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RT-PCR快速检测口蹄疫病毒 被引量:12
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作者 娄高明 杜伟贤 +3 位作者 杨傲冰 周秀蓉 张春红 谢明权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期308-311,共4页
根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ... 根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ,符合率 10 0 % ,证明该方法特异。与经典方法动物接种试验比较 ,其灵敏度提高10 0倍左右 ;对O3I3株的细胞毒进行检测 ,其敏感度达 10个TCID50 。初步结果表明所建立的RT 展开更多
关键词 RT-PCR 快速检测 口蹄疫病毒
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应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化 被引量:7
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作者 黄忠 黄引贤 +3 位作者 杜伟贤 赵心贤 伍惠卿 张春红 《广东农业科学》 CAS CSCD 1997年第5期40-41,共2页
应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体... 应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体滴度下降时,攻毒保护率也随即降低。 展开更多
关键词 ELISA 巴氏杆菌 抗体 鸭病
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伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定 被引量:3
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作者 敖敬群 娄高明 +4 位作者 杨林 杜伟贤 龙綮新 王珣章 谢明权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期492-495,共4页
用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到 pMD18-T载体后 ,转化大肠杆菌XL 1-blue菌株。重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较 ,确证含有PRV闽A株 gE基因... 用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到 pMD18-T载体后 ,转化大肠杆菌XL 1-blue菌株。重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较 ,确证含有PRV闽A株 gE基因的表位抗原编码区。此区段与PRVRice株相应区段的DNA序列同源性为 97 3% ,氨基酸序列同源性为 94 7%。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gE基因表位抗原编码区 序列测定 PCR扩增 基因克隆
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伪狂犬病流行概况及猪场防制策略 被引量:38
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作者 娄高明 杜伟贤 《中国动物检疫》 CAS 1999年第5期43-45,共3页
关键词 伪狂犬病 流行病学 猪场 防制策略
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抗鸡IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:6
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作者 张春红 伍惠卿 +3 位作者 杜伟贤 黄忠 赵心贤 林惠婵 《广东农业科学》 CSCD 1996年第1期39-41,共3页
利用纯化鸡血清IgG免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡lgG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3... 利用纯化鸡血清IgG免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡lgG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3,其培养上清和诱生Balb/c小鼠腹水的McAb效价分别为1:4x102—1.28x104和1:8x105—1x1010,经染色体分析可见到两种形态的染色体,该细胞株经体外连续培养6个月以上仍能稳定地分泌特异性抗体,在液氮中冻存1年之后仍保持分泌抗体的能力。 展开更多
关键词 IGG 单克隆抗体 杂交瘤细胞 免疫球蛋白G 鸡病
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抗鸭IgG单克隆抗体的研究及其酶结合物的制备 被引量:2
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作者 伍惠卿 杜伟贤 +1 位作者 赵心贤 黄忠 《广东农业科学》 CAS CSCD 1993年第1期41-43,共3页
本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉... 本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉淀二步法提纯,获得纯度高的抗大丰鸭IgGMcAb,用过碘酸钠氧化法与辣根过氧化物酶进行交联,获得一种抗鸭 IgG McAb 酶结合物免疫学试剂。经测定,该试剂对鸭 IgG 具有专一性。 展开更多
关键词 单克隆抗体 鸭IgG 制备 疫苗
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伪狂犬病抗原抗体诊断方法研究进展 被引量:4
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作者 娄高明 杜伟贤 《动物科学与动物医学》 2000年第1期10-12,共3页
关键词 病毒病 伪狂犬病 抗原抗体 诊断方法 进展
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育肥猪暴发弓形体病
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作者 娄高明 杜伟贤 《中国动物检疫》 CAS 2002年第4期29-29,共1页
关键词 育肥猪 弓形体病 临床症状 病理 诊断 治疗
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现代分子生物学在NDV研究和生产中的应用 被引量:1
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作者 宋长绪 刘福安 杜伟贤 《动物医学进展》 CSCD 1997年第2期5-6,共2页
本文论述了现代分子生物学技术在NDV的检测和基因工程疫苗方面的应用。评估了RNA指纹图谱、核酸探针及PCR等方法的优缺点及应用前景,重点概述了可以用于NDV强弱毒株鉴别检测的核酸探针法和F蛋白裂解位点多肽抗血清法。介... 本文论述了现代分子生物学技术在NDV的检测和基因工程疫苗方面的应用。评估了RNA指纹图谱、核酸探针及PCR等方法的优缺点及应用前景,重点概述了可以用于NDV强弱毒株鉴别检测的核酸探针法和F蛋白裂解位点多肽抗血清法。介绍了NDV在各种载体包括禽痘病毒、痘苗病毒。 展开更多
关键词 分子生物学 新城疫 病毒 疫苗
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