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CX26不同结构域错义突变体的表达和定位
被引量：
1
1
作者
杨中纯
肖自安
谢鼎华
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期249-253,共5页
目的探讨CX26蛋白质的9个结构域上的不同错义突变体在细胞内的表达及功能改变的异同,初步研究CX26不同错义突变体的致聋机理。方法在CX26的9个结构域中各选择1个致聋的错义突变(p.S19T、p.R32H、p.E47K、p.V84L、p.V95M、p.R143W、p.R1...
目的探讨CX26蛋白质的9个结构域上的不同错义突变体在细胞内的表达及功能改变的异同,初步研究CX26不同错义突变体的致聋机理。方法在CX26的9个结构域中各选择1个致聋的错义突变(p.S19T、p.R32H、p.E47K、p.V84L、p.V95M、p.R143W、p.R165W、p.S199F、p.L214P),应用重叠区扩增基因拼接法和长引物快速法,构建成与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的载体,野生型CX26-EGFP作对照,脂质体转染HeLa细胞,Westernblot分析蛋白的表达,共聚焦显微镜下观察各突变体在细胞膜上有无间隙连接斑形成。结果 CX26的9个结构域上的各1个错义突变体在HeLa细胞中均有表达,其中p.S19T、p.E47K、p.V84L、p.V95M和p.vR165W突变体能在细胞膜上表达并形成间隙连接斑,p.R32H、p.R143W、p.S199F和p.L214P突变体在细胞浆中表达,在细胞膜无表达,无间隙连接斑形成。结论 CX26的p.S19T、p.E47K、p.V84L、p.V95M和p.R165W突变体在细胞内能被转运到细胞膜并形成间隙连接,而p.R32H、p.R143W、p.S199F和p.L214P突变体失去被转运到细胞膜的功能,不能形成间隙连接。CX26的不同错义突变的致聋机制可能不同,与突变点所在的结构域可能没有相关性。
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关键词
连接蛋白26(CX26)
突变体
表达
间隙连接
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职称材料
Stathmin与间隙连接蛋白26相互作用并在小鼠耳蜗表达
2
作者
杨中纯
肖自安
谢鼎华
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第1期51-56,共6页
目的筛选和鉴定连接蛋白26(connexin26,CX26)的相互作用蛋白质,分析其在小鼠内耳的表达,探讨与听觉的关系。方法酵母双杂交技术筛选CX26的相互作用蛋白质。在体外真核细胞表达系统HEK293细胞内过表达人CX26和相互作用蛋白质,观察它们的...
目的筛选和鉴定连接蛋白26(connexin26,CX26)的相互作用蛋白质,分析其在小鼠内耳的表达,探讨与听觉的关系。方法酵母双杂交技术筛选CX26的相互作用蛋白质。在体外真核细胞表达系统HEK293细胞内过表达人CX26和相互作用蛋白质,观察它们的定位,并用免疫共沉淀实验观察在体外真核细胞中是否存在相互作用。进一步在小鼠脑组织中用免疫共沉淀方法验证CX26和相互作用蛋白质在真核生物体内的相互作用。逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析相互作用蛋白质在小鼠耳蜗的表达。结果酵母双杂交实验筛选和鉴定到stathmin与CX26相互作用,两者在体外过表达系统HEK293真核细胞中有共定位,免疫共沉淀实验证实在体外真核细胞和真核生物体内存在相互作用,而且stathmin在小鼠耳蜗表达。结论stathmin与CX26相互作用,并且在小鼠耳蜗表达。
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关键词
STATHMIN
CX26
相互作用蛋白质
酵母双杂交
免疫共沉淀
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职称材料
伴骨导听力下降的分泌性中耳炎临床特征及疗效分析
被引量：
12
3
作者
徐敏
冯永
+5 位作者
敬前程
杨中纯
文杰
康晓明
邵甸然
龚巍
《中华耳科学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第1期52-56,共5页
目的探讨伴有骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的临床特征及疗效,分析其可能原因,为临床诊治提供借鉴。方法分析2018年11月至2022年3月于我院接受治疗的23例(31耳)伴骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的一般临床资料、治疗方案及疗效。结...
