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抗重组人血管生长素单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:9
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作者 杨太成 江悦华 +2 位作者 冼江 吴锦银 李明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期412-413,共2页
目的:制备不同类型抗重组人血管生长素(Recombinantion Human Angiogenin ,rhANG) 的单克隆抗体,为进一步研究抗rhANG 抗体对ANG 的中和作用以及对ANG 依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基... 目的:制备不同类型抗重组人血管生长素(Recombinantion Human Angiogenin ,rhANG) 的单克隆抗体,为进一步研究抗rhANG 抗体对ANG 的中和作用以及对ANG 依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基础。方法:利用杂交瘤技术以rhANG 免疫Balbc小鼠,制备二株(C6 、C46) 能够稳定分泌抗rhANG 抗体的杂交瘤,并对上清进行ELISA、双扩散、免疫印迹等鉴定。结果:该抗体类别C6 为IgG1 ,C46 为IgM,并特异地识别rhANG 与其它细胞因子及血清蛋白无交叉反应,免疫印迹显示该抗体与分子量144kDrhANG 蛋白结合,不与宿主菌体蛋白反应。结论:经多种方法鉴定获得的二株杂交瘤细胞分泌的抗体为rhANG 特异抗体。 展开更多
关键词 单克隆抗体 rhANG 鉴定 制备
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重组人CEA痘苗病毒的免疫原性和安全性实验研究
2
作者 杨太成 江悦华 +1 位作者 杨洁 王捷 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期375-376,共2页
重组人CEA痘苗病毒的免疫原性和安全性实验研究杨太成江悦华杨洁①王捷广州军区广州总医院(广州市510010)CEA分泌性肿瘤是人类最常见的一大类恶性肿瘤,近年来国外CEA分泌性肿瘤基因免疫治疗的研究有很大的进展,其... 重组人CEA痘苗病毒的免疫原性和安全性实验研究杨太成江悦华杨洁①王捷广州军区广州总医院(广州市510010)CEA分泌性肿瘤是人类最常见的一大类恶性肿瘤,近年来国外CEA分泌性肿瘤基因免疫治疗的研究有很大的进展,其中又以重组人CEA痘苗[rV-CE... 展开更多
关键词 CEA分泌性肿瘤 CEA瘤苗病毒 免疫原性 瘤苗 重组
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ELISA法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型特异性抗体的临床应用研究 被引量:10
3
作者 杨慧兰 杨军 +4 位作者 刘荣卿 杨太成 王捷 冼江 李建军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期383-384,共2页
目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV 2)感染的早期特异检测手段。方法对52例性病门诊的生殖器疱疹患者用改良的ELISA方法进行了HSV gD2IgG检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果病毒分离的阳性率为69.2 % ,ELISA法检测抗体的阳性率为65 % ... 目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV 2)感染的早期特异检测手段。方法对52例性病门诊的生殖器疱疹患者用改良的ELISA方法进行了HSV gD2IgG检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果病毒分离的阳性率为69.2 % ,ELISA法检测抗体的阳性率为65 % ,两种方法检测结果差异无显著性。结论ELISA法检测血清疱疹病毒IgG抗体具有简便 ,快速 ,特异的优点 ,适合于临床大规模检测之用。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 Ⅱ型 糖蛋白D ELISA
