猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：4

1

作者 商晓桂 郭伟 +4 位作者 杨莲茹 杨志彪 华修国 朱建国 崔立 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1049-1053,共5页

本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化... 本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异性和重复性进行验证。结果表明,猪星状病毒荧光定量PCR的标准曲线Ct值与模板浓度呈良好的线性关系,熔解曲线特异,灵敏度可达1×101拷贝,是普通PCR检测方法的100倍,特异性和重复性较好。本次建立的猪星状病毒荧光定量PCR检测方法具有快速、简便、敏感等优点,有重要的实用价值。 展开更多

关键词 SYBR Green Ⅰ 猪星状病毒 检测

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红细胞免疫研究进展 被引量：8

2

作者 余飞 袁聪俐 +3 位作者 杨志彪 李政萍 华修国 崔立 《动物医学进展》 CSCD 2007年第6期82-85,共4页

红细胞是机体的一种重要的固有免疫细胞,在天然免疫中有很重要的作用。文章综述了红细胞免疫功能检测方法和动物红细胞免疫的研究进展,从针对CR1分子的研究、红细胞免疫调控和红细胞系统免疫学等3个方面重点概述了近年红细胞免疫研究的... 红细胞是机体的一种重要的固有免疫细胞,在天然免疫中有很重要的作用。文章综述了红细胞免疫功能检测方法和动物红细胞免疫的研究进展,从针对CR1分子的研究、红细胞免疫调控和红细胞系统免疫学等3个方面重点概述了近年红细胞免疫研究的热点。 展开更多

关键词 红细胞免疫 动物

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猪链球菌2型两代表性分离株感染小型猪后对部分免疫指标的影响 被引量：2

3

作者 沈艳 华修国 +2 位作者 崔立 朱建国 杨志彪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1721-1730,共10页

为探讨致病性猪链球菌2型(SS2)感染后对猪外周免疫系统的影响,作者选用SS2两代表性分离株(即四川分离株ZY05719和江苏分离株HA9801)建立具有典型症状和病理组织特征的小型猪感染模型,分析感染后不同时间猪血液中细菌含量和白细胞变化,... 为探讨致病性猪链球菌2型(SS2)感染后对猪外周免疫系统的影响,作者选用SS2两代表性分离株(即四川分离株ZY05719和江苏分离株HA9801)建立具有典型症状和病理组织特征的小型猪感染模型,分析感染后不同时间猪血液中细菌含量和白细胞变化,以及相关免疫指标的变化。结果表明,猪链球菌2型感染会引起小型猪的急性死亡、亚急性感染和慢性迁延。急性死亡猪的血液中细菌含量高达106CFU/mL。感染后的12 h即可见IL-1I、L-8、TNF-α、IFN-γ分泌量显著增加,其中以TNF-α增幅最显著。同时可见CD4+T细胞的水平明显下降,CD8+T细胞的水平上升,急性死亡猪出现CD4+/CD8+T细胞比值倒置,即感染猪处于免疫抑制状态。急性死亡猪血液中的淋巴细胞转化能力变化无规律,亚急性感染猪的淋转指数在下降1周后逐渐恢复。结果提示:ZY05719和HA9801菌株的致病性有差异;外周血中各相关免疫指标和SS2感染进程有一定相关性。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 巴马小型猪 T淋巴细胞亚群 增殖功能 细胞因子

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猪链球菌2型感染SPF小型猪模型的构建 被引量：3

4

作者 沈艳 华修国 +2 位作者 崔立 朱建国 杨志彪 《动物医学进展》 CSCD 2008年第2期17-20,共4页

构建了致病性猪链球菌2型(SS2)感染模型。通过典型临床症状观察、剖检病变和组织学观察及病原分离鉴定,证实该模型能成功模拟自然感染状态下SS2引起的典型临床症状和病理变化特点,稳定性好,可进一步用于致病性SS2在动物体内动态分布规... 构建了致病性猪链球菌2型(SS2)感染模型。通过典型临床症状观察、剖检病变和组织学观察及病原分离鉴定,证实该模型能成功模拟自然感染状态下SS2引起的典型临床症状和病理变化特点,稳定性好,可进一步用于致病性SS2在动物体内动态分布规律、致病机制和机体免疫应答以及疫苗的效果评价和相关药物筛选等方面的研究,对于猪链球菌2型感染的防控具有重要意义。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 SPF小型猪 模型

