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BLUP法和主成分分析法在杜泊绵羊商业化品系建立中的应用研究 被引量:6
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作者 周鑫磊 陈华 +3 位作者 段崇杰 佐建明 杜立新 刘佳森 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期23-30,共8页
本研究旨在为以一个初始杜泊绵羊群体为基础,建立适应多样化市场需求的商业化品系,提供可借鉴的实用方法。具体实施步骤包括:(1)用单性状动物模型BLUP法估计杜泊绵羊与品系划分有关性状的育种值;(2)利用主成分分析法,抽取所研究性状的... 本研究旨在为以一个初始杜泊绵羊群体为基础,建立适应多样化市场需求的商业化品系,提供可借鉴的实用方法。具体实施步骤包括:(1)用单性状动物模型BLUP法估计杜泊绵羊与品系划分有关性状的育种值;(2)利用主成分分析法,抽取所研究性状的可解释85%以上变异的主成分;(3)依据主成分值表达式的系数大小及符号,解释每个主成分的实际意义,确定各主成分可作为哪个品系的建立依据;(4)根据个体各标准化主成分值的大小及相应的分系标准,对杜泊绵羊群体进行商业化品系划分。本研究依据实际需求将现有杜泊羊群体划分为体长系、体宽系和肥羔系,其结果与依据性状估计育种值进行品系划分相似。在不考虑分系相关性状的经济权重时,BLUP法和主成分分析法适于初始群体的品系建立。 展开更多
关键词 杜泊绵羊 BLUP 育种值 主成分分析 品系建立
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猪RYR1基因的检测及其对生产性能的遗传效应 被引量:24
2
作者 杜立新 王爱华 +1 位作者 姜运良 张金花 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期481-486,共6页
本研究以PCR RFLPs检测方法 ,分析了RYR1基因在山东省引进猪种及其杂交后代各群体中的分布。在纯种猪中 ,皮特兰猪的n基因的基因频率最高 (10 0 % ) ,其次为长白猪 (11 4 4% ) ,再次为约克夏猪 (6 68% ) ,杜洛克和汉普夏猪为 0 ;在杂种... 本研究以PCR RFLPs检测方法 ,分析了RYR1基因在山东省引进猪种及其杂交后代各群体中的分布。在纯种猪中 ,皮特兰猪的n基因的基因频率最高 (10 0 % ) ,其次为长白猪 (11 4 4% ) ,再次为约克夏猪 (6 68% ) ,杜洛克和汉普夏猪为 0 ;在杂种群体中 ,杜洛克×皮特兰猪最高 (5 0 % ) ,长白×约克夏猪为 10 62 % ,约克夏×长白猪为 7 86% ,约克夏×长白与长白×约克夏杂交所得的F2代为 1 31% ,杜洛克×汉普夏和汉普夏×杜洛克猪为 0。利用最小二乘模型分析了RYR1基因对生产性能的遗传效应 ,结果表明 :RYR1基因对 2 0日龄体重和 60日龄体重的影响不显著(P >0 0 5 ) ,但极显著提高日增重 (P <0 0 1)。RYR1基因可极显著地提高猪的胴体瘦肉率 ,降低猪肉的肉色评分 (P <0 0 1)。NN、Nn和nn 3种基因型对瘦肉率和肉色评分的最小二乘均值分别为 64 0 0 %、66 87%、67 87%和 2 73、2 5 7、2 0 2。在繁殖性状方面 ,RYR1基因对仔猪出生重影响不显著 (P >0 0 5 ) ,但显著降低繁殖母猪的产活仔数 (P <0 0 5 ) ,NN、Nn和nn 3种基因型对产活仔数的最小二乘均值分别为 11 16、10 0 0、8 2 6头。 展开更多
关键词 RYR1基因 生产性能 遗传效应
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枯草芽孢杆菌BS-208和BS-209菌株防治番茄灰霉病研究 被引量:18
3
作者 杜立新 冯书亮 +5 位作者 曹克强 王容燕 王金耀 曹伟平 林开春 张用梅 《农药学学报》 CAS CSCD 2004年第3期37-42,共6页
