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黑曲霉原生质体诱变选育果胶酶高产菌株
被引量：
9
1
作者
陈林
王明兹
+5 位作者
柯崇榕
高媛媛
庄秀红
杨章萍
牛俊巍
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第5期27-30,共4页
通过UV和NTG诱变筛选获得了2株高产果胶酶突变株。以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为诱变材料,采用1.5%的溶壁酶和1.5%的纤维素酶处理其对数生长期菌丝体2 h获得高质量的原生质体。采用UV25S或50μg/mL NTG诱变30 min,构建原生质体突变库,经...
通过UV和NTG诱变筛选获得了2株高产果胶酶突变株。以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为诱变材料,采用1.5%的溶壁酶和1.5%的纤维素酶处理其对数生长期菌丝体2 h获得高质量的原生质体。采用UV25S或50μg/mL NTG诱变30 min,构建原生质体突变库,经刚果红果胶平板筛选获得果胶酶突变株,通过液体深层培养复筛获得高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5,酶活力分别从46 598.08、46 598.08 U/mL提高至68 596.57、68 879.56 U/mL,分别提高了47.21%、47.82%。连续8次传代经发酵测酶活力表明高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5具有较高的遗传稳定性。
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关键词
黑曲霉
果胶酶
原生质体
UV诱变
NTG诱变
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职称材料
里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质
被引量：
5
2
作者
蔡少丽
杨章萍
黄建忠
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期113-118,共6页
摘要采用冻干浓缩，硫酸铵盐析，SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析，HiTrapDesalting凝胶柱脱盐，HiTrap’TM SP（HP）离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化，获得两个纯化的木聚糖酶组分，分别命名为XylanaseA和Xyla...
摘要采用冻干浓缩，硫酸铵盐析，SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析，HiTrapDesalting凝胶柱脱盐，HiTrap’TM SP（HP）离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化，获得两个纯化的木聚糖酶组分，分别命名为XylanaseA和XylanaseB。纯化倍数分别为3．58和3．29，回收率分别为7．02％和28．29％。SDS—PAGE结果均为单一条带，分子质量分别为29．6ku和20．9ku。酶学性质研究结果表明：XylanaseA和XylanaseB的最适反应温度分别为55℃和60℃；温度低于50℃，两种酶的稳定性都很好；最适pH一样，都为5．0；pH稳定范围也一样，都为3．5～7．0；Mn2＋、Tris对XylanaseA有激活作用，Fe2＋、Cu2＋、SDS则对该酶有抑制作用；Mn2＋对XylanaseB有激活作用，Zn2＋、Ca2＋、Fe2＋、Cu2＋、Ba2＋、Mg2＋及SDS则对该酶有抑制作用。
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关键词
里氏木霉
木聚糖酶
分离纯化
酶学性质
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职称材料
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
被引量：
2
3
作者
林国滟
蔡少丽
+6 位作者
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第6期88-91,共4页
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastor...
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
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关键词
特异腐质霉
中性外切葡聚糖酶
毕赤酵母
异源表达
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职称材料
题名
黑曲霉原生质体诱变选育果胶酶高产菌株
被引量：
9
1
作者
陈林
王明兹
柯崇榕
高媛媛
庄秀红
杨章萍
牛俊巍
黄建忠
机构
福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第5期27-30,共4页
基金
福建省教育厅项目(JB10015)
福建省发改委产业化项目(闽发改投资[2009]958号)
文摘
通过UV和NTG诱变筛选获得了2株高产果胶酶突变株。以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为诱变材料,采用1.5%的溶壁酶和1.5%的纤维素酶处理其对数生长期菌丝体2 h获得高质量的原生质体。采用UV25S或50μg/mL NTG诱变30 min,构建原生质体突变库,经刚果红果胶平板筛选获得果胶酶突变株,通过液体深层培养复筛获得高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5,酶活力分别从46 598.08、46 598.08 U/mL提高至68 596.57、68 879.56 U/mL,分别提高了47.21%、47.82%。连续8次传代经发酵测酶活力表明高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5具有较高的遗传稳定性。
关键词
黑曲霉
果胶酶
原生质体
UV诱变
NTG诱变
Keywords
Aspergillus niger
pectinase
protoplast
UV mutation
NTG mutation
分类号
Q939.9 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质
被引量：
5
2
作者
蔡少丽
杨章萍
黄建忠
机构
福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心
福建师范大学生命科学学院
福建省现代发酵技术工程研究中心
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期113-118,共6页
基金
福建省发改委产业化项目(闽发改投资[2009]958号)
文摘
摘要采用冻干浓缩，硫酸铵盐析，SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析，HiTrapDesalting凝胶柱脱盐，HiTrap’TM SP（HP）离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化，获得两个纯化的木聚糖酶组分，分别命名为XylanaseA和XylanaseB。纯化倍数分别为3．58和3．29，回收率分别为7．02％和28．29％。SDS—PAGE结果均为单一条带，分子质量分别为29．6ku和20．9ku。酶学性质研究结果表明：XylanaseA和XylanaseB的最适反应温度分别为55℃和60℃；温度低于50℃，两种酶的稳定性都很好；最适pH一样，都为5．0；pH稳定范围也一样，都为3．5～7．0；Mn2＋、Tris对XylanaseA有激活作用，Fe2＋、Cu2＋、SDS则对该酶有抑制作用；Mn2＋对XylanaseB有激活作用，Zn2＋、Ca2＋、Fe2＋、Cu2＋、Ba2＋、Mg2＋及SDS则对该酶有抑制作用。
关键词
里氏木霉
木聚糖酶
分离纯化
酶学性质
Keywords
Trichoderma reesei, xylanase, purification, enzymatic properties
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
被引量：
2
3
作者
林国滟
蔡少丽
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
机构
福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第6期88-91,共4页
基金
福建省发改委产业化关键技术项目(闽发改投资[2009]958号)
文摘
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
关键词
特异腐质霉
中性外切葡聚糖酶
毕赤酵母
异源表达
Keywords
Humicola insolens
neutral cellobiohydrolase
Pichia pastoris
exogenous expression
分类号
Q939.97 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
黑曲霉原生质体诱变选育果胶酶高产菌株
陈林
王明兹
柯崇榕
高媛媛
庄秀红
杨章萍
牛俊巍
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011
9
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职称材料
2
里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质
蔡少丽
杨章萍
黄建忠
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
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职称材料
3
中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达
林国滟
蔡少丽
黄平
郑海英
柯崇榕
杨章萍
蔡水淋
林艺平
黄建忠
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011
2
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职称材料
已选择
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引证文献
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