SOCS2对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响 被引量：1

1

作者 李秋云 田芯源 +5 位作者 廖文圣 张焕容 任玉鹏 杨发龙 朱江江 向华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2226-2240,共15页

细胞因子信号转导抑制因子2 (suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)在动物体内参与调节多种生理和病理过程,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期、肿瘤和炎症反应等。本研究在首次克隆山羊SOCS2基因的基础上,研究过表达和干扰SOCS2表... 细胞因子信号转导抑制因子2 (suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)在动物体内参与调节多种生理和病理过程,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期、肿瘤和炎症反应等。本研究在首次克隆山羊SOCS2基因的基础上,研究过表达和干扰SOCS2表达对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响。以1周岁的健康简州大耳羊(6只)的心、肝、脾、肺、肾、瘤胃、大肠、小肠和山羊鼻甲骨细胞共9个样本为模板,采用反转录PCR技术克隆山羊SOCS2基因CDS区序列,并进行序列分析。利用RT-qPCR技术检测SOCS2基因在不同组织中的表达。将克隆得到的SOCS2基因CDS区连接载体构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2。根据山羊SOCS2基因序列设计合成并筛选有效siRNA。利用Lipofectamine^(TM) 3000试剂将pcDNA3.1-SOCS2和siRNA片段分别转染至鼻甲骨细胞,采用蛋白免疫印迹技术检测SOCS2蛋白表达,MTT法检测SOCS2对细胞增殖的影响,流式细胞术检测SOCS2对细胞周期和凋亡的影响,并利用RT-qPCR技术检测细胞周期相关基因p21、CDK2和凋亡相关基因Caspase3、Caspase7、PARP1、p53、Bax、BCL2L11和Bcl-2的转录水平。结果显示,成功扩增山羊SOCS2基因序列,总长为1 065 bp, CDS区长为597 bp,编码198个氨基酸残基。SOCS2基因在肝中表达水平最高;SOCS2可以抑制细胞增殖。成功构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2,且该基因在鼻甲骨细胞内成功表达。SOCS2过表达可导致G2/M+S期细胞数量显著增加,且下调CDK2和p21基因的mRNA表达;促进细胞凋亡,且上调Caspase3、Caspase7、Bax、p53、BCL2L11、Bcl-2基因的mRNA表达,PARP1表达水平无显著变化。而干扰SOCS2表达后,G0/G1期细胞数量显著升高,且CDK2和p21基因的mRNA表达上调;细胞凋亡被抑制,且Caspase3、Bax、p53、PARP1基因的mRNA表达下调,Caspase7、BCL2L11、Bcl-2基因表达水平无显著变化。综上所述,SOCS2可将细胞周期阻滞在G2/M+S期,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。研究结果为全面揭示山羊SOCS2功能提供试验数据。 展开更多

关键词 山羊 SOCS2 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

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山羊中绵羊肺炎支原体的分离及鉴定 被引量：22

2

作者 杨发龙 王华 +1 位作者 岳华 王永 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期177-180,共4页

从四川省乐至县发生胸膜肺炎性传染病的山羊群中采集12个鼻拭子及4个肺组织病料,进行病原分离培养和特异性PCR检测。结果从9个鼻拭子和4个肺组织中分离到支原体,经鉴定均为绵羊肺炎支原体,未发现丝状支原体簇成员及多杀性巴氏杆菌和溶... 从四川省乐至县发生胸膜肺炎性传染病的山羊群中采集12个鼻拭子及4个肺组织病料,进行病原分离培养和特异性PCR检测。结果从9个鼻拭子和4个肺组织中分离到支原体,经鉴定均为绵羊肺炎支原体,未发现丝状支原体簇成员及多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌。结果表明,绵羊肺炎支原体是引起该山羊群发生胸膜肺炎的病原,同时说明绵羊肺炎支原体也是山羊支原体性肺炎的重要病原之一。 展开更多

关键词 山羊 绵羊肺炎支原体 分离 鉴定

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基于基因C型鸭甲肝病毒VP1重组蛋白的鸭甲肝病毒抗体ELISA检测方法的建立 被引量：5

3

作者 杨发龙 张焕容 +2 位作者 程方明 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1148-1153,共6页