为开发防治番茄灰霉病Botrytiscinerea的生防细菌,进行了枯草芽孢杆菌BacillussubtilisBS-208和BS-209菌株对番茄灰霉病的温室和田间防治试验,并测定了两菌株对番茄灰霉病菌的抑制作用。结果表明:BS-208菌株分泌物对番茄灰霉病菌菌丝生... 为开发防治番茄灰霉病Botrytiscinerea的生防细菌,进行了枯草芽孢杆菌BacillussubtilisBS-208和BS-209菌株对番茄灰霉病的温室和田间防治试验,并测定了两菌株对番茄灰霉病菌的抑制作用。结果表明:BS-208菌株分泌物对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制率为44%以上;BS-208和BS-209菌株的发酵液在经稀释10倍后,对番茄灰霉病菌分生孢子萌发的抑制率可达90%以上。经温室盆栽试验测定,以BS-208和BS-209菌株发酵液和菌体处理后24和48h接种病菌,防效均达75%以上,好于0h接种的防效,但分泌物滤液防治效果较差。两年的田间试验结果表明,BS-208和BS-209制剂对番茄灰霉病均具有良好的防治效果,其防效随浓度加大而提高,以800倍液的防效最好,两菌株制剂800倍液连续3次施药后防效均达到74%以上,并且BS-208菌株的防效略高于BS-209菌株。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 番茄灰霉病 防治效果
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用RAPD技术筛选中国荷斯坦牛产奶量性状遗传标记 被引量:15
4
作者 杜立新 万海伟 +1 位作者 王爱华 李宏滨 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期882-886,共5页
选用320条10碱基随机引物在由36头高产(305 d产奶量>8 500 kg)和32头低产(305 d产奶量<5 600kg)中国荷斯坦牛所组成的2个DNA池间进行RAPD-PCR扩增,从中筛选出稳定性好、带型清晰且在2个DNA池间有明显差异的RAPD引物24条。用筛选到... 选用320条10碱基随机引物在由36头高产(305 d产奶量>8 500 kg)和32头低产(305 d产奶量<5 600kg)中国荷斯坦牛所组成的2个DNA池间进行RAPD-PCR扩增,从中筛选出稳定性好、带型清晰且在2个DNA池间有明显差异的RAPD引物24条。用筛选到的24条引物对所有个体进行PCR检测,得到了5个与奶牛产奶量性状相关的RAPD标记,并对其中4个进行了克隆测序和SCAR标记转化以及生物信息学分析。结果表明:SCAR标记yield-s139与产奶量密切相关,应用电子克隆方法已将该标记由921 bp延伸到2 141 bp,经同源性比较发现,此标记对应于奶牛基因组中LINEs家族中的一个重复元件,推测该元件附近可能存在与产奶量性状相关的QTLs或主效基因。 展开更多
关键词 奶牛 产奶性状 分子标记
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FIGOⅠ Ⅱ期子宫内膜癌MRI征象分析与评价 被引量:7
5
作者 杜立新 关弘 +1 位作者 梁碧玲 徐化剑 《医学影像学杂志》 2010年第8期1156-1160,共5页
目的:按照FIGO2009分期标准,分析ⅠⅡ期子宫内膜癌的MRI征象及其病理基础,评价MRI对子宫内膜癌肌层和宫颈侵犯的诊断价值。方法:43例ⅠⅡ期子宫内膜癌患者术前均行MRI检查,采用双盲法,描述肿瘤的MRI表现特征,并将MRI术前分期及判断肌层... 目的:按照FIGO2009分期标准,分析ⅠⅡ期子宫内膜癌的MRI征象及其病理基础,评价MRI对子宫内膜癌肌层和宫颈侵犯的诊断价值。方法:43例ⅠⅡ期子宫内膜癌患者术前均行MRI检查,采用双盲法,描述肿瘤的MRI表现特征,并将MRI术前分期及判断肌层和宫颈浸润结果,与术后病理结果对照分析。结果:Ⅰa 26例,Ⅰb 8例,Ⅱ期9例。Ⅰ期MRI主要表现为子宫内膜增厚、腔内局限型或弥漫性软组织肿块呈中等强化、T2WI低信号结合带中断及肌层侵犯等,其病理基础为癌细胞呈腺样乳突状结构,突破粘膜层,向肌壁间浸润性生长。Ⅱ期以宫颈内出现与宫体肿瘤相连续的异常信号影及宫颈纤维间质破坏为特征。MRI评价肿瘤浸润肌层深度的诊断准确性为86%,判断宫颈侵犯的敏感性、特异性、准确性分别为78%、91%、88%,与病理结果比较无显著性差异(P>0.05)。结论:MRI对Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌的早期诊断、肌层和宫颈侵犯的判断及术前分期准确性高,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 磁共振成像 肿瘤分期
