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小鼠抗KLH多克隆抗体的制备及TDAR实验间接ELISA定量检测方法的建立
1
作者
钟文桦
甘连芳
+2 位作者
钟立璠
焦佳琪
杨照新
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期586-589,594,共5页
目的:通过制备小鼠抗KLH多克隆抗体,优化反应条件建立KLH特异性抗体ELISA定量分析方法,以期提供一种特异性好、灵敏度高及误差低的TDAR实验检测方法。方法:利用盐析沉淀和亲和层析纯化技术分离和纯化小鼠抗KLH特异性多克隆IgG抗体;以纯...
目的:通过制备小鼠抗KLH多克隆抗体,优化反应条件建立KLH特异性抗体ELISA定量分析方法,以期提供一种特异性好、灵敏度高及误差低的TDAR实验检测方法。方法:利用盐析沉淀和亲和层析纯化技术分离和纯化小鼠抗KLH特异性多克隆IgG抗体;以纯化后的抗体作为标准品,建立TDAR实验间接ELISA定量检测方法,并对该方法进行线性范围、特异性、变异系数(CV)及检测限验证。结果:以KLH包被浓度为80μg/ml,山羊抗小鼠IgG/HRP酶标二抗的稀释倍率为1∶20000条件进行间接ELISA定量分析的方法学验证,检测线性范围为390.63~25000 ng/ml,R^(2)=0.9848,线性良好;批内和批间CV均<10%;检测限为194.83 ng/ml。结论:通过制备抗KLH多克隆抗体,并优化实验反应条件来建立间接ELISA定量分析方法,其线性范围、特异性及批内、批间CV均满足实验要求,是一种高灵敏度的TDAR实验检测方法。
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关键词
钥孔血蓝蛋白
T细胞依赖性抗体反应(TDAR)
酶联免疫吸附法
定量分析
抗体
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职称材料
题名
小鼠抗KLH多克隆抗体的制备及TDAR实验间接ELISA定量检测方法的建立
1
作者
钟文桦
甘连芳
钟立璠
焦佳琪
杨照新
(
指导
)
机构
海南医学院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期586-589,594,共5页
基金
海南省重点研发项目(ZDYF2020158)
海南省研究生创新科研课题(Hys2020-370)资助。
文摘
目的:通过制备小鼠抗KLH多克隆抗体,优化反应条件建立KLH特异性抗体ELISA定量分析方法,以期提供一种特异性好、灵敏度高及误差低的TDAR实验检测方法。方法:利用盐析沉淀和亲和层析纯化技术分离和纯化小鼠抗KLH特异性多克隆IgG抗体;以纯化后的抗体作为标准品,建立TDAR实验间接ELISA定量检测方法,并对该方法进行线性范围、特异性、变异系数(CV)及检测限验证。结果:以KLH包被浓度为80μg/ml,山羊抗小鼠IgG/HRP酶标二抗的稀释倍率为1∶20000条件进行间接ELISA定量分析的方法学验证,检测线性范围为390.63~25000 ng/ml,R^(2)=0.9848,线性良好;批内和批间CV均<10%;检测限为194.83 ng/ml。结论:通过制备抗KLH多克隆抗体,并优化实验反应条件来建立间接ELISA定量分析方法,其线性范围、特异性及批内、批间CV均满足实验要求,是一种高灵敏度的TDAR实验检测方法。
关键词
钥孔血蓝蛋白
T细胞依赖性抗体反应(TDAR)
酶联免疫吸附法
定量分析
抗体
Keywords
Keyhole limpet hemocyanin
T cell dependent antibody response(TDAR)
ELISA
Qualitative analysis
Antibody
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠抗KLH多克隆抗体的制备及TDAR实验间接ELISA定量检测方法的建立
钟文桦
甘连芳
钟立璠
焦佳琪
杨照新
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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