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猪链球菌2型感染动物模型研究进展 被引量：3

5

作者 王姝优 华修国 +2 位作者 朱建国 崔立 杨志彪 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第4期98-100,共3页

猪链球菌2型(SS2)是以败血症、脑膜炎、关节炎为主要特征的人兽共患病。该病不但对养猪业造成严重经济损失,也会给公共卫生和食品安全带来威胁,但由于其毒力因子和感染机制还不十分清楚,尚不能有效控制。不同动物模型的建立为研究病原... 猪链球菌2型(SS2)是以败血症、脑膜炎、关节炎为主要特征的人兽共患病。该病不但对养猪业造成严重经济损失,也会给公共卫生和食品安全带来威胁,但由于其毒力因子和感染机制还不十分清楚,尚不能有效控制。不同动物模型的建立为研究病原的体内动态分布、感染机制、毒力因子及免疫应答等提供了依据。作者就国内外对SS2的造模方法及结果进行了介绍,并将不同动物模型的优缺点进行了比较,旨在掌握SS2动物模型研究的动态,为建立更有效的动物模型奠定基础。 展开更多

关键词 猪 链球菌2型 动物模型

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猪β防御素-1的研究进展 被引量：2

6

作者 孟虹艳 李培锋 +2 位作者 朱建国 华修国 杨志彪 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第9期50-52,共3页

猪β防御素-1(porcineβ-defensin 1,PBD-1)是广泛分布于猪消化道、呼吸道、肝肾等多种组织细胞内的一类活性多肽,在猪防御系统中有着重要的作用,大量研究结果证明PBD-1具有独特的作用机制,几乎无耐药性,已引起各国研究者的日益重视。... 猪β防御素-1(porcineβ-defensin 1,PBD-1)是广泛分布于猪消化道、呼吸道、肝肾等多种组织细胞内的一类活性多肽,在猪防御系统中有着重要的作用,大量研究结果证明PBD-1具有独特的作用机制,几乎无耐药性,已引起各国研究者的日益重视。目前对PBD-1科研工作在不断深入,可以相信PBD-1将在动物养殖、疾病预防和提高畜产品品质方面发挥重要作用。作者就PBD-1的分布、分子结构、抗菌作用机制和基因表达调控研究进展作一综述。 展开更多

关键词 猪β防御素-1 抗菌肽 研究进展

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空肠弯曲杆菌耐药性及其主要相关基因初步分析 被引量：7

7

作者 姜毅 杨凤娥 +3 位作者 侯建军 朱建国 华修国 杨志彪 《中国兽药杂志》 2008年第12期9-13,共5页

从307份鸡盲肠内容物样品中分离到47株空肠弯曲杆菌,并测定这些空肠弯曲杆菌耐药性,结果显示对喹诺酮类药(环丙沙星)耐药性为31.9%;对氨苄青霉素,克林霉素和红霉素耐药性较高,分别达到85.1%、83.0%和83.0%;而对痢特灵和庆大霉素则较为敏... 从307份鸡盲肠内容物样品中分离到47株空肠弯曲杆菌,并测定这些空肠弯曲杆菌耐药性,结果显示对喹诺酮类药(环丙沙星)耐药性为31.9%;对氨苄青霉素,克林霉素和红霉素耐药性较高,分别达到85.1%、83.0%和83.0%;而对痢特灵和庆大霉素则较为敏感,敏感度分别为85.1%和74.5%。有89.4%的菌株显示多重耐药性。利用MAMAPCR技术,对获得的47株空肠弯曲杆菌进行检测,结果显示对环丙沙星耐药的15株空肠弯曲杆菌均检测出其在gyrA基因257位发生点突变,30株对喹诺酮药物敏感的菌株均未检出。另外2株对环丙沙星耐药的菌株,有1株检测出点突变。 展开更多

关键词 空肠弯曲杆菌 耐药性 相关基因

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皖南某野生动物园戊型肝炎跨种感染的分析 被引量：1

8

作者 沈权 蒲颖艳 +7 位作者 张文 牟静 曹祥荣 崔立 杨志彪 华修国 胡钧 徐春茂 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第9期3690-3691,3716,共3页