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钙离子载体对外周血单核细胞来源的树突状细胞的影响 被引量:8
4
作者 吴军 王捷 +3 位作者 杨太成 赖晃文 郑文岭 王晓怀 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期52-53,89,共3页
目的:探讨钙离子载体(calcium ionophore,CI)对外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的影响。方法:分离健康献血者外周血单核细胞,分别加入重组人粒/单集落刺激因子(rhGM-CSF)100μg/L、rhGM-CSF 100μg/L+CI 10μg/L及rhGM-CSF+CI各100... 目的:探讨钙离子载体(calcium ionophore,CI)对外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的影响。方法:分离健康献血者外周血单核细胞,分别加入重组人粒/单集落刺激因子(rhGM-CSF)100μg/L、rhGM-CSF 100μg/L+CI 10μg/L及rhGM-CSF+CI各100μg/L。体外培养40 h后,于光镜及电镜下观察细胞的形态、流式细胞仪检测细胞的表面标志,MTT比色法检测上述分子对自体T细胞的刺激增殖作用。结果:外周血单核细胞在GM-CSF+CI各100μg/L的条件下培养40 h,就可看到典型的DC形态,其表面CD14分子表达减少,HLA- DR、CD40、CD83及CD86分子的表达明显增高,且具有明显 刺激自体T细胞增殖的能力。结论:CI有显著加速GM-CSF 诱导的外周血单核细胞向DC转化的作用。 展开更多
关键词 钙离子载体 外周血 单核细胞 树突状细胞
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微波和长春新碱对白血病细胞的体外净化研究 被引量:5
5
作者 史泓浏 王晓怀 +3 位作者 江悦华 杨太成 罗绍凯 赖声礼 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第3期14-18,共5页
旨在研究一种较好的微波和长春新碱的联合方法,用于白血病细胞的体外净化.将微波和长春新碱分别单独以及联合作用于正常骨髓细胞HL60、U937和K562细胞株,通过GM-CFU和tCFU的测定来评价体外净化的效果.结果发... 旨在研究一种较好的微波和长春新碱的联合方法,用于白血病细胞的体外净化.将微波和长春新碱分别单独以及联合作用于正常骨髓细胞HL60、U937和K562细胞株,通过GM-CFU和tCFU的测定来评价体外净化的效果.结果发现微波和长春新碱对GM-CFU、tCFU存活率均表现出抑制作用,抑制程度呈现出功率相关性和浓度相关性;在一定范围内,微波和长春新碱对3种细胞株tCFU存活率的抑制显著大于GM-CFU(P<0.05或P<0.01);微波和长春新碱联合作用对3种细胞株的杀伤作用比单用长春新碱有显著性增加(P<0.05),而不显著增加对GM-CFU的抑制(P>0.05).这一结果提示微波和长春新碱联合用于白血病细胞的体外净化能产生协同效应,值得进一步研究. 展开更多
关键词 微波 长春新碱 净化 白血病细胞 ABMT 体外净化
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毫米波辐射下悬液细胞膜电压变化研究 被引量:3
6
作者 覃玉荣 赖声礼 +2 位作者 江悦华 杨太成 王捷 《红外与毫米波学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期328-330,334,共4页
根据有效介质理论,用M axwell-W agner等效公式计算细胞悬液中的平均场.然后基于时变场中单细胞膜电压第二计算模型,用场近似等效方法,建立了毫米场辐射下悬液中细胞膜电压计算模型.模型表明悬液细胞膜电压变化和毫米波的功率、频率、... 根据有效介质理论,用M axwell-W agner等效公式计算细胞悬液中的平均场.然后基于时变场中单细胞膜电压第二计算模型,用场近似等效方法,建立了毫米场辐射下悬液中细胞膜电压计算模型.模型表明悬液细胞膜电压变化和毫米波的功率、频率、细胞半径、细胞排列及细胞的浓度有关. 展开更多
关键词 毫米波 细胞悬液 生物效立 跨膜电压 毫米波辐射 电压变化 细胞膜 有效介质理论 计算模型 等效方法
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重组载体pEGFP-ANG的构建及ANG基因在HUVEC中的表达 被引量:5
7