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苏云金芽胞杆菌工程菌BIOT185对金龟子幼虫的田间防效及其安全性评价 被引量:2
6
作者 杜立新 王金耀 +3 位作者 王容燕 曹伟平 宋健 冯书亮 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期354-358,共5页
为评价苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)工程菌BIOT185对金龟子幼虫的田间防治效果以及其中间试验水平的安全性,在河北省定州市花生田开展了两年的田间小区试验。调查结果表明,每mL含100亿芽胞的工程菌BIOT185悬浮剂稀释10... 为评价苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)工程菌BIOT185对金龟子幼虫的田间防治效果以及其中间试验水平的安全性,在河北省定州市花生田开展了两年的田间小区试验。调查结果表明,每mL含100亿芽胞的工程菌BIOT185悬浮剂稀释10倍和100倍处理对金龟子幼虫具有较好的防治效果,虫口减退率可达52.08%-70.51%,保果效果为50.40%-66.57%,说明高浓度的BIOT185可以有效控制金龟子幼虫的危害。利用平板菌落计数法结合PCR检测发现,在施药后的365d中BIOT185在土壤中的菌量总体呈下降趋势;调查田间各小区的昆虫种群发现,工程菌BIOT185处理区与野生菌HBF-1、BT185以及对照区的昆虫种群差异不显著。说明BIOT185不会在土壤环境中大量残留,也不会影响花生田的昆虫种群。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 工程菌 防效 金龟子幼虫 安全性
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基于服务提供者获益的服务响应选择方法 被引量:1
7
作者 杜立新 孟祥旭 +1 位作者 刘士军 武蕾 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期112-119,共8页
针对当服务请求超出服务提供者能力的时候,服务提供者如何响应才能满足自身获益最大化问题进行了研究,指出服务提供者获益本质是其自身价值的体现,价格收益只是一种常见的获益形式.提出用响应有效度来表达服务响应的有效程度,并给出了... 针对当服务请求超出服务提供者能力的时候,服务提供者如何响应才能满足自身获益最大化问题进行了研究,指出服务提供者获益本质是其自身价值的体现,价格收益只是一种常见的获益形式.提出用响应有效度来表达服务响应的有效程度,并给出了基于历史相似服务请求的有效度估算方法;同时采用响应获益度来表达一次响应对于服务提供者获益的影响,并详细说明了通过将获益目标分解和关系映射,最终使用服务环境基础数据项进行表达的方法.实验结果表明,通过历史相似服务请求对服务响应结果进行预估并据此进行响应选择,能够较好地提高服务响应的成功率,降低失败率和等待超时率,进而提高整体服务提供者获益水平.所提方法不仅适用于服务响应问题的解决,同时有助于服务设计者在设计时更好地将服务目标与服务环境相结合,以提高服务请求者与提供者的协作水平. 展开更多
关键词 服务提供者获益 服务响应 相似请求 有效服务
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关于中国地方畜禽品种的评价与保护的若干思考 被引量:10
8
作者 杜立新 《中国畜牧兽医》 CAS 2003年第2期3-6,共4页
中国畜禽地方品种资源十分丰富 ,对它们进行有效保护和合理开发利用 ,既是发展优质、高产高效畜牧业的基础和保障 ,又是实现畜牧业可持续发展、满足人们对畜产品消费多元化和保持生物多样性的需要。作者对支撑地方畜禽品种生存和发展的... 中国畜禽地方品种资源十分丰富 ,对它们进行有效保护和合理开发利用 ,既是发展优质、高产高效畜牧业的基础和保障 ,又是实现畜牧业可持续发展、满足人们对畜产品消费多元化和保持生物多样性的需要。作者对支撑地方畜禽品种生存和发展的条件 ,地方畜禽品种资源的评估及地方畜禽品种的保护理论与方法等问题作了全面的论述。 展开更多
关键词 中国 畜禽品种 地方品种 评价 保护 开发利用
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控制绵羊繁殖性状的主基因研究 被引量:5
9
