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一株乳源松鼠葡萄球菌ExhC基因的克隆及序列分析被引量：1: 1; 作者林俊泓王让 +4 位作者陈玉娟赵瑶马鲜平谢远兵易华山《中国奶牛》 2021年第3期24-29,共6页; 松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri,S.sciuri)是引起奶牛乳房炎(Cow Mastitis)的病原菌之一,其主要致病因子是该菌产生的脱皮毒素C(Exfoliative Toxin C,ExhC)。为了深入了解该基因的分子特征,本试验对从乳房炎患牛牛乳中分离的一株... 展开更多; 关键词松鼠葡萄球菌 ExhC基因核酸及蛋白质序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒NS4基因原核表达载体的构建与表达被引量：1: 2; 作者马骥朱文青 +2 位作者林俊泓易华山胡庭俊《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1168-1173,共6页; 蓝舌病病毒(Bluetounge virus,BTV)非结构蛋白4(Non-structural protein4,NS4)拮抗干扰素的产生,在BTV逃避宿主天然免疫的过程中发挥重要作用。利用PCR扩增得到NS4基因,与空载体pET-32a双酶切后连接,构建pET-32a-NS4原核表达载体;将pET-... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒 NS4基因载体构建原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

脱皮毒素C结构及致病机理研究进展: 3; 作者林俊泓王让易华山《中兽医医药杂志》 CAS 2021年第2期48-51,F0002,共5页; 脱皮毒素C(exfoliative toxin C,ExhC)是存在于猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus,S.hyicus)和松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri,S.sciuri)中的一种外毒素,能引发猪渗透性皮炎(exudative epidermitis,EE)。综述ExhC的发现、结构及其... 展开更多; 关键词 ExhC 猪葡萄球菌松鼠葡萄球菌致病机理; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒NS4重组蛋白的纯化及多克隆抗体的制备: 4; 作者马骥李芳 +3 位作者林俊泓刁洋娟易华山胡庭俊《云南畜牧兽医》 2022年第5期12-15,共4页; 蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)非结构蛋白4(Non-structural protein 4,NS4)拮抗宿主天然免疫。为研究BTV NS4蛋白的功能及基于BTV NS4的检测方法,本研究采用pET-32a-NS4在37℃,0.8 mmol/L IPTG,诱导6 h,超声破碎裂解菌体后纯化融合... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒 NS4蛋白原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株乳源松鼠葡萄球菌ExhC基因的克隆及序列分析被引量：1: 1; 作者林俊泓王让陈玉娟赵瑶马鲜平谢远兵易华山; 机构西南大学动物医学院重庆市永川区动物疫病预防控制中心; 出处《中国奶牛》 2021年第3期24-29,共6页; 基金国家重点研发计划项目(2018YFD0501705) 重庆市基础研究与前沿探索专项项目基金(cstc2018jcyjAX0615) +1 种基金 XDJK2018C059)。; 文摘松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri,S.sciuri)是引起奶牛乳房炎(Cow Mastitis)的病原菌之一,其主要致病因子是该菌产生的脱皮毒素C(Exfoliative Toxin C,ExhC)。为了深入了解该基因的分子特征,本试验对从乳房炎患牛牛乳中分离的一株松鼠葡萄球菌ExhC基因(Genbank登录号:MT845354)进行了克隆及序列分析。按GenBank收录的ExhC基因设计并合成引物,利用PCR对ExhC基因进行扩增,并对扩增后的ExhC基因进行测序及分析。结果表明,松鼠葡萄球菌ExhC基因的开放阅读框序列长度为837bp,共编码278个氨基酸。通过Blast模块对ExhC基因进行同源性分析,得到5株相似序列,与ExhC基因序列相比同源性均为99.04%。系统进化树图指示该基因与其余五株相似序列属于不同的分支,遗传距离较远。利用TMHMM对松鼠葡萄球菌ExhC基因837bp序列跨膜区进行预测,结果显示ExhC蛋白的第1~277位氨基酸在细胞膜外,5~25位氨基酸所在位置为跨膜区。通过ExhC氨基酸序列分析和ExhC蛋白二级结构、三级结构预测,推断第97位氨基酸插入Asn以及其他位点氨基酸的突变可能会导致松鼠葡萄球菌功能区变化和毒株毒力的相对变化,这将给松鼠葡萄球菌致病机理的研究奠定基础。