目的探讨伴有骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的临床特征及疗效,分析其可能原因,为临床诊治提供借鉴。方法分析2018年11月至2022年3月于我院接受治疗的23例(31耳)伴骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的一般临床资料、治疗方案及疗效。结果患耳侧别:双耳8例,左耳11例,右耳4例;伴随症状:耳鸣16耳,耳闷14耳,耳痛4耳,眩晕3耳;鼓室导抗图:“B”型图27耳,“C”型图3耳,“AS”型图1耳;纯音听阈:入院气导平均听阈(59.9±18.7)dB HL,骨导平均听阈(34.7±14.6)dB HL,治疗后气导平均听阈(42.6±16.3)dB HL,骨导平均听阈(26.9±12.3)dB HL;治疗方案:所有患者入院后均予以鼻喷激素、粘液促排剂、营养神经药物等综合治疗;疗效:痊愈11耳(35.5%),有效6耳(19.4%),无效14耳(45.1%)。结论分泌性中耳炎患者可出现骨导听力下降,其具体机制尚不明确,出现骨导听力下降者,其听力损失程度一般较重,耳鸣为其常见伴随症状,确诊后应以综合治疗方案积极治疗,具有一定疗效。临床需引起重视,避免误诊及漏诊。
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关键词
分泌性中耳炎
骨导下降
临床特征
疗效
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职称材料
题名
CX26不同结构域错义突变体的表达和定位
被引量：
1
1
作者
杨中纯
肖自安
谢鼎华
机构
中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉-头颈外科
出处
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期249-253,共5页
基金
国家自然科学基金(30000094
30572021)
中南大学博士后基金(56890)资助
文摘
目的探讨CX26蛋白质的9个结构域上的不同错义突变体在细胞内的表达及功能改变的异同,初步研究CX26不同错义突变体的致聋机理。方法在CX26的9个结构域中各选择1个致聋的错义突变(p.S19T、p.R32H、p.E47K、p.V84L、p.V95M、p.R143W、p.R165W、p.S199F、p.L214P),应用重叠区扩增基因拼接法和长引物快速法,构建成与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的载体,野生型CX26-EGFP作对照,脂质体转染HeLa细胞,Westernblot分析蛋白的表达,共聚焦显微镜下观察各突变体在细胞膜上有无间隙连接斑形成。结果 CX26的9个结构域上的各1个错义突变体在HeLa细胞中均有表达,其中p.S19T、p.E47K、p.V84L、p.V95M和p.vR165W突变体能在细胞膜上表达并形成间隙连接斑,p.R32H、p.R143W、p.S199F和p.L214P突变体在细胞浆中表达,在细胞膜无表达,无间隙连接斑形成。结论 CX26的p.S19T、p.E47K、p.V84L、p.V95M和p.R165W突变体在细胞内能被转运到细胞膜并形成间隙连接,而p.R32H、p.R143W、p.S199F和p.L214P突变体失去被转运到细胞膜的功能,不能形成间隙连接。CX26的不同错义突变的致聋机制可能不同,与突变点所在的结构域可能没有相关性。
关键词
连接蛋白26(CX26)
突变体
表达
间隙连接
Keywords
Connexin 26 （CX26）
Mutant
Expression
Gap junction
分类号
R764.5 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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职称材料
题名
Stathmin与间隙连接蛋白26相互作用并在小鼠耳蜗表达
2
作者
杨中纯
肖自安
谢鼎华
机构
中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉-头颈外科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第1期51-56,共6页
基金
国家自然科学基金资助课题(编号:30000094
