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大豆DGAT1/2基因表达分析和敲除靶点设计 被引量:4
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作者 杨涔 陈丽玉 +1 位作者 廖春梅 孔凡江 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期438-447,共10页
二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是将甘油二酯(DAG)催化成甘油三酯(TAG)的限速酶。TAG是植物种子油脂的主要储存形式,人体内TAG过高不仅会造成高血脂、高血糖,还会使肝脏功能超负荷代谢,导致肝脏功能受损,血清转氨酶含量增加并最终形成脂肪肝,... 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是将甘油二酯(DAG)催化成甘油三酯(TAG)的限速酶。TAG是植物种子油脂的主要储存形式,人体内TAG过高不仅会造成高血脂、高血糖,还会使肝脏功能超负荷代谢,导致肝脏功能受损,血清转氨酶含量增加并最终形成脂肪肝,而DAG则更有益于人体健康。为给创制大豆dgat突变体和解析DGAT1/2基因功能奠定研究基础,本研究利用定量PCR检测8个GmDGAT1/2基因(DGAT1a、DGAT1b、DGAT1c、DGAT2a、DGAT2b、DGAT2c、DGAT2d和DGAT2e)的表达模式,通过烟草叶片瞬时表达方法检测GmDGAT1c和GmDGAT2b表达对烟草叶片中油脂含量的影响,设计GmDGAT1/2基因敲除靶点并构建CRISPR/Cas9基因敲除载体,并通过大豆离体毛根转化试验检测基因敲除载体的有效性。结果表明:GmDGAT1/2在大豆的不同组织中均有表达,在种子中的表达丰度高于其他组织,且在完熟期(R8)的种子中表达丰度最高。瞬时表达GmDGAT1c和GmDGAT2b能使烟草叶片油脂含量分别提高32.53%和25.90%。另外,获得了含DGAT1a、DGAT1c的有效编辑靶点载体GmDGAT1-Cas9,含DGAT2a、DGAT2b、DGAT2c、DGAT2d和DGAT2e的有效编辑靶点载体GmDGAT2-Cas9。 展开更多
关键词 大豆 DGAT1 DGAT2 基因表达 烟草叶片瞬时表达 CRISPR/Cas9 敲除靶点 大豆毛根转化
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山芹菜金翠香梨混合果醋酿造工艺的研究 被引量:7
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作者 孙天利 程楚怡 +2 位作者 杨涔 张晗 王虹玲 《中国调味品》 CAS 北大核心 2022年第9期101-105,共5页
以山芹菜和金翠香梨为主要原料,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化山芹菜金翠香梨混合果醋的酿造工艺条件。结果表明,山芹菜金翠香梨混合果醋的最佳酿造条件为:醋酸菌添加量0.4 g/L、发酵温度32℃、果蔬汁配比(梨汁∶山芹菜汁)4∶... 以山芹菜和金翠香梨为主要原料,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化山芹菜金翠香梨混合果醋的酿造工艺条件。结果表明,山芹菜金翠香梨混合果醋的最佳酿造条件为:醋酸菌添加量0.4 g/L、发酵温度32℃、果蔬汁配比(梨汁∶山芹菜汁)4∶1、发酵时间10 d。以此条件酿造的山芹菜金翠香梨混合果醋的总酸含量为5.97 g/dL,果醋色泽为淡棕色,醋体澄清透亮,醋香浓郁,风味独特,微生物指标符合国家标准。 展开更多
关键词 山芹菜 金翠香梨 总酸 响应面
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大豆NIN和NLP基因生物信息学分析及敲除载体构建 被引量:1
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作者 廖春梅 陈丽玉 +2 位作者 杨涔 刘宝辉 孔凡江 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-11,共11页
为促进大豆NLP家族基因突变大豆材料的获得及大豆NIN和NLP基因功能的研究,本研究对大豆NIN和NLP基因进行生物信息学分析,通过CRISPR/Cas 9基因编辑技术构建基因敲除载体,并且通过大豆毛根转化实验验证靶点的有效性。结果表明:大豆基因... 为促进大豆NLP家族基因突变大豆材料的获得及大豆NIN和NLP基因功能的研究,本研究对大豆NIN和NLP基因进行生物信息学分析,通过CRISPR/Cas 9基因编辑技术构建基因敲除载体,并且通过大豆毛根转化实验验证靶点的有效性。结果表明:大豆基因组中一共存在4个NIN基因和10个NLP基因家族成员,这些基因都具有RWP-RK和PB1两个保守结构域。亚细胞定位预测表明所有成员都定位在细胞核中,此外GmNIN1b和GmNIN2a还定位于叶绿体。GmNIN1a/b、GmNIN2a/b、GmNLP2a/b及GmNLP3b在根瘤中的表达量相对较高,推测这些基因可能对结瘤过程具有重要的调控功能。成功构建了NLP4和NLP5两个敲除载体,得到可敲除GmNLP4a/b的3个有效靶点和敲除GmNLP5a/b的2个有效靶点。本研究获得了大豆NIN和NLP基因家族的生物信息学依据和创制GmNLP4a/b和GmNLP5a/b基因突变体的技术依据。 展开更多
关键词 大豆 根瘤 NLP基因 生物信息学分析 CRISPR/Cas 9基因编辑技术 基因敲除载体 GmNLP4a/b GmNLP5a/b
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