作者 杜立新 姜运良 陈如熙 《草食家畜》 1994年第2期18-19,共2页
控制绵羊繁殖性状的主基因研究杜立新,姜运良,陈如熙(山东农业大学动物科技学院)(宁夏农学院畜牧兽医系)繁殖性状是绵羊的重要经济性状,其中产羔率及每胎产羔数是决定农区养羊效益的最主要的性状之一,而受胎率及羔羊存活率则在... 控制绵羊繁殖性状的主基因研究杜立新,姜运良,陈如熙(山东农业大学动物科技学院)(宁夏农学院畜牧兽医系)繁殖性状是绵羊的重要经济性状,其中产羔率及每胎产羔数是决定农区养羊效益的最主要的性状之一,而受胎率及羔羊存活率则在牧区和条件严酷地区的养羊业中具有重... 展开更多
关键词 绵羊 繁殖 基因
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诗歌、咏叹调及艺术歌曲之间的内在联系及转化——以皮埃特罗·梅塔斯塔西奥诗作《我永远不能》(Ch'io mai vi possa)为例 被引量:3
10
作者 杜立新 《乐府新声(沈阳音乐学院学报)》 2022年第3期102-107,共6页
本文以梅塔斯塔西奥诗作《我永远不能》(Ch’io mai vi possa)为主线,通过对历史资料的研读,沿着这首诗从诞生至今的传播脉络,介绍了围绕这首诗进行的声乐作品创作,从歌剧咏叹调到艺术歌曲的演变和发展过程,重点阐述了诗词本身的艺术特... 本文以梅塔斯塔西奥诗作《我永远不能》(Ch’io mai vi possa)为主线,通过对历史资料的研读,沿着这首诗从诞生至今的传播脉络,介绍了围绕这首诗进行的声乐作品创作,从歌剧咏叹调到艺术歌曲的演变和发展过程,重点阐述了诗词本身的艺术特色,以及亨德尔和罗西尼以此诗作为歌词创作的咏叹调和艺术歌曲的创作特点及演唱风格。 展开更多
关键词 诗作 咏叹调《我永远不能》 艺术歌曲《诺言》 演唱方法
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农业动物生物技术研究现状与发展趋势 被引量:2
11
作者 杜立新 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第10期3-6,共4页
动物科学和动物医学与生物技术的结合 ,已成为 2 1世纪我国畜牧兽医事业创新的先导和现代农业动物生产技术的生长点。农业动物生产和疫病防制领域已成为现代生物技术应用最广阔、最活跃、最富有挑战性的领域之一 ,生物技术在畜牧业中的... 动物科学和动物医学与生物技术的结合 ,已成为 2 1世纪我国畜牧兽医事业创新的先导和现代农业动物生产技术的生长点。农业动物生产和疫病防制领域已成为现代生物技术应用最广阔、最活跃、最富有挑战性的领域之一 ,生物技术在畜牧业中的应用将会使畜牧业产生新的学科基础、新的内涵、新的产业化目标。作者重点介绍了国际上动物生物技术的研究现状 ,讨论了该领域的发展趋势 ,提出了未来 10年我国农业动物生物技术发展的优先领域及重点研究内容。 展开更多
关键词 农业动物 生物技术
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浅析嫁接 杂交和转基因技术的异同 被引量:1
12
作者 杜立新 曹伟平 +1 位作者 郭庆港 宋健 《现代农村科技》 2017年第9期87-88,共2页
优良品种对提高农作物产量、改善农作物品质具有不可替代的作用。在传统的农业作物繁殖及育种中,技术最为成熟、应用最为广泛的方法为嫁接和杂交。自从1986年国家"863计划"启动以来,现代生物技术在我国迅猛发展,越来越多的转基因技术... 优良品种对提高农作物产量、改善农作物品质具有不可替代的作用。在传统的农业作物繁殖及育种中,技术最为成熟、应用最为广泛的方法为嫁接和杂交。自从1986年国家"863计划"启动以来,现代生物技术在我国迅猛发展,越来越多的转基因技术应用到现代农业育种体系中,一大批具有重要应用价值包括高产、抗逆、优质等决定重要农艺性状的功能基因已被克隆。 展开更多
关键词 农作物品质 农业作物 育种体系 重要农艺性状 农作物产量 优良品种 植物基因 农杆菌 生物技术 玉米稻
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关于中国地方畜禽品种的评价与保护的若干思考 被引量:5
13
作者 杜立新 《中国畜禽种业》 2006年第2期6-8,共3页
