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长毛对虾酸性磷酸酶不可逆失活过程中的底物保护研究 被引量:2
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作者 杨佩真 陈素丽 陈清西 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期94-98,共5页
根据酶活性不可逆改变的动力学方法,研究了长毛对虾(Penaeuspenicilatus)酸性磷酸酶在变性剂胍,脲作用下的不可逆失活.结果表明,酶在不同变性剂中的失活行为不尽相同.测得该酶在1.2mol/L盐酸胍,3m... 根据酶活性不可逆改变的动力学方法,研究了长毛对虾(Penaeuspenicilatus)酸性磷酸酶在变性剂胍,脲作用下的不可逆失活.结果表明,酶在不同变性剂中的失活行为不尽相同.测得该酶在1.2mol/L盐酸胍,3mol/L脲中的k0/k0′分别为5.0和4.3.k0>k0′的事实说明游离酶比酶底物复合物具有更大的失活速度常数,底物的结合对酶的失活有明显的保护作用.酶底物复合物较大的抗失活能力也从一侧面证实了活性中心的柔曲性理论. 展开更多
关键词 对虾 长毛对虾 酸性磷酸酶 失活 底物保护
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金属离子对长毛对虾酸性磷酸酶的影响 被引量:14
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作者 陈素丽 陈清西 +4 位作者 丘文杰 李昀 杨佩真 林达挺 颜思旭 《台湾海峡》 CAS CSCD 1998年第1期96-99,共4页
本文研究几种金属离子分别对健康虾和病虾酸性磷酸酶ACPase(EC3.1.3.2)活力的影响。结果表明,Ni2+、Mg2+、Cd2+对酶无明显抑制作用,Zn2+、Cu2+、Hg2+对酶活力抑制明显。当Hg2+离子浓度达0.5mmol/dm3时,酶活力被抑制96... 本文研究几种金属离子分别对健康虾和病虾酸性磷酸酶ACPase(EC3.1.3.2)活力的影响。结果表明,Ni2+、Mg2+、Cd2+对酶无明显抑制作用,Zn2+、Cu2+、Hg2+对酶活力抑制明显。当Hg2+离子浓度达0.5mmol/dm3时,酶活力被抑制96%(健康虾)和95%(病虾);各金属离子对酶的抑制强度依次为Hg2+>Cu2+>Zn2+>Pb2+>Cd2+、Mg2+>Ni2+;健康虾酶对Hg2+、Cuv、Zn2+、Pb2+敏感性大于病虾酶。随着Cu2+、Hg2+浓度加大,抑制作用增强,表现为竞争性抑制类型,抑制常数Ki值分别为1.6×10-4mol/dm3和和1.0×10-4mol/dm3。不同浓度Hg2+离子分别与酶作用后,测定酶的紫外吸收光谱和荧光发射光谱,从光谱的变化表明,Hg2+离子影响酶活力同时也影响酶的构象。 展开更多
关键词 长毛对虾 酸性磷酸酶 金属离子 光谱分析
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乙二醇对长毛对虾酸性磷酸酶活力与构象的影响 被引量:7
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作者 陈清西 周兴旺 +1 位作者 杨佩真 陈素丽 《台湾海峡》 CAS CSCD 1999年第4期398-402,共5页
应用荧光光谱、紫外差示光谱及园二色性光谱等生物物理技术研究长毛对虾酸性磷酸酶经乙二醇微扰后的分子构象变化情况,结果表明乙二醇对酶分子构象有显著的影响。酶的内源荧光强度随乙二醇浓度增大而增强,Tyr、 Trp残基的微环... 应用荧光光谱、紫外差示光谱及园二色性光谱等生物物理技术研究长毛对虾酸性磷酸酶经乙二醇微扰后的分子构象变化情况,结果表明乙二醇对酶分子构象有显著的影响。酶的内源荧光强度随乙二醇浓度增大而增强,Tyr、 Trp残基的微环境发生明显的变化;紫外差示光谱在 220和 275um出现2个负峰,而 236um出现正峰, 220和236 um的差吸收与酶分子主链去折叠有关,而 275 um主要与 Trp残基微环境变化有关;乙二醇变性后,酶的园二色性光谱变化说明酶分子二级结构也发生了明显的变化。比较酶在乙二醇溶液中失活与去折叠的关系,结果表明:酶在乙二醇溶液中的失活作用明显快于构象的变化,说明酶活性中心处于对变性剂乙二醇较为敏感的区域。 展开更多
关键词 长毛对虾 酸性磷酸酶 酶构象与活力 乙二醇
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长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅱ) 被引量:5
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作者 陈素丽 陈清西 +4 位作者 杨佩真 丘文杰 林达挺 李昀 颜思旭 《台湾海峡》 CAS CSCD 1997年第2期201-204,共4页