; 关键词松鼠葡萄球菌 ExhC基因核酸及蛋白质序列分析; Keywords Staphylococcus sciuri ExhCgene Sequence analysis of nucleic acids and proteins; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒NS4基因原核表达载体的构建与表达被引量：1: 2; 作者马骥朱文青林俊泓易华山胡庭俊; 机构广西大学动物科学技术学院西南大学动物医学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1168-1173,共6页; 基金重庆市基础研究与前沿探索专项(cstc2018jcyjAX0615)。; 文摘蓝舌病病毒(Bluetounge virus,BTV)非结构蛋白4(Non-structural protein4,NS4)拮抗干扰素的产生,在BTV逃避宿主天然免疫的过程中发挥重要作用。利用PCR扩增得到NS4基因,与空载体pET-32a双酶切后连接,构建pET-32a-NS4原核表达载体;将pET-32a-NS4转化至E.coli BL21感受态细胞,以IPTG诱导表达;利用SDS-PAGE确定IPTG的最佳诱导浓度、时间与重组蛋白的表达形式;利用Western blot分析重组蛋白的表达情况。结果表明,成功构建pET-32a-NS4原核表达载体;IPTG最佳诱导浓度为0.8mmol/L,时间为6h,蛋白主要以包涵体形式表达;Western blot在27ku处可见目的条带,与预期相符。本研究成功构建pET-32a-NS4原核表达载体,实现NS4蛋白的大量、高效表达,为进一步探究NS4蛋白在BTV拮抗宿主天然免疫中的作用机制提供材料。; 关键词蓝舌病病毒 NS4基因载体构建原核表达; Keywords Bluetounge virus NS4 gene Vector construction Prokaryotic expression; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脱皮毒素C结构及致病机理研究进展: 3; 作者林俊泓王让易华山; 机构西南大学动物医学院; 出处《中兽医医药杂志》 CAS 2021年第2期48-51,F0002,共5页; 基金国家重点研发计划项目(2018YFD0501705) 重庆市基础研究与前沿探索专项项目基金(cstc2018jcyjAX0615) 中央高校基本科研业务专项基金(XDJK2018C060,XDJK2018C059)资助。; 文摘脱皮毒素C(exfoliative toxin C,ExhC)是存在于猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus,S.hyicus)和松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri,S.sciuri)中的一种外毒素,能引发猪渗透性皮炎(exudative epidermitis,EE)。综述ExhC的发现、结构及其致病机理的研究进展,对防治ExhC毒素及其病原菌引起的人畜相关疾病具有指导意义。; 关键词 ExhC 猪葡萄球菌松鼠葡萄球菌致病机理; Keywords Staphylococcus hyicus Staphylococcus sciuri pathogenesis; 分类号 S855.1 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒NS4重组蛋白的纯化及多克隆抗体的制备: 4; 作者马骥李芳林俊泓刁洋娟易华山胡庭俊; 机构广西大学动物科学技术学院重庆市大足区动物疫病预防控制中心重庆纳比微特检测技术服务有限公司西南大学动物医学院; 出处《云南畜牧兽医》 2022年第5期12-15,共4页; 基金重庆市基础研究与前沿探索专项项目基金(cstc2018jcyjAX0615)。; 文摘蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)非结构蛋白4(Non-structural protein 4,NS4)拮抗宿主天然免疫。为研究BTV NS4蛋白的功能及基于BTV NS4的检测方法,本研究采用pET-32a-NS4在37℃,0.8 mmol/L IPTG,诱导6 h,超声破碎裂解菌体后纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。经Ni柱亲和纯化后获得大小约27 kD的蛋白,获得的NS4抗体效价在1∶512000以上;纯化后的抗体浓度为1.0 mg/mL,体积为12 mL,抗体纯度大于85%,纯化抗体得率达到8.0 mg以上;Western blot分析可知纯化NS4蛋白多克隆抗体与pET-32a-NS4重组蛋白能产生特异性反应。本研究对BTV NS4重组蛋白进行表达纯化,并成功制备BTV NS4多克隆抗体,为BTV NS4的功能研究及临床应用奠定了基础。; 关键词蓝舌病病毒 NS4蛋白原核表达多克隆抗体; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	一株乳源松鼠葡萄球菌ExhC基因的克隆及序列分析	林俊泓王让陈玉娟赵瑶马鲜平谢远兵易华山	《中国奶牛》	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蓝舌病病毒NS4基因原核表达载体的构建与表达	马骥朱文青林俊泓易华山胡庭俊	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	脱皮毒素C结构及致病机理研究进展	林俊泓王让易华山	《中兽医医药杂志》 CAS	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蓝舌病病毒NS4重组蛋白的纯化及多克隆抗体的制备	马骥李芳林俊泓刁洋娟易华山胡庭俊	《云南畜牧兽医》	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料