畜禽品种是畜牧业生产的基础和保障。在食品和农业生产中,家畜(禽)以肉、蛋、奶、毛、畜力和有机肥等形式提供了人类30%~40%的需求,这些都来源于40多个畜禽种类的大约4500个品种,它们是人类社会现在和未来不可缺少的重要资源。但长期以... 畜禽品种是畜牧业生产的基础和保障。在食品和农业生产中,家畜(禽)以肉、蛋、奶、毛、畜力和有机肥等形式提供了人类30%~40%的需求,这些都来源于40多个畜禽种类的大约4500个品种,它们是人类社会现在和未来不可缺少的重要资源。但长期以来,由于单纯追求畜产品数量增长,普遍存在“重引进、轻培育,重改良、轻保护”的现象,畜禽遗传资源保护投入不足,设施与手段落后,造成品种混杂、资源流失严重;科研工作滞后,缺乏对种质资源特性的深入研究,对地方品种优良特性的发掘不够;保护与开发利用脱节,缺乏创新机制。本期专家论坛就“畜禽品种资源保护”这个话题进行讨论。采集了业内权威人士的观点,以期引起畜禽从业者的思考。 展开更多
关键词 畜禽品种 保护 地方品种资源 评价 中国 经济效益 群体数量 濒危状态 创新利用 集约化
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中国民族歌剧女性角色艺术形象构建探究——以歌剧《玉堂春》为例 被引量:1
14
作者 杜立新 《渤海大学学报(哲学社会科学版)》 2022年第4期120-124,共5页
中国的歌剧经过无数波折和艰难创新,逐渐具备了“中西合璧”的民族艺术特色。这些歌剧中的女性角色的成功塑造,是民族歌剧创新成功的主要成就和重要内容。以民族歌剧《玉堂春》中的“苏三”为例,从角色设计、旋律运用、女主角的演唱等... 中国的歌剧经过无数波折和艰难创新,逐渐具备了“中西合璧”的民族艺术特色。这些歌剧中的女性角色的成功塑造,是民族歌剧创新成功的主要成就和重要内容。以民族歌剧《玉堂春》中的“苏三”为例,从角色设计、旋律运用、女主角的演唱等多个角度来分析《玉堂春》的创新元素和成功经验,探讨中国民族歌剧中的女性艺术形象构建的成果。 展开更多
关键词 民族歌剧 女性角色 艺术形象 构建探究
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歌唱声音的“减肥”策略 被引量:1
15
作者 杜立新 《当代音乐》 2018年第9期104-106,共3页
针对目前声乐教学和学习过程中出现的声音过重、咬字不清、呼吸不当等问题,结合在教学实践中总结归纳出的有效训练方法,本文提出并详细解释了声音"减肥"的概念,并从心理和技术两个层面介绍了实现声音减肥的具体途径。
关键词 声乐教学 演唱技术 训练方法
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动物基因转移的方法、问题与应用前景 被引量:1
16
作者 杜立新 《草食家畜》 1994年第4期17-19,共3页
动物基因转移的方法、问题与应用前景杜立新(山东农业大学动物科技学院271018)自1982年首只超级小白鼠诞生,至今仅十余年时间,转基因动物的研究已解决了许多重大科学和技术问题。经遗传操作的家兔、猪、羊、牛、鸡及鱼类... 动物基因转移的方法、问题与应用前景杜立新(山东农业大学动物科技学院271018)自1982年首只超级小白鼠诞生,至今仅十余年时间,转基因动物的研究已解决了许多重大科学和技术问题。经遗传操作的家兔、猪、羊、牛、鸡及鱼类等转基因动物亦相继产生,且在动物育... 展开更多
关键词 动物 基因转移 微注射法 胚胎干细胞法
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我国转基因棉花应用进展及安全管理策略
17
作者 杜立新 曹伟平 +1 位作者 郭庆港 宋健 《现代农村科技》 2016年第18期4-5,共2页
棉花产业在世界和我国国民经济中占据着重要地位,转基因抗虫棉为棉花主要害虫棉铃虫等的控制提供了新的技术手段,可有效地控制棉铃虫等的为害。本文综述了目前我国转基因棉花的应用进展和安全管理策略。
关键词 转基因棉花 应用 安全管理
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4个绵羊品种线粒体细胞色素b基因的序列差异和系统进化研究 被引量:27
18
作者 张传生 耿立英 +2 位作者 万海伟 李吉涛 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期313-317,共5页
