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题名基于土壤宏基因组的聚磷酸激酶的筛选与鉴定
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作者
章素平
高森浩
李王馨月
张锦豪
杨诗韵
尤忠毓
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机构
嘉兴南湖学院新材料工程学院
嘉兴大学生物与化学工程学院
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期254-261,共8页
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基金
嘉兴市科技计划项目(2021AD10016)
嘉兴南湖学院2022年度校级科研项目
2022—2023年嘉兴南湖学院教师企业实践工程。
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文摘
聚磷酸激酶(polyphosphate kinase,PPK)是一类磷酸基团转移酶,能催化磷酸基团在ATP与多聚磷酸之间的转移反应,可用于生物催化过程中的ATP再生,基于PPK的ATP再生系统已成为生物催化领域的研究热点之一。该研究旨在利用序列驱动的宏基因组技术,从土壤宏基因组中挖掘新型的PPK基因。根据文献报道的PPK氨基酸序列保守区域,设计简并引物,以土壤宏基因组DNA为模板进行PCR扩增,筛选到一条来源于Serratia marcescens的PPK编码基因,该基因包含一个2064 bp的开放阅读框,编码一个由687个氨基酸组成的蛋白(SmPPK)。多重序列比对发现SmPPK与Escherichia coli来源的PPK具有较高的序列一致性(87.9%)。系统发育树分析表明,SmPPK与Serratia nevei、Gibbsiella quercinecans等来源的PPK在同一分支上,同属于PPK1家族。同源建模结果显示,SmPPK由4个结构域组成典型的L型空间结构,其活性中心主要由His433、Asp468、His590和Glu621组成。将SmPPK基因与pET 28a连接后转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳显示在80 kDa处存在明显的蛋白表达条带,与理论分子质量一致。酶活性检测显示,SmPPK可以在多聚磷酸钠的存在下,实现ATP的合成,其最高产率为46.5%。利用SmPPK构建ATP再生系统与灵菌红素缩合酶PigC耦合,成功实现灵菌红素类似物的合成。该研究的开展为ATP依赖的生物催化过程提供了构建ATP再生系统的新酶源。
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关键词
聚磷酸激酶
宏基因组
序列筛选
重组表达
ATP再生
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Keywords
polyphosphate kinase
metagenomics
sequence-based screening
recombinant expression
ATP regeneration
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分类号
S154.2
[农业科学—土壤学]
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题名组织学习影响科技型企业连续并购决策的实证分析
被引量：6
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作者
于鸿鹰
何青松
何宗明
杨诗韵
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机构
威海经济技术开发区皇冠办事处
哈尔滨工业大学(威海)经济管理学院
吉林财经大学金融学院
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出处
《科技进步与对策》
CSSCI
北大核心
2018年第11期103-108,共6页
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基金
山东省社会科学规划研究项目(16CJJJ29)
教育部人文社会科学研究项目(12YJA790044)
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文摘
并购是科技型企业的重要成长方式,并购中的组织学习对科技型企业提高并购绩效至关重要。利用生存回归方法,分析科技型企业并购经验惯例和并购绩效反馈对连续并购决策的影响,探究并购中组织学习机制。研究结果显示,并购次数多、并购绩效反馈好,则企业作出连续并购决策的概率大,好的并购绩效反馈会强化并购次数对连续并购决策的影响。
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关键词
科技型企业
组织学习
连续并购决策
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Keywords
Science and Technology Enterprises；Organizational Learning；Decision-making of Serial M＆A
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分类号
F271.4
[经济管理—企业管理]
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