以纯化的基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白作为包被抗原,建立检测DHAV-C抗体的间接ELISA方法。结果表明,试验的最佳条件:用pH9.6、0.05 mol·L-1的碳酸盐缓冲液将包被抗原稀释成5μg·mL-1,4℃包被过夜,抗体稀释度为1∶100... 以纯化的基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白作为包被抗原,建立检测DHAV-C抗体的间接ELISA方法。结果表明,试验的最佳条件:用pH9.6、0.05 mol·L-1的碳酸盐缓冲液将包被抗原稀释成5μg·mL-1,4℃包被过夜,抗体稀释度为1∶100,HRP酶标羊抗鸭IgG稀释度为1∶5 000,封闭液为含10%脱脂乳的0.01mol·L-1 PBS,37℃封闭2h,血清稀释液为含1%BSA的PBS,抗体反应时间为60min,酶标羊抗鸭IgG反应时间为30min,底物作用时间为15min,临界值为OD450nm≥0.474。该方法重复性好,批内变异系数为2.03%~2.95%,批间变异系数为3.28%~7.38%,与鸭圆环病毒(DUCV)、鸭乙型肝炎病毒(DHBV)、鸭瘟病毒(DPV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸭抗大肠杆菌、鸭抗金黄色葡萄球菌、鸭抗沙门菌、鸭抗禽多杀性巴氏杆菌以及鸭疫里默杆菌阳性血清无交叉反应,而与基因A型鸭甲肝病毒(DHAV-A)阳性血清有交叉反应,表明该方法可以作为检测DHAV-C和DHAV-A抗体的通用ELISA方法。与中和试验相比,阳性血清检测符合率为80%,阴性血清检测符合率为100%。初步临床应用表明:该方法可用于雏鸭母源抗体和免疫后抗体消长的检测。本研究基于DHAV-C VP1重组蛋白建立的间接ELISA方法可用于基因A型和C型鸭甲型肝炎的血清流行病学调查和抗体检测。 展开更多

关键词 基因C型鸭甲肝病毒 VP1蛋白 间接ELISA 抗体检测

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一流本科专业建设背景下基于PBL的《猪生产学》混合式教学模式探索与实践

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作者 高彦华 柏雪 +6 位作者 杨发龙 黄艳玲 徐孟 王茜 李飙 张磊 张正帆 《现代畜牧科技》 2024年第10期152-155,共4页

为落实立德树人根本教育任务,提高课程育人质量,《猪生产学》教学团队确立了“一个中心,两类课堂,三维育人”的教学目标,以“高阶性、创新性和挑战度”为课程建设标准,重构教学内容,基于PBL理念探索混合式教学方式和建设过程式评价体系... 为落实立德树人根本教育任务,提高课程育人质量,《猪生产学》教学团队确立了“一个中心,两类课堂,三维育人”的教学目标,以“高阶性、创新性和挑战度”为课程建设标准,重构教学内容,基于PBL理念探索混合式教学方式和建设过程式评价体系,探索课程混合式教学改革。实践成效表明,课程内容和教学资源全面优化,学生培养成果显著,教学团队的创能能力和教学水平得到明显提升,为动物科学专业一流课程建设提供了参考。 展开更多

关键词 一流本科专业建设 PBL 猪生产学 混合式教学

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川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查 被引量：2

5

作者 杨发龙 张焕容 +3 位作者 王言轩 周子雄 王远微 汤承 《中国动物检疫》 CAS 2013年第10期43-45,共3页

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%(272/1070),虎红平板凝... 同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%(272/1070),虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%(136/1070),而试管凝集试验检测阳性率为9.1%(97/1070)。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。 展开更多

关键词 牦牛 布鲁氏菌病 血清流行病学 间接ELISA 虎红平板凝集试验 试管凝集试验

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采用实时定量PCR技术评价三种药物体外抗鸭瘟病毒效果 被引量：1

6

作者 杨发龙 汤承 +2 位作者 张焕容 谢青 岳华 《中国兽药杂志》 2008年第7期5-7,共3页

采用实时定量PCR技术,对阿昔洛韦、利巴韦林及禽重组干扰素等三种药物体外抗鸭瘟病毒的作用进行了评价。结果显示,阿昔洛韦能有效抑制鸭瘟病毒在鸭胚成纤维细胞中的增殖。研究结果为抗鸭瘟病毒药物筛选提供了一种有效的技术平台,同时提... 采用实时定量PCR技术,对阿昔洛韦、利巴韦林及禽重组干扰素等三种药物体外抗鸭瘟病毒的作用进行了评价。结果显示,阿昔洛韦能有效抑制鸭瘟病毒在鸭胚成纤维细胞中的增殖。研究结果为抗鸭瘟病毒药物筛选提供了一种有效的技术平台,同时提示阿昔洛韦制剂有可能作为一种有效的抗鸭瘟病毒药物用于其感染的防治。 展开更多