作者 张宏斌 王捷 +5 位作者 武婕 江悦华 杨太成 冼江 杨传红 郑文岭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期15-18,共4页
目的 :建立血管生成素 (angiogenin ,ANG)基因的真核表达系统。方法 :采用化学合成拼接法 ,获得人ANG全长cDNA并测序 ,构建重组荧光真核细胞表达质粒 pEGFP ANG ,然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。应用荧光显微镜观测及... 目的 :建立血管生成素 (angiogenin ,ANG)基因的真核表达系统。方法 :采用化学合成拼接法 ,获得人ANG全长cDNA并测序 ,构建重组荧光真核细胞表达质粒 pEGFP ANG ,然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。应用荧光显微镜观测及免疫组化染色 ,对转染细胞内 pEGFP ANG的表达进行鉴定。结果 :测序表明 ,编码的氨基酸序列与人ANG完全一致。荧光显微镜下可见转染的HUVEC内发出强绿色荧光。免疫组化检测显示 ,转染的HUVEC中有棕色颗粒。结论 :获得了人ANG的全长编码基因。构建的重组体pEGFP ANG转染HUVEC后 。 展开更多
关键词 人血管生成素 克隆 基因转染 真核表达
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gD基因在生殖器疱疹PCR诊断中的研究 被引量:5
8
作者 杨慧兰 李明 +3 位作者 廖元兴 吴锦银 江悦华 杨太成 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期292-294,共3页
依据国外已发表的疱疹病毒(HSV)糖蛋白D基因(gD基因)的核苷酸保守区序列设计了一对引物,建立了用疱疹病毒gD基因做疱疹病毒诊断基因的PCR方法。对48例拟诊为疱疹病毒感染的临床标本进行病毒细胞培养和PCR检测。结... 依据国外已发表的疱疹病毒(HSV)糖蛋白D基因(gD基因)的核苷酸保守区序列设计了一对引物,建立了用疱疹病毒gD基因做疱疹病毒诊断基因的PCR方法。对48例拟诊为疱疹病毒感染的临床标本进行病毒细胞培养和PCR检测。结果表明,PCR对HSV2感染的敏感性为84%(20/24),特异性为91%(22/24)。经标准株及限制性内切酶的酶切证实和序列分析,表明该方法特异。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 聚合酶链反应 糖蛋白 GD基因
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gD2 DNA疫苗诱导细胞免疫应答(英文) 被引量:3
9
作者 韩双艳 郭勇 +2 位作者 杨慧兰 王捷 杨太成 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期42-46,共5页
用生殖器疱疹gD2DNA疫苗pcDNA3 gD转染哺乳动物细胞COS 7,鉴定gD表达 .再用其免疫BALB/c小鼠 ,测定脾细胞增殖、CTL细胞杀伤活性 ,以及CD4 + 和CD8+ 细胞群 .结果表明 :pcDNA3 gD能够在哺乳动物细胞COS 7中表达gD抗原 ,其免疫小鼠脾细... 用生殖器疱疹gD2DNA疫苗pcDNA3 gD转染哺乳动物细胞COS 7,鉴定gD表达 .再用其免疫BALB/c小鼠 ,测定脾细胞增殖、CTL细胞杀伤活性 ,以及CD4 + 和CD8+ 细胞群 .结果表明 :pcDNA3 gD能够在哺乳动物细胞COS 7中表达gD抗原 ,其免疫小鼠脾细胞增殖活性增加 ,CTL活性达 37.6 9% ,明显高于pcD NA3组和生理盐水组 ;CD4 + 占T细胞数量的 33.38% 。 展开更多
关键词 免疫 gD2 DNA疫苗 细胞毒T细胞 CD4^+ CD8^+ 疱疹
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GFP为报告基因的酵母哺乳动物细胞穿梭载体的构建及其在人血管内皮细胞中的表达 被引量:4
10
作者 王弘 郑文岭 +5 位作者 杨连生 杨太成 刘佳 冼江 崔东 马文丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期77-81,共5页
为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载... 为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载体能够在酵母中复制 ;以脂质体介导向人血管内皮细胞进行了转染 ,有绿色荧光 ,证明该载体能够在哺乳动物细胞中表达 . 展开更多