测定了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊和鲁北白山羊5个品种羊415bp线粒体DNA细胞色素b基因片段,其中44个位点检出变异。分析其碱基组成和变异情况,并以鲁北白山羊为外群,用UPGMA和NJ法构建了一系列分子系统树,得到相同的拓扑结构,... 测定了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊和鲁北白山羊5个品种羊415bp线粒体DNA细胞色素b基因片段,其中44个位点检出变异。分析其碱基组成和变异情况,并以鲁北白山羊为外群,用UPGMA和NJ法构建了一系列分子系统树,得到相同的拓扑结构,在分子水平从母系遗传的角度澄清4个绵羊品种的起源分化关系。结果显示:在4个绵羊品种之间,洼地绵羊与滩羊关系最近与小尾寒羊亲缘关系最远。绵羊品种内的平均差异为0185%,线粒体DNA多态性相对贫乏,推测4个品种绵羊具有共同的母系祖先。 展开更多
关键词 线粒体细胞色素B基因 绵羊品种 系统进化 序列差异 线粒体DNA多态性 鲁北白山羊 小尾寒羊 洼地绵羊 分子系统树 UPGMA 大尾寒羊 基因片段 碱基组成 拓扑结构 起源分化 母系遗传 分子水平 亲缘关系 平均差 滩羊 变异 种羊
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山东地方鸡种遗传距离与聚类分析方法比较研究 被引量:54
19
作者 陈红菊 岳永生 +2 位作者 樊新忠 张传生 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-36,共4页
选用5个多态性较好的微卫星标记,检测了山东省仅存的5个地方鸡种:寿光鸡、日照麻鸡、莱芜黑鸡、济宁百日鸡、鲁西斗鸡,以及一个外来鸡种———安卡黄鸡和一个外省地方鸡种———广西黄鸡共7个鸡种的遗传多样性。根据测试结果计算了每个... 选用5个多态性较好的微卫星标记,检测了山东省仅存的5个地方鸡种:寿光鸡、日照麻鸡、莱芜黑鸡、济宁百日鸡、鲁西斗鸡,以及一个外来鸡种———安卡黄鸡和一个外省地方鸡种———广西黄鸡共7个鸡种的遗传多样性。根据测试结果计算了每个等位基因的频率,并以基因频率为基础计算了Nei氏标准遗传距离(Ds)和DA遗传距离,发现日照麻鸡与济宁百日鸡的距离最近,而鲁西斗鸡与其他6个鸡种距离都较远。根据两种遗传距离分别进行了NJ法和UPGMA法聚类,得到4个聚类图。结果表明:DA遗传距离的UPGMA聚类图比较可靠。 展开更多
关键词 山东 地方鸡种 遗传距离 聚类分析 的微卫星标记 遗传多样性
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抑制性消减杂交构建奶牛乳房炎抗性相关cDNA文库 被引量:20
20
作者 曹随忠 李宏滨 +2 位作者 王爱华 赵兴绪 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期526-530,共5页
以经产荷斯坦奶牛外周血白细胞为材料,分离Poly(A)+ RNA,反转录合成单链及双链cDNA,经酶切成平均大小为400~600 bp的片段,将患乳房炎奶牛cDNA分成2组,分别与2种不同的接头连接,再与健康奶牛cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性PCR扩增,将第... 以经产荷斯坦奶牛外周血白细胞为材料,分离Poly(A)+ RNA,反转录合成单链及双链cDNA,经酶切成平均大小为400~600 bp的片段,将患乳房炎奶牛cDNA分成2组,分别与2种不同的接头连接,再与健康奶牛cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性PCR扩增,将第2次PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞进行文库扩增,构建了具有高消减效率的奶牛乳房炎抗性相关cDNA文库.文库扩增后得到610个白色阳性克隆,随机挑选克隆进行PCR鉴定,插入片段主要分布在250~750 bp 之间.文库的成功构建为进一步筛选、克隆与奶牛乳房炎抗性相关的基因奠定了基础,对研究奶牛乳房炎抗性的分子机制以及乳房炎的综合防制具有重要意义. 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 CDNA文库 抑制性消减杂交 抗性 相关 构建 pGEM-T载体 荷斯坦奶牛 PCR扩增 PCR产物 感受态细胞 TOP10 PCR鉴定 接头连接 大肠杆菌 阳性克隆 综合防制 分子机制 白细胞 外周血 RNA 反转录 600 610 片段 酶切
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