关键词 鸭瘟病毒 荧光定量PCR 药效评价

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山羊支原体性肺炎流行病学调查 被引量：41

7

作者 王华 杨发龙 +1 位作者 王永 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期210-214,共5页

山羊支原体性肺炎是威胁山羊养殖的重要传染病,为了解其流行情况,对四川省主要山羊养殖地区的山羊支原体性肺炎进行了流行病学调查。从四川省7个地区山羊养殖场采集肺脏和鼻腔棉拭子样本共135份,经过分离鉴定得到42株支原体,其中绵羊肺... 山羊支原体性肺炎是威胁山羊养殖的重要传染病,为了解其流行情况,对四川省主要山羊养殖地区的山羊支原体性肺炎进行了流行病学调查。从四川省7个地区山羊养殖场采集肺脏和鼻腔棉拭子样本共135份,经过分离鉴定得到42株支原体,其中绵羊肺炎支原体36株,丝状支原体6株;其中6个羊场仅分离到绵羊肺炎支原体,1个羊场同时分离到绵羊肺炎支原体和丝状支原体。本试验结果表明,绵羊肺炎支原体是引起四川省山羊支原体性肺炎的主要病原,个别地方存在绵羊肺炎支原体和丝状支原体混合感染。 展开更多

关键词 山羊支原体性肺炎 绵羊肺炎支原体 丝状支原体 流行病学

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绵羊肺脏中溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其药物敏感性分析 被引量：20

8

作者 冯旭飞 刀筱芳 +3 位作者 王志敏 汤承 李定霏 杨发龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期224-228,共5页

为了对引起绵羊肺炎的病原进行分离、鉴定和耐药性分析,本研究通过无菌采集绵羊肺脏并对细菌进行分离纯化、生化试验和PCR鉴定,然后对所得到的溶血性曼氏杆菌分离株进行药物敏感性研究。结果显示,分离纯化得到的细菌为革兰氏阴性短杆菌... 为了对引起绵羊肺炎的病原进行分离、鉴定和耐药性分析,本研究通过无菌采集绵羊肺脏并对细菌进行分离纯化、生化试验和PCR鉴定,然后对所得到的溶血性曼氏杆菌分离株进行药物敏感性研究。结果显示,分离纯化得到的细菌为革兰氏阴性短杆菌,具有弱溶血性,经生化试验和PCR鉴定为溶血性曼氏杆菌;耐药性分析显示该菌株对恩诺沙星、庆大霉素、四环素等大部分药物敏感。本研究为绵羊溶血性曼氏杆菌感染的有效防制提供有用的信息和数据。 展开更多

关键词 绵羊 溶血性曼氏杆菌 鉴定 耐药性

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荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平 被引量：9

9

作者 岳华 黄兴 +4 位作者 杨发龙 李明义 范根成 马莉 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期784-790,共7页

白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,并采用该方法对26-50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4... 白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,并采用该方法对26-50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10^-4-10^-9和10^-3-10^-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%-2.15%和1.17%-3.68%,组间变异系数分别在1.16%-3.25%和1.66%-2.86%。26-50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法。 展开更多

关键词 荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 MRNA

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鸭源致病性大肠杆菌耐氟苯尼考floR基因的克隆与序列分析 被引量：13

10

作者 于学辉 李旭玲 +1 位作者 杨发龙 海泉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期84-87,共4页

为调查鸭源致病性大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的存在情况,利用PCR对20株临床分离的耐氟苯尼考的致病性大肠杆菌进行floR分子检测,分子检测结果显示,全部菌株floR基因阳性;对其中2株大肠杆菌的氟苯尼考耐药基因floR进行了克隆和测序,... 为调查鸭源致病性大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的存在情况,利用PCR对20株临床分离的耐氟苯尼考的致病性大肠杆菌进行floR分子检测,分子检测结果显示,全部菌株floR基因阳性;对其中2株大肠杆菌的氟苯尼考耐药基因floR进行了克隆和测序,结果表明,鸭源大肠杆菌floR基因片段的克隆测序结果与预期所得片段结果相符,长度为753 bp,2株鸭源大肠杆菌floR基因的同源性为99.6%,与牛源、鸡源等floR基因的同源性为84.8%-99.9%。系统发育分析发现,2株鸭源大肠杆菌floR基因不在同一支上,亲缘关系较远,表明floR基因的亲缘关系与该基因的来源动物无关。 展开更多