关键词 酵母 穿梭载体 口服基因治疗 人血管内皮细胞
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重组人生长激素对中性粒细胞凋亡和存活的影响 被引量:4
11
作者 吴新海 屠伟峰 +3 位作者 郄文斌 杨传红 杨太成 曾因明 《实用医学杂志》 CAS 2005年第8期773-775,共3页
目的:研究重组人生长激素(rhG)对有(或)无H LPS刺激的离体培养中性粒细胞(PM N s)凋亡和存活的影响。方法:采健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PM N s,分为4组:对照组,rhG H(100ng/m L)组,LPS100ng/m L组,LPS100... 目的:研究重组人生长激素(rhG)对有(或)无H LPS刺激的离体培养中性粒细胞(PM N s)凋亡和存活的影响。方法:采健康人外周静脉血,血浆-Percoll不连续密度梯度离心法分离出PM N s,分为4组:对照组,rhG H(100ng/m L)组,LPS100ng/m L组,LPS100ng/m L刺激1h后加rhG H100ng/m L组,离体培养3h和24h上流式细胞仪检测PM N s的凋亡(A nnexin V法)。结果:无LPS刺激状态下,rhG H可引起PM N s早期凋亡率减少、存活率增加,但不影响晚期凋亡/死亡率;有LPS刺激状态下,rhG H不影响PM N s早期凋亡率、晚期凋亡/死亡率和存活率,而且可能对LPS对PM N s刺激有一定阻抑作用。结论:无LPS刺激状态下,rhG H可延迟PM N s凋亡、增强PM N s活力;与LPS共同孵育时,rhG H不影响PM N s凋亡和活力,且对LPS对PM N s的刺激有一定阻抑的作用。 展开更多
关键词 重组人生长激素 中性粒细胞凋亡 PMNS 密度梯度离心法 流式细胞仪检测 RHGH 离体培养 LPS 外周静脉血 凋亡率 阻抑作用 存活率 健康人 对照组 mL 24h 状态 死亡率 早期 晚期 活力
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人癌胚抗原cDNA-重组痘苗病毒接种动物的研究 被引量:4
12
作者 杨洁 赖晃文 +3 位作者 罗超权 杨太成 徐国恒 王晓怀 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1997年第S1期46-48,52,共4页
将构建的表达人癌胚抗原(CEA)的重组痘苗病毒接种于纯种新西兰兔,在兔血清中测到高水平的CEA以及高滴度抗CEA抗体,而在兔的非淋巴组织器官中未检测到CEA的表达及免疫复合物的沉积,接种后的兔也没有明显的毒副反应,显... 将构建的表达人癌胚抗原(CEA)的重组痘苗病毒接种于纯种新西兰兔,在兔血清中测到高水平的CEA以及高滴度抗CEA抗体,而在兔的非淋巴组织器官中未检测到CEA的表达及免疫复合物的沉积,接种后的兔也没有明显的毒副反应,显示痘苗病毒作载体在体内应用是安全可行的。 展开更多
关键词 痘苗病毒 癌胚抗原/治疗应用 抗体生成/免疫学 接种
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重组人血管生长素的鉴定 被引量:3
13
作者 张宏斌 江悦华 +3 位作者 王捷 武婕 杨太成 吴锦银 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期613-614,617,共3页
目的 :为了鉴定自行制备的重组人血管生长素。方法 :采用凝胶扫描法分析纯度 ;ELISA等方法检测特异性 ;鸡胚绒毛尿囊膜实验检测生物活性 ,并与商品化标准品进行免疫结合性的对比研究。结果 :重组血管生长素纯度达 96% ,具有促进血管生... 目的 :为了鉴定自行制备的重组人血管生长素。方法 :采用凝胶扫描法分析纯度 ;ELISA等方法检测特异性 ;鸡胚绒毛尿囊膜实验检测生物活性 ,并与商品化标准品进行免疫结合性的对比研究。结果 :重组血管生长素纯度达 96% ,具有促进血管生长的生物活性 ;而且较标准品有理想的免疫结合性。结论 :该重组人血管生长素可用于进一步的实验和临床应用研究。 展开更多
关键词 重组人血管生长素 生物学活性 鉴定 rhANG
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含不同启动子的人癌胚抗原重组质粒的构建与表达 被引量:3
14
作者 李云贵 王晓怀 +2 位作者 杨太成 赖晃文 江悦华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期591-594,共4页