从皖南某野生动物园采集包括鸟类在内的22种动物粪便样品共计38份,采用RT-nPCR法检测HEV。结果表明,28.9%的粪样呈HEV RNA阳性,其中包括多种鸟类粪样。对所有11个HEV分离株的基因序列分析表明,它们均属基因4型,同源性为96%-100%。这提示... 从皖南某野生动物园采集包括鸟类在内的22种动物粪便样品共计38份,采用RT-nPCR法检测HEV。结果表明,28.9%的粪样呈HEV RNA阳性,其中包括多种鸟类粪样。对所有11个HEV分离株的基因序列分析表明,它们均属基因4型,同源性为96%-100%。这提示,在该野生动物中心发生了HEV的跨种间感染,并且哺乳动物HEV可以在自然条件下感染鸟类。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 跨种感染 基因型

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上海屠宰样品中猪链球菌感染率调查研究 被引量：1

9

作者 杨筱薇 郑升博 +5 位作者 王开功 周碧君 文明 袁聪俐 杨志彪 崔立 《国外畜牧学（猪与禽）》 2010年第3期64-65,共2页

采集上海地区屠宰场中扁桃体样品,进行猪链球菌分离。按照染色特性及PCR鉴定阳性细菌。根据CPS基因采用PCR方法进行2、7及9血清型鉴定工作,并检测分离株毒力因子携带情况。结果证实在231份样品中共确定24份猪链球菌,其中2型10株、7型3株... 采集上海地区屠宰场中扁桃体样品,进行猪链球菌分离。按照染色特性及PCR鉴定阳性细菌。根据CPS基因采用PCR方法进行2、7及9血清型鉴定工作,并检测分离株毒力因子携带情况。结果证实在231份样品中共确定24份猪链球菌,其中2型10株、7型3株、9型2株,其余血清型待定。 展开更多

关键词 猪链球菌 屠宰样品 毒力因子

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上海地区宠物犬中戊型肝炎病毒流行病学调查 被引量：7

10

作者 刘俊峰 华修国 +3 位作者 张文 李培锋 杨志彪 沈权 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第14期5895-5896,5941,共3页

[目的]为探讨宠物犬在戊型肝炎病毒(HEV)流行环节中的作用提供依据。[方法]以散养宠物犬为研究对象,从上海地区及其周边地区随机采集70份血清样品,通过双抗原夹心ELISA试验检测抗HEV抗体,分析不同品种和不同性别宠物犬中血清抗HEV抗体... [目的]为探讨宠物犬在戊型肝炎病毒(HEV)流行环节中的作用提供依据。[方法]以散养宠物犬为研究对象,从上海地区及其周边地区随机采集70份血清样品,通过双抗原夹心ELISA试验检测抗HEV抗体,分析不同品种和不同性别宠物犬中血清抗HEV抗体阳性率。利用反转录巢式PCR检测血清中病毒核酸。[结果]在70份宠物犬血清样品中,15份样品中抗HEV抗体呈阳性,阳性率为21.4%。上海地区宠物犬阳性率为27.5%,高于上海周边地区。在供试的宠物犬品种中,杜宾犬的HEV抗体阳性率较高(33.3%),其他品种宠物犬为11.1%～25.0%。雌性宠物犬中HEV阳性率为34.4%,显著高于雄性宠物犬。在各种宠物犬中未检测到HEV核酸颗粒。[结论]宠物犬对HEV敏感,在HE流行环节中具有不容忽视的作用。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 反转录巢式PCR 双抗原夹心酶联免疫试验

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猪传染性胃肠炎疫苗研究进展 被引量：6

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作者 邢瑞 李云章 杨志彪 《国外畜牧学（猪与禽）》 2011年第3期103-104,共2页

猪传染性胃肠炎是猪的一种高度接触性的病毒性传染病。该病主要发生在冬季和早春,是危害养猪业较严重的一种传染病,给养猪业造成了巨大的经济损失。本文就猪传染性胃肠炎病毒基因的分子生物学特征、疫苗研究进展及以乳酸杆菌为载体构建... 猪传染性胃肠炎是猪的一种高度接触性的病毒性传染病。该病主要发生在冬季和早春,是危害养猪业较严重的一种传染病,给养猪业造成了巨大的经济损失。本文就猪传染性胃肠炎病毒基因的分子生物学特征、疫苗研究进展及以乳酸杆菌为载体构建DNA疫苗等方面进行了综述,以期为猪传染性胃肠炎乳酸杆菌疫苗的研究提供一定依据。 展开更多

关键词 猪 传染性胃肠炎 疫苗

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