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结核分支杆菌Mtb8.4真核、原核表达质粒的构建与表达
被引量：
2
1
作者
杨宏倩
李博
+1 位作者
蔡宏
朱玉贤
《动物医学进展》
CSCD
2006年第1期54-57,共4页
低分子质量蛋白抗原Mtb8.4是一种非常重要的结核分支杆菌抗原,为了研制结核病核酸疫苗和进行结核病的诊断,分别将其构建到原核和真核载体中进行表达。以结核分支杆菌标准菌株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因Mtb8.4,扩增产物酶切...
低分子质量蛋白抗原Mtb8.4是一种非常重要的结核分支杆菌抗原,为了研制结核病核酸疫苗和进行结核病的诊断,分别将其构建到原核和真核载体中进行表达。以结核分支杆菌标准菌株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因Mtb8.4,扩增产物酶切后分别克隆到真核表达载体pJW4303和原核表达载体pGEX-4T-1中,构成重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4,用限制性内切酶消化,PCR扩增及DNA序列分析等多种方法鉴定;并将正确构建的原核表达载体转入E.coliBL21(DE3)plysS中,IPTG诱导表达。结果表明,重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4构建成功。构建的真核重组质粒pJW-Mtb8.4即可作为结核病DNA疫苗。原核表达载体pGEX-Mtb8.4在BL21(DE3)plysS中成功表达,将表达蛋白进行纯化,作为保护性结核分支杆菌抗原以便检测DNA疫苗的免疫效果。
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关键词
结核病
Mtb8.4重组原核表达载体
核酸疫苗
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题名
结核分支杆菌Mtb8.4真核、原核表达质粒的构建与表达
被引量：
2
1
作者
杨宏倩
李博
蔡宏
朱玉贤
机构
北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
2006年第1期54-57,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2001AA213141)
文摘
低分子质量蛋白抗原Mtb8.4是一种非常重要的结核分支杆菌抗原,为了研制结核病核酸疫苗和进行结核病的诊断,分别将其构建到原核和真核载体中进行表达。以结核分支杆菌标准菌株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因Mtb8.4,扩增产物酶切后分别克隆到真核表达载体pJW4303和原核表达载体pGEX-4T-1中,构成重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4,用限制性内切酶消化,PCR扩增及DNA序列分析等多种方法鉴定;并将正确构建的原核表达载体转入E.coliBL21(DE3)plysS中,IPTG诱导表达。结果表明,重组真核表达载体pJW-Mtb8.4和重组原核表达载体pGEX-Mtb8.4构建成功。构建的真核重组质粒pJW-Mtb8.4即可作为结核病DNA疫苗。原核表达载体pGEX-Mtb8.4在BL21(DE3)plysS中成功表达,将表达蛋白进行纯化,作为保护性结核分支杆菌抗原以便检测DNA疫苗的免疫效果。
关键词
结核病
Mtb8.4重组原核表达载体
核酸疫苗
Keywords
tuberculosis
Mtb8.4 recombinant prokaryotic expression vectors
DNA vaccine
分类号
S852.618 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
结核分支杆菌Mtb8.4真核、原核表达质粒的构建与表达
杨宏倩
李博
蔡宏
朱玉贤
《动物医学进展》
CSCD
2006
2
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