构建含不同启动子的人癌胚抗原重组表达质粒,观察肌肉注射该重组质粒后人癌胚抗原基因在小鼠舌肌中的表达情况。方法:将7天前肌肉注射0.75%布比卡因的小鼠分成4组,每组4只,分别将含不同启动子的重组质粒pCEA、pLCEASN及阴性对照质粒pcD... 构建含不同启动子的人癌胚抗原重组表达质粒,观察肌肉注射该重组质粒后人癌胚抗原基因在小鼠舌肌中的表达情况。方法:将7天前肌肉注射0.75%布比卡因的小鼠分成4组,每组4只,分别将含不同启动子的重组质粒pCEA、pLCEASN及阴性对照质粒pcDNA3、pLXSN注射于小鼠的舌肌内,每周1次,每次100μg,共3次;注射前及每次注射后2天,取尾静脉血用放免法测其癌胚抗原的含量,最后1次注射2天后,处死小鼠并取其舌、脑、肝、脾、肾、心脏及股四头肌用免疫组化法(ABC法)检测癌胚抗原的表达。结果:构建并鉴定了两种新的癌胚抗原重组表达质粒;免疫组织化学法检测显示:癌胚抗原ABC染色仅在用人癌胚抗原重组表达质粒注射过的舌肌切片中阳性,而在脑、肝、脾、肾、心脏及股四头肌的切片中均阴性;放免法检测显示:所有血液样本中癌胚抗原的浓度均未达检测值(<5ng/ml)。结论:含不同启动子的癌胚抗原重组表达质粒可在注射部位有效地表达人癌胚抗原。 展开更多
关键词 癌胚抗原 重组质粒 核酸疫苗 原位表达
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木瓜凝乳蛋白酶与5-Fu或MTX对人肝癌细胞7402的细胞毒试验 被引量:3
15
作者 蔡小玲 王捷 +2 位作者 郭勇 杨太成 洗江 《实用医学杂志》 CAS 2004年第1期6-8,共3页
目的 :测定木瓜凝乳蛋白酶及其与 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)、氨甲喋呤 (MTX )单独或联合作用对人肝癌细胞740 2的细胞毒性。方法 :采用MTT法 ,不同浓度的酶和药物在不同的培养时间下 ,通过其细胞抑制率和半数抑制率 (IC50 )测定木瓜凝乳蛋... 目的 :测定木瓜凝乳蛋白酶及其与 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)、氨甲喋呤 (MTX )单独或联合作用对人肝癌细胞740 2的细胞毒性。方法 :采用MTT法 ,不同浓度的酶和药物在不同的培养时间下 ,通过其细胞抑制率和半数抑制率 (IC50 )测定木瓜凝乳蛋白酶及联合药物的细胞毒性。结果 :木瓜凝乳蛋白酶对 740 2细胞的IC50 约为 12 5 μg/mL ,随浓度增加对细胞的抑制率增加。培养 3 6h时酶对细胞的毒性最大。酶与 5 Fu、MTX联合使用比单独使用效果更好。结论 :木瓜凝乳蛋白酶对人肝癌细胞 740 2具有细胞毒作用 ,酶在培养 3 6h时细胞毒作用最大 ; 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 5-FU MTX 人肝癌 7402 细胞毒性 试验 癌细胞 5-氟尿嘧啶 氨甲喋呤
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重组人血管生长素及其单克隆抗体的特性鉴定 被引量:3
16
作者 张宏斌 江悦华 +3 位作者 王捷 武婕 杨太成 吴锦银 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期277-279,共3页
目的鉴定自制重组人血管生长素(rhANG)及其单克隆抗体(mAb)。方法采用凝胶扫描法分析rhANG的纯度;ELISA等方法检测抗rhANGmAb的特异性,鸡胚绒毛尿囊膜实验检测rhANG及其mAb的生物学活性,并与商品化标准品的免疫结合性进行对比研究。结果... 目的鉴定自制重组人血管生长素(rhANG)及其单克隆抗体(mAb)。方法采用凝胶扫描法分析rhANG的纯度;ELISA等方法检测抗rhANGmAb的特异性,鸡胚绒毛尿囊膜实验检测rhANG及其mAb的生物学活性,并与商品化标准品的免疫结合性进行对比研究。结果rhANG的纯度达96%,具有促进血管生长的生物学活性;抗ANGmAb具有很好的特异性和抑制血管生长的活性;而且二者较标准品均具有良好的免疫结合活性。结论该rhANG及其mAb可用于进一步的实验和临床应用研究。 展开更多
关键词 重组人血管生长素 单克隆抗体 特性鉴定
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肿瘤患者血清血管生长素水平变化的初步研究 被引量:2
17
作者 张宏斌 郭文军 +3 位作者 吴锦银 杨太成 王捷 郑文岭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期190-190,共1页
关键词 血清 血管生长素 检测 肿瘤 测定