关键词 鸭 致病性大肠杆菌 氟苯尼考 floR基因 克隆测序

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成都市区犬猫狂犬病病毒和弓形虫感染的调查 被引量：7

11

作者 张焕容 程方明 +1 位作者 杨发龙 杨金福 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期129-131,共3页

为了解四川省成都市区家养犬、猫狂犬病病毒及弓形虫的感染情况,采用商品化狂犬病病毒和弓形虫抗原快速检测试纸卡,对2010年8～10月间来自成都市区的103份家养犬以及75份家猫的唾液和血液样品进行检测;同时采用文献报道的PCR方法对家养... 为了解四川省成都市区家养犬、猫狂犬病病毒及弓形虫的感染情况,采用商品化狂犬病病毒和弓形虫抗原快速检测试纸卡,对2010年8～10月间来自成都市区的103份家养犬以及75份家猫的唾液和血液样品进行检测;同时采用文献报道的PCR方法对家养犬血液样品中的弓形虫核酸进行检测。结果显示,103份家养犬唾液样品狂犬病病毒抗原均为阴性,而75份家猫唾液样品中,检出阳性样品5份(阳性率6.7%),可疑样品7份;103份家养犬血液样品弓形虫抗原阳性样品33份(32.0%),可疑样品22份,75份家猫血液样品中,检出阳性样品2份(阳性率2.7%),可疑样品3份。弓形虫核酸PCR检测结果显示,96份家养犬血液样品弓形虫核酸阳性样品57份(阳性率59.4%),与弓形虫抗原阳性和可疑样品总和所占比例基本一致(53.4%)。提示应重视源于家猫的狂犬病病毒和家养犬弓形虫对人的威胁。 展开更多

关键词 犬 猫 狂犬病 弓形虫

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SYBR Green Ⅰ实时定量PCR快速检测鸭瘟病毒的研究 被引量：11

12

作者 汤承 索化夷 +2 位作者 岳华 杨发龙 汤明 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第9期25-27,共3页

根据GenBank中鸭瘟病毒(DPV)UL6和UL7基因的保守序列,设计了一对特异性引物,扩增位于UL6和UL7基因第891～991位长度为101bp片断。以DPV标准强毒株DNA为模板,建立了SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒的方法,用该方法检测鸭瘟标准... 根据GenBank中鸭瘟病毒(DPV)UL6和UL7基因的保守序列,设计了一对特异性引物,扩增位于UL6和UL7基因第891～991位长度为101bp片断。以DPV标准强毒株DNA为模板,建立了SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒的方法,用该方法检测鸭瘟标准强毒、疫苗毒及野毒株均为阳性,检测其他受试的非鸭瘟病毒DNA均为阴性,对鸭瘟强毒和疫苗毒人工感染鸭胚尿囊液的检出率均为100%,对6个临床送检样本的检出率为6/6,与病毒分离鉴定结果一致;最小检出量为1.57×104拷贝/ul。 展开更多

关键词 鸭瘟病毒 UL6和UL7基因 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR

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成都地区犬细小病毒VP2基因克隆分析及基因型鉴定 被引量：5

13

作者 杨晓农 张焕容 +9 位作者 杨发龙 于学辉 龙虎 刘群 陈世界 严玉宝 余华 王成东 项振义 王斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期105-110,共6页

根据GenBank中犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2基因序列设计合成两对特异性引物1F/1R和2F/2R,从疑似CPV感染病犬的粪便病料中提取DNA作为模板,分段扩增涵盖VP2基因的两个片段,大小分别为1325和758bp,并进行克隆、测序,通过拼接得... 根据GenBank中犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2基因序列设计合成两对特异性引物1F/1R和2F/2R,从疑似CPV感染病犬的粪便病料中提取DNA作为模板,分段扩增涵盖VP2基因的两个片段,大小分别为1325和758bp,并进行克隆、测序,通过拼接得到11条长度为1755bp的VP2基因完整序列。核苷酸同源性分析表明,扩增得到的11个完整VP2基因序列与GenBank中发布的21株国内外参考毒株比较,核苷酸同源性为96.2%～99.8%。采用DNAStar软件分析,预测VP2蛋白可能成为B细胞表位的区段位于Met1-Val38、Met73-Val82、Met96-Ala103、Lys151-Thr170、Gly235-Phe243、Leu294-Phe303、Ala359-Thr399、Ile469-His483、Ala503-Arg520、Lys570-Tyr584。将扩增获得的VP2基因编码的氨基酸序列与CPV参考毒株进行比较,第426位和第555位氨基酸残基分别为Asp和Val,鉴定出本试验得到的CPV基因型均为2a型,初步证实成都地区仍以CPV-2a为主要流行毒株。 展开更多