用化学修饰剂pCMB、NBS、K试剂修饰长毛对虾Penaeuspenicilla-tusAlcock酸性磷酸酶(ACPase,EC3.1.3.2),在修饰剂作用下,酶活力明显下降,健康虾酶对修饰剂的敏感性(NBS除外)大都稍大于病虾酶。修饰酶的紫外280um吸收光谱以... 用化学修饰剂pCMB、NBS、K试剂修饰长毛对虾Penaeuspenicilla-tusAlcock酸性磷酸酶(ACPase,EC3.1.3.2),在修饰剂作用下,酶活力明显下降,健康虾酶对修饰剂的敏感性(NBS除外)大都稍大于病虾酶。修饰酶的紫外280um吸收光谱以及荧光340um发射光谱的变化,表明酶活力下降的同时酶构象也产生相应的变化。结果表明,酶分子的半胱氨酸残基、色氨酸残基以及门冬氨酸、谷氨酸β或γ验基与酶活力有关,是酶的催化功能基团。 展开更多
关键词 长毛对虾 酸性磷酸酶 功能基因 对虾
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长毛对虾磷酸酯酶的研究 被引量:10
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作者 陈素丽 陈清西 杨佩真 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期135-140,共6页
从长毛对虾 (Penaeuspenicillatus)头胸部、肌肉分别提取纯化碱性磷酸酶ALPase(EC 3 1 3 1)和酸性磷酸酶ACPase (EC 3 1 3 2 ) ,经快速蛋白液相色谱 (FPLC)检测AL Pase ,聚丙烯酰胺凝胶电泳以及等电聚焦电泳检测ACPase ,得到单一纯酶 .A... 从长毛对虾 (Penaeuspenicillatus)头胸部、肌肉分别提取纯化碱性磷酸酶ALPase(EC 3 1 3 1)和酸性磷酸酶ACPase (EC 3 1 3 2 ) ,经快速蛋白液相色谱 (FPLC)检测AL Pase ,聚丙烯酰胺凝胶电泳以及等电聚焦电泳检测ACPase ,得到单一纯酶 .ALPase紫外特征吸收峰在 2 78nm处 ,荧光激发峰在 2 82nm处 ,发射光谱特征峰在 340nm处 .ACPase在 2 80nm处有紫外吸收特征峰 ,荧光激发峰在 2 84nm处 ,发射峰在 347nm处 .分别测定了酶的相对分子质量、亚基数、氨基酸组成、等电点、酶水解对硝基苯磷酸二钠 (pNPP)的最适温度 ,最适pH ,米氏常数Km 值 ,金属离子Mg2 +、Cu2 +、Hg2 +,有机溶剂甲醇、乙醇、乙二醇 ,化学修饰剂BrAe、NBS、pCMB等以及蛋白质变性剂胍、脲等对酶活力的影响 .比较研究健康虾和病虾ACPase酶活力及酶动力学特征常数的变化 (健康虾酶Km=0 0 8mmol/L ,病虾酶Km=0 143mmol/L) .病虾酶Km 值明显增大 ,表现对底物亲和力下降 .活化能明显增大 (健康虾酶 4 1 0 3kJ·mol- 1 ·L- 1 ,病虾酶 4 5 7kJ·mol- 1 ·L- 1 )表明酶的催化能力下降 . 展开更多
关键词 长毛对虾(Penaeuspenicillatus) 磷酸酯酶
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长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅰ) 被引量:9
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作者 陈素丽 陈清西 +4 位作者 林达挺 李昀 杨佩真 丘文杰 颜思旭 《台湾海峡》 CAS CSCD 1997年第1期80-84,共5页
采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾(Penaeuspenicillatus)酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明,精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团,当酶活力下降时,伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化,显示酶活力与构系密... 采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾(Penaeuspenicillatus)酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明,精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团,当酶活力下降时,伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化,显示酶活力与构系密切相关健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。 展开更多
关键词 长毛对虾 酸性磷酸酶 功能基因 对虾
全文增补中
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