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Canstatin RNA转染对兔血管平滑肌细胞体外增殖的抑制作用 被引量:2
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作者 李浪 冯建章 +5 位作者 郑文岭 冼江 张宏斌 杨太成 唐其东 邓春玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期746-748,共3页
目的 :探讨canstatin对体外培养的兔血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法 :将阳离子脂质体介导的canstatinRNA转染VSMC ,应用细胞计数 ,[3 H]-TdR掺入率测定观察canstatin基因对VSMC增殖的作用。结果 :阳离子脂质体介导的canstatinRN... 目的 :探讨canstatin对体外培养的兔血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法 :将阳离子脂质体介导的canstatinRNA转染VSMC ,应用细胞计数 ,[3 H]-TdR掺入率测定观察canstatin基因对VSMC增殖的作用。结果 :阳离子脂质体介导的canstatinRNA可有效地转染VSMC并能显著地抑制VSMC的增殖及其DNA的合成率。结论 展开更多
关键词 基因转移 RNA 血管平滑肌细胞 细胞增殖 抑制作用 动物实验
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重组DNA技术的应用和新进展 被引量:5
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作者 冯爱娟 杨太成 刘耘 《实用医学杂志》 CAS 2005年第17期1978-1980,共3页
关键词 重组DNA技术 分子生物学 基因工程 遗传学研究 分子遗传学 自然科学 20世纪 生命科学 进化论
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钙离子载体诱导人外周血单个核细胞向树突状细胞分化的信号转导 被引量:2
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作者 吴军 杨德懋 +4 位作者 杨太成 王晓怀 王捷 陈政良 富宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期540-543,共4页
目的 :初步探讨钙离子载体 (calciumionophore,CI)诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)向树突状细胞 (DC)分化的细胞信号转导途径。方法 :分离健康献血者的PBMC ,加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L ,部分细胞预先用W 7(10 μmol/L)或CsA(0 ... 目的 :初步探讨钙离子载体 (calciumionophore,CI)诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)向树突状细胞 (DC)分化的细胞信号转导途径。方法 :分离健康献血者的PBMC ,加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L ,部分细胞预先用W 7(10 μmol/L)或CsA(0 .5mg/L)或KT5 92 6 (1μmol/L)处理 30min后 ,再加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L。体外培养 4 0h后 ,于相差显微镜下观察细胞的形态 ;流式细胞仪检测细胞的表面标志 ;用MTT比色法检测上述细胞刺激同种异体T细胞的增殖作用。结果 :与 10 0 μg/L的A2 3187及rhGM CSF共同培养 4 0h的健康献血者的PBMC ,出现典型的树突状突起 ,同时CD83、CD80及CD86分子的表达上调 ,CD14分子的表达下调 ,刺激同种异体T细胞增殖的能力增强 ;而预先用W 7或CsA或KT5 92 6处理 30min后、再给予rhGM CSF及A2 3187处理的PBMC ,其形态、表面标志物及对T细胞的刺激增殖能力 ,均不同程度的受到抑制。结论 :CI诱导的PBMC向DC的分化 ,可能受控于Ca2 + 展开更多
关键词 钙离子载体 树突状细胞 细胞信号转导 外周血单个核细胞
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