关键词 犬细小病毒(CPV) VP2基因 克隆 基因型

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山羊临床型乳房炎主要病原菌分离鉴定及药敏试验 被引量：5

14

作者 潘玉琨 谢珊珊 +2 位作者 党斌 李璞君 杨发龙 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期122-125,共4页

为调查四川省资阳市某规模化羊场暴发乳房炎的主要病原菌,无菌采集患病羊乳样45份,然后进行细菌分离、纯化及PCR鉴定,同时对分离菌株进行耐药性试验。共分离、鉴定出5株大肠埃希菌、30株金黄色葡萄球菌和25株链球菌。药敏试验结果显示,... 为调查四川省资阳市某规模化羊场暴发乳房炎的主要病原菌,无菌采集患病羊乳样45份,然后进行细菌分离、纯化及PCR鉴定,同时对分离菌株进行耐药性试验。共分离、鉴定出5株大肠埃希菌、30株金黄色葡萄球菌和25株链球菌。药敏试验结果显示,分离菌株对青霉素、氨苄西林、庆大霉素、红霉素及四环素类等多种药物有耐药性。本研究为该场山羊乳房炎的防控提供了依据。 展开更多

关键词 山羊 乳房炎 病原菌 分离鉴定 耐药性

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冻藏物流过程中制冷故障对生鲜牦牛肉品质的影响 被引量：3

15

作者 李思宁 唐善虎 +2 位作者 王柳 邱翔 杨发龙 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期246-251,共6页

对生鲜牦牛背最长肌进行不同时间的制冷故障实验,模拟冻藏物流过程中制冷故障对牦牛肉品质及质构的影响,分别测定牦牛肉解冻损失率、蒸煮损失率、pH值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、色度、弹性、咀嚼性,并观察肌纤维组织... 对生鲜牦牛背最长肌进行不同时间的制冷故障实验,模拟冻藏物流过程中制冷故障对牦牛肉品质及质构的影响,分别测定牦牛肉解冻损失率、蒸煮损失率、pH值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、色度、弹性、咀嚼性,并观察肌纤维组织结构。结果表明,随着制冷故障时间的延长,牦牛肉的解冻损失率、蒸煮损失率、L*值和b*值呈极显著增加的趋势(P<0.01),a*值、弹性呈极显著下降的趋势(P<0.01),pH值、咀嚼性呈显著下降的趋势(P<0.05),TBA值呈显著增加的趋势(P<0.05);肌纤维出现了更大程度的间隙和断裂,肌束变得更加混乱,冰晶留下的间隙逐渐增大;制冷故障时间与各品质及质构指标间呈极显著相关(P<0.01)。因此,牦牛肉在冻藏物流过程中,制冷故障时间的长短对肉品质有重要的影响,应防止制冷故障引起的温度波动对肉品质造成的损失。 展开更多

关键词 牦牛肉 制冷故障 品质 冻藏物流

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奶牛隐性乳房炎主要病原菌分离鉴定及耐药性分析 被引量：4

16

作者 韩笑 刀筱芳 +2 位作者 张焕容 汤承 杨发龙 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期131-134,共4页

通过鉴定引起成都某奶牛场隐性乳房炎的病原,并分析其耐药性,为临床治疗提供依据。从20头患隐性乳房炎奶牛中收集奶样,进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验。结果从6份奶样中分离出大肠埃希菌,检出率为30%,未鉴定出金黄色葡萄球菌、无乳... 通过鉴定引起成都某奶牛场隐性乳房炎的病原,并分析其耐药性,为临床治疗提供依据。从20头患隐性乳房炎奶牛中收集奶样,进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验。结果从6份奶样中分离出大肠埃希菌,检出率为30%,未鉴定出金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及停乳链球菌等。药敏试验结果表明,分离的大肠埃希菌菌株对17种药物敏感,对7种中介,对8种耐药。研究结果为该奶牛场隐性乳房炎药物防控提供了可靠的依据。 展开更多

关键词 奶牛 隐性乳房炎 病原菌 大肠埃希菌 耐药性

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空肠弯曲菌耐药机制研究进展 被引量：4

17

作者 海泉 张焕容 +1 位作者 杨发龙 岳华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第2期61-64,共4页