30572021)
中南大学博士后基金(编号:56890)
文摘
目的筛选和鉴定连接蛋白26(connexin26,CX26)的相互作用蛋白质,分析其在小鼠内耳的表达,探讨与听觉的关系。方法酵母双杂交技术筛选CX26的相互作用蛋白质。在体外真核细胞表达系统HEK293细胞内过表达人CX26和相互作用蛋白质,观察它们的定位,并用免疫共沉淀实验观察在体外真核细胞中是否存在相互作用。进一步在小鼠脑组织中用免疫共沉淀方法验证CX26和相互作用蛋白质在真核生物体内的相互作用。逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析相互作用蛋白质在小鼠耳蜗的表达。结果酵母双杂交实验筛选和鉴定到stathmin与CX26相互作用,两者在体外过表达系统HEK293真核细胞中有共定位,免疫共沉淀实验证实在体外真核细胞和真核生物体内存在相互作用,而且stathmin在小鼠耳蜗表达。结论stathmin与CX26相互作用,并且在小鼠耳蜗表达。
关键词
STATHMIN
CX26
相互作用蛋白质
酵母双杂交
免疫共沉淀
Keywords
Stathmin
CX26
Protein-protein interaction
Yeast two hybrid technique
Co-immunoprecipitation
分类号
R339.16 [医药卫生—人体生理学]
R349.5 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
伴骨导听力下降的分泌性中耳炎临床特征及疗效分析
被引量：
12
3
作者
徐敏
冯永
敬前程
杨中纯
文杰
康晓明
邵甸然
龚巍
机构
南华大学附属长沙中心医院
南华大学耳鼻咽喉头颈外科研究所
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第1期52-56,共5页
基金
湖南省重点研发计划项目(2020SK2106)
南华大学人才启动项目(201RGC002)
+2 种基金
南华大学医学临床研究4310计划
湖南省卫生健康委科研计划项目(20201960)
长沙市自然科学基金项目(kq2007050)。
文摘
目的探讨伴有骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的临床特征及疗效,分析其可能原因,为临床诊治提供借鉴。方法分析2018年11月至2022年3月于我院接受治疗的23例(31耳)伴骨导听力下降的分泌性中耳炎患者的一般临床资料、治疗方案及疗效。结果患耳侧别:双耳8例,左耳11例,右耳4例;伴随症状:耳鸣16耳,耳闷14耳,耳痛4耳,眩晕3耳;鼓室导抗图:“B”型图27耳,“C”型图3耳,“AS”型图1耳;纯音听阈:入院气导平均听阈(59.9±18.7)dB HL,骨导平均听阈(34.7±14.6)dB HL,治疗后气导平均听阈(42.6±16.3)dB HL,骨导平均听阈(26.9±12.3)dB HL;治疗方案:所有患者入院后均予以鼻喷激素、粘液促排剂、营养神经药物等综合治疗;疗效:痊愈11耳(35.5%),有效6耳(19.4%),无效14耳(45.1%)。结论分泌性中耳炎患者可出现骨导听力下降,其具体机制尚不明确,出现骨导听力下降者,其听力损失程度一般较重,耳鸣为其常见伴随症状,确诊后应以综合治疗方案积极治疗,具有一定疗效。临床需引起重视,避免误诊及漏诊。
关键词
分泌性中耳炎
骨导下降
临床特征
疗效
Keywords
Secretory otitis media
Bone conduction hearing loss
Clinical characteristics
Curative effect
分类号
R764 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CX26不同结构域错义突变体的表达和定位
杨中纯
肖自安
谢鼎华
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Stathmin与间隙连接蛋白26相互作用并在小鼠耳蜗表达
杨中纯
肖自安
谢鼎华
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
伴骨导听力下降的分泌性中耳炎临床特征及疗效分析
徐敏
冯永
敬前程
杨中纯
文杰
康晓明
邵甸然
龚巍
《中华耳科学杂志》
CSCD
北大核心
2023
12
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