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题名应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位
被引量:9
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作者
杨廷亚
王芳
姜平
胡波
范志宇
魏后军
薛家宾
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机构
江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心
南京农业大学动物医学院
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出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期1281-1286,共6页
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基金
现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-44)
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文摘
以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。
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关键词
兔出血症病毒
单克隆抗体
噬菌体展示技术
模拟表位
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Keywords
rabbit hemorrhagic disease virus; monoclonal antibody; phage display technology; mimotopes
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分类号
S852.659.6
[农业科学—基础兽医学]
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