空肠弯曲菌是一种全球关注的人兽共患病病原菌,由于滥用抗生素而造成其耐药性不断增强,成为公共卫生日益关注的问题。各类抗生素作用位点的基因突变是诱发空肠弯曲菌对各类临床常用的抗生素产生耐药的主要原因,同时细菌对药物的外排机... 空肠弯曲菌是一种全球关注的人兽共患病病原菌,由于滥用抗生素而造成其耐药性不断增强,成为公共卫生日益关注的问题。各类抗生素作用位点的基因突变是诱发空肠弯曲菌对各类临床常用的抗生素产生耐药的主要原因,同时细菌对药物的外排机制也在其对抗生素耐药过程中发挥了一定的作用。文章对空肠弯曲菌对各类临床常用抗生素的耐药机制做一综述。 展开更多

关键词 空肠弯曲菌 耐药机制 基因突变 药物外排

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鸭IFN-γ mRNA实时荧光定量RT-PCR方法的建立 被引量：7

18

作者 谢秀兰 汤承 +1 位作者 杨发龙 岳华 《动物医学进展》 CSCD 2008年第5期17-20,共4页

为建立检测鸭IFN-γ mRNA表达的实时荧光定量RT—PCR方法，根据GenBank中鸭IFN-γ基因序列，在保守区域设计并合成一对引物，采用SYBR Green Ⅰ染料，建立检测鸭IFN-γ mRNA的实时荧光定量RT-PCR方法（real-time RT-PCR）。试验以PCR产... 为建立检测鸭IFN-γ mRNA表达的实时荧光定量RT—PCR方法，根据GenBank中鸭IFN-γ基因序列，在保守区域设计并合成一对引物，采用SYBR Green Ⅰ染料，建立检测鸭IFN-γ mRNA的实时荧光定量RT-PCR方法（real-time RT-PCR）。试验以PCR产物为标准品，建立标准曲线，随后进行熔解曲线分析和稳定性研究。结果Ct值线性范围为12．0～33．0，相关系数为0．997；熔解曲线显示产物为单特异峰，Tm为82．5±0℃；组内变异系数（CV％）为4．26％；纽间试验无显著差异（P〉0．05）。建立的检测鸭IFN-γ mRNA的Real—time RT—PCR方法具有检测范围广、扩增效率高、特异性好、重复性和稳定性良好等特点。 展开更多

关键词 鸭 Γ干扰素 实时荧光定量RT—PCR SYBR Green Ⅰ

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小鼠-βactin mRNA荧光定量PCR方法的建立 被引量：4

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作者 唐佳佳 岳华 +1 位作者 杨发龙 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第7期127-130,共4页

本研究旨在建立定量检测小鼠-βactin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法。根据GenBank中登录的小鼠-βactin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR GreenⅠ技术的小鼠-βacti... 本研究旨在建立定量检测小鼠-βactin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法。根据GenBank中登录的小鼠-βactin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR GreenⅠ技术的小鼠-βactin mRNA荧光定量PCR方法。结果表明,该方法扩增效率高（97.7%）,定量线性范围广（9.3×102~9.3×107拷贝/反应）,可重复性强,无非特异性扩增和引物二聚体,最小检出量为9.3拷贝/反应。试验结果为-βactin作为内参基因用于小鼠相关基因转录水平分析提供了基础。 展开更多

关键词 小鼠 Β-ACTIN基因 实时荧光定量PCR

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藏绵羊肺脏中链球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：2

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作者 冯旭飞 王志敏 +3 位作者 吴禹熹 潘玉琨 党斌 杨发龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期232-235,共4页

本试验通过无菌采集西藏地区绵羊肺脏,然后进行细菌分离、纯化及PCR鉴定;同时,对分离的链球菌菌株进行药物敏感性研究,以期为生产实践中对该病原的防制提供参考信息。结果显示,纯化所得到的细菌呈革兰氏阳性链球状,经PCR、克隆、测序鉴... 本试验通过无菌采集西藏地区绵羊肺脏,然后进行细菌分离、纯化及PCR鉴定;同时,对分离的链球菌菌株进行药物敏感性研究,以期为生产实践中对该病原的防制提供参考信息。结果显示,纯化所得到的细菌呈革兰氏阳性链球状,经PCR、克隆、测序鉴定为链球菌;药敏试验结果显示分离菌株对复方新诺明、恩诺沙星、庆大霉素及四环素等大部分药物敏感。本研究为西藏地区绵羊链球菌病的有效防制提供参考。 展开更多

关键词 绵羊肺脏 链球菌 鉴定 耐药性

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