关文献复习。结果患儿,男,5岁11月龄,因“双下... 目的 总结布罗索尤单抗治疗X连锁低磷性佝偻病(XLH)的疗效和安全性。方法回顾性分析2022年8月于内分泌代谢科住院,采用布罗索尤单抗治疗因PHEX基因变异导致XLH的1例患儿的临床资料,并进行相关文献复习。结果患儿,男,5岁11月龄,因“双下肢畸形3年,伴骨痛2个月”就诊。入院时血磷值0.82 mmol/L,骨骼X线检查示长骨干骺端杯口状、毛刷样改变,诸骨改变符合佝偻病表现。患儿母亲存在身材矮小、双下肢畸形伴骨痛症状。基因检测发现患儿PHEX基因变异(c.1282C>T,p.Gln428*,来源于母亲)。予以布罗索尤单抗治疗后,患儿血磷值较用药前升高,碱性磷酸酶及甲状旁腺激素水平降低,生长速率较前增快,骨痛好转,活动耐量提高,骨骼畸形程度较前明显好转,且未发生药物相关不良反应。结论布罗索尤单抗用于治疗因PHEX基因变异导致XLH的患儿,可改善多项指标且安全性良好。 展开更多
关键词 布罗索尤单抗 X连锁低磷性佝偻病 PHEX基因 低磷血症 儿童
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葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤的保护作用 被引量:3
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作者 林卡娜 林美丽 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期24-29,共6页
目的:探讨体外葡萄籽原花青素对氯化钴致视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤模型的保护作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察葡萄籽原花青素(40μg/mL )对缺氧的抗损伤作用。以MTT法检测细胞存活率... 目的:探讨体外葡萄籽原花青素对氯化钴致视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤模型的保护作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察葡萄籽原花青素(40μg/mL )对缺氧的抗损伤作用。以MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342荧光染色法观察细胞凋亡情况;以H2 DCFDA荧光法检测细胞内活性氧的变化;实时定量PCR检测细胞Bcl-2、半胱酰胺天冬氨酸蛋白酶( caspase )9和caspase 3 mRNA水平。结果:与缺氧对照组比较,葡萄籽原花青素预处理可提高细胞存活率( P<0.001)、减少细胞凋亡( P<0.001) ,并减少细胞内的活性氧( P <0.001);葡萄籽原花青素还显著升高 Bcl-2基因的表达( P <0.001) ,显著降低caspase 9和caspase 3基因的表达( P<0.001)。结论:葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节RGC-5细胞缺氧损伤起保护作用,其保护作用可能与细胞内活性氧减少、Bcl-2基因表达上调及casepase 9和casepase 3基因表达下调有关。 展开更多
关键词 葡萄/化学 原花青素类/药理学 钴/药理学 视网膜神经节细胞/药物作用 缺氧/治疗
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大鼠GPR17基因真核表达载体的构建及其功能鉴定 被引量:1
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作者 林卡娜 方三华 +4 位作者 蔡蓓蕾 王欣欣 卢韵碧 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期584-590,共7页
目的:构建大鼠GPR17(rGPR17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并对其功能进行初步研究。方法:从大鼠脑组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增rGPR17 cDNA,与载体pcDNA3.1(+)连接,并转化到大肠杆菌DH5α以获得重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,... 目的:构建大鼠GPR17(rGPR17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并对其功能进行初步研究。方法:从大鼠脑组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增rGPR17 cDNA,与载体pcDNA3.1(+)连接,并转化到大肠杆菌DH5α以获得重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,以PCR、双酶切和测序鉴定;将重组载体pcDNA3.1(+)-rGPR17通过脂质体转染方法,转染HEK293细胞,RT-PCR、免疫荧光法检测rGPR17的表达,Fluo-4测定激动剂LTD4处理后细胞内钙变化。结果:RT-PCR、双酶切和测序证明,重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17构建成功,并在HEK293细胞获得表达,加入外源性激动剂LTD4可诱导细胞内钙的增加。结论:成功构建了rGPR17的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rGPR17,并在HEK293细胞功能性表达,为GPR17受体及其拮抗剂的研究提供了基础。 展开更多
关键词 半胱氨酸/遗传 受体 白三烯/遗传 遗传载体 GPR17 真核表达载体 HEK293细胞 细胞内钙
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稳定转染hCysLT_2受体的HEK293细胞株的构建及其受体拮抗剂的初筛 被引量:1
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作者 林卡娜 王欣欣 +5 位作者 黄雪琴 蔡蓓蕾 方三华 卢韵碧 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期123-130,共8页
目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCys... 目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCysLT2基因的表达。稳定表达hCysLT2受体的HEK293细胞株,以激动剂LTD4诱导细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)增高为指标,初步筛选有拮抗作用的化合物。结果:转染后的HEK293细胞中挑选12个单克隆细胞株,11株高表达hCysLT2受体。阳性刺激物ATP为50μmol/L及LTD4 100 nmol/L能升高[Ca2+]i。AP-2100984抑制LTD4诱导的hCysLT2-HEK293细胞[Ca2+]i升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。新合成化合物DXW2、DXW3、DXW4、DXW5、DXW9、DXW25、DXW26、DXW29、DXW35在1μmol/L能显著抑制LTD4引起的[Ca2+]i升高,其中DXW4和DXW5的IC50分别为0.25μmol/L和7.5μmol/L。结论:成功构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并可用于有拮抗活性化合物的筛选。 展开更多
关键词 半胱氨酸 半胱氨酰白三烯 受体 白三烯 白三烯拮抗剂 HEK293细胞 细胞内钙
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G蛋白偶联受体17在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用
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作者 林卡娜 林美丽 +2 位作者 顾莹芬 张顺国 黄诗颖 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期487-492,共6页
目的:探讨G蛋白偶联受体17(GPR17)在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察GPR17的表达及GPR17配体的作用,并通过小干扰RNA(siRNA)降低GPR17的表达深入研究GPR17在细胞缺氧损... 目的:探讨G蛋白偶联受体17(GPR17)在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察GPR17的表达及GPR17配体的作用,并通过小干扰RNA(siRNA)降低GPR17的表达深入研究GPR17在细胞缺氧损伤中的作用。MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率; RT-PCR法检测GPR17 mRNA相对表达量。结果:氯化钴处理后,细胞中GPR17 mRNA相对表达量由0.26±0.08上调至0.36±0.05(P<0.01)。与未经GPR17配体预处理的缺氧细胞比较,GPR17激动剂尿苷5'-二磷酸二钠盐、尿苷5'-二磷酸葡萄糖二钠盐、LTD4预处理细胞的存活率分别降低了29.6%、31.8%、33.9%(均P<0.01);而其拮抗剂坎格雷洛预处理细胞的存活率升高了33.2%(P<0.01)。GPR17 siRNA处理可以抑制缺氧导致的GPR17 mRNA表达上调(P<0.01),减少缺氧导致的细胞凋亡[未加siRNA、NC siRNA和GPR17siRNA组细胞的凋亡率分别为(39.73±2.06)%,(42.50±3.64)%和(24.98±2.16)%,P<0.01]。结论:GPR17介导了RGC-5细胞的缺氧损伤,抑制GPR17表达可减轻缺氧损伤。 展开更多
关键词 受体 G-蛋白偶联/拮抗剂和抑制剂 钴/药理学 视网膜神经节细胞/药物作用 细胞系 缺氧/药物疗法 细胞凋亡 细胞 培养的
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