研究尝试应用微生物菌体总RNA提取代替DNA提取,进而通过反转录-PCR(RT-PCR),结合变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,以期揭示超高压处理后低温烟熏火腿中腐败微生物的存活情况,探索RNA-DGGE手段判定...研究尝试应用微生物菌体总RNA提取代替DNA提取,进而通过反转录-PCR(RT-PCR),结合变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,以期揭示超高压处理后低温烟熏火腿中腐败微生物的存活情况,探索RNA-DGGE手段判定超高压处理后微生物存活状态的可行性。分别以400MPa和600MPa的压力在室温(22℃)条件下,对包装后的烟熏火腿进行10min超高压处理,未经高压处理样品作对照,于4℃冷藏条件下,贮藏1、15、30、60、90d,直接提取样品中微生物的总RNA,对其进行RT-PCR和DGGE指纹图谱分析。DGGE指纹图谱显示,超高压处理对烟熏火腿中的优势腐败菌具有较强的抑制作用,且随压力的升高抑菌效应增强;超高压处理后烟熏火腿微生物种群结构变得单一,Weissella viridescens和Leuconos-toc mesenteroides是超高压处理后烟熏火腿中的优势腐败菌。基于菌体总RNA提取的DGGE手段能够有效检测超高压处理后微生物的存活状况,揭示超高压对低温烟熏火腿中优势腐败微生物的抑菌效果。展开更多
