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区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建
被引量:
7
1
作者
杨忠苹
王秀荣
+4 位作者
石霖
田丽娜
王煜
陶启蒙
陈化兰
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2008年第10期29-32,共4页
制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪...
制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450μm,样点直径220μm。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65mj紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭,95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1,N2亚型的检测基因芯片。在PCR扩增中标记待检样品,对制备的检测芯片进行质量检验,结果表明,制备的区分禽流感病毒亚型基因芯片可区分AIV部分亚型。
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关键词
禽流感
基因芯片
亚型鉴别
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职称材料
禽流感基因诊断技术研究进展
被引量:
2
2
作者
田丽娜
王秀荣
+3 位作者
杨忠苹
石霖
陶启蒙
陈化兰
《动物医学进展》
CSCD
2008年第8期60-62,共3页
禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、...
禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、核酸依赖扩增技术(NASBA)以及基因芯片等基因诊断技术。文章就这些方法的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供有力技术支撑。
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关键词
禽流感
反转录-聚合酶链反应
核酸依赖扩增技术
基因芯片
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职称材料
题名
区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建
被引量:
7
1
作者
杨忠苹
王秀荣
石霖
田丽娜
王煜
陶启蒙
陈化兰
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物国家重点开放实验室
重庆出入境检验检疫局
出处
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2008年第10期29-32,共4页
基金
"十五"国家科技攻关
不同动物流感病毒免疫学及高通量检测技术的研究和开发(2004BA519A23)
+2 种基金
国际合作
防禽流感高效生物制剂试生产开发
编号(20072326)
文摘
制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450μm,样点直径220μm。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65mj紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭,95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1,N2亚型的检测基因芯片。在PCR扩增中标记待检样品,对制备的检测芯片进行质量检验,结果表明,制备的区分禽流感病毒亚型基因芯片可区分AIV部分亚型。
关键词
禽流感
基因芯片
亚型鉴别
Keywords
influenza
Diagnostic microarray
Subtyping
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
禽流感基因诊断技术研究进展
被引量:
2
2
作者
田丽娜
王秀荣
杨忠苹
石霖
陶启蒙
陈化兰
机构
东北农业大学动物医学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
2008年第8期60-62,共3页
基金
防制禽流感高效生物制剂生产开发项目(2007DFR30360)
文摘
禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、核酸依赖扩增技术(NASBA)以及基因芯片等基因诊断技术。文章就这些方法的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供有力技术支撑。
关键词
禽流感
反转录-聚合酶链反应
核酸依赖扩增技术
基因芯片
Keywords
Avian influenza virus
RT-PCR
NASBA : microarray
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建
杨忠苹
王秀荣
石霖
田丽娜
王煜
陶启蒙
陈化兰
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2008
7
在线阅读
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职称材料
2
禽流感基因诊断技术研究进展
田丽娜
王秀荣
杨忠苹
石霖
陶启蒙
陈化兰
《动物医学进展》
CSCD
2008
2
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职称材料
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