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RT-PCR快速检测口蹄疫病毒
被引量:
12
1
作者
娄高明
杜伟贤
+3 位作者
杨傲冰
周秀蓉
张春红
谢明权
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期308-311,共4页
根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ...
根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ,符合率 10 0 % ,证明该方法特异。与经典方法动物接种试验比较 ,其灵敏度提高10 0倍左右 ;对O3I3株的细胞毒进行检测 ,其敏感度达 10个TCID50 。初步结果表明所建立的RT
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关键词
RT-PCR
快速检测
口蹄疫病毒
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职称材料
应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化
被引量:
7
2
作者
黄忠
黄引贤
+3 位作者
杜伟贤
赵心贤
伍惠卿
张春红
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1997年第5期40-41,共2页
应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体...
应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体滴度下降时,攻毒保护率也随即降低。
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关键词
ELISA
巴氏杆菌
抗体
鸭病
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职称材料
伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定
被引量:
3
3
作者
敖敬群
娄高明
+4 位作者
杨林
杜伟贤
龙綮新
王珣章
谢明权
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期492-495,共4页
用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到 pMD18-T载体后 ,转化大肠杆菌XL 1-blue菌株。重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较 ,确证含有PRV闽A株 gE基因...
用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到 pMD18-T载体后 ,转化大肠杆菌XL 1-blue菌株。重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较 ,确证含有PRV闽A株 gE基因的表位抗原编码区。此区段与PRVRice株相应区段的DNA序列同源性为 97 3% ,氨基酸序列同源性为 94 7%。
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关键词
伪狂犬病病毒
gE基因表位抗原编码区
序列测定
PCR扩增
基因克隆
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职称材料
伪狂犬病流行概况及猪场防制策略
被引量:
38
4
作者
娄高明
杜伟贤
《中国动物检疫》
CAS
1999年第5期43-45,共3页
关键词
伪狂犬病
流行病学
猪场
防制策略
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职称材料
抗鸡IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
被引量:
6
5
作者
张春红
伍惠卿
+3 位作者
杜伟贤
黄忠
赵心贤
林惠婵
《广东农业科学》
CSCD
1996年第1期39-41,共3页
利用纯化鸡血清IgG免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡lgG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3...
利用纯化鸡血清IgG免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡lgG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3,其培养上清和诱生Balb/c小鼠腹水的McAb效价分别为1:4x102—1.28x104和1:8x105—1x1010,经染色体分析可见到两种形态的染色体,该细胞株经体外连续培养6个月以上仍能稳定地分泌特异性抗体,在液氮中冻存1年之后仍保持分泌抗体的能力。
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关键词
IGG
单克隆抗体
杂交瘤细胞
免疫球蛋白G
鸡病
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职称材料
抗鸭IgG单克隆抗体的研究及其酶结合物的制备
被引量:
2
6
作者
伍惠卿
杜伟贤
+1 位作者
赵心贤
黄忠
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1993年第1期41-43,共3页
本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉...
本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉淀二步法提纯,获得纯度高的抗大丰鸭IgGMcAb,用过碘酸钠氧化法与辣根过氧化物酶进行交联,获得一种抗鸭 IgG McAb 酶结合物免疫学试剂。经测定,该试剂对鸭 IgG 具有专一性。
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关键词
单克隆抗体
鸭IgG
制备
疫苗
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职称材料
伪狂犬病抗原抗体诊断方法研究进展
被引量:
4
7
作者
娄高明
杜伟贤
《动物科学与动物医学》
2000年第1期10-12,共3页
关键词
病毒病
伪狂犬病
抗原抗体
诊断方法
进展
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职称材料
育肥猪暴发弓形体病
8
作者
娄高明
杜伟贤
《中国动物检疫》
CAS
2002年第4期29-29,共1页
关键词
育肥猪
弓形体病
临床症状
病理
诊断
治疗
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职称材料
现代分子生物学在NDV研究和生产中的应用
被引量:
1
9
作者
宋长绪
刘福安
杜伟贤
《动物医学进展》
CSCD
1997年第2期5-6,共2页
本文论述了现代分子生物学技术在NDV的检测和基因工程疫苗方面的应用。评估了RNA指纹图谱、核酸探针及PCR等方法的优缺点及应用前景,重点概述了可以用于NDV强弱毒株鉴别检测的核酸探针法和F蛋白裂解位点多肽抗血清法。介...
本文论述了现代分子生物学技术在NDV的检测和基因工程疫苗方面的应用。评估了RNA指纹图谱、核酸探针及PCR等方法的优缺点及应用前景,重点概述了可以用于NDV强弱毒株鉴别检测的核酸探针法和F蛋白裂解位点多肽抗血清法。介绍了NDV在各种载体包括禽痘病毒、痘苗病毒。
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关键词
分子生物学
新城疫
病毒
疫苗
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职称材料
题名
RT-PCR快速检测口蹄疫病毒
被引量:
12
1
作者
娄高明
杜伟贤
杨傲冰
周秀蓉
张春红
谢明权
机构
广东省兽医生物技术重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期308-311,共4页
基金
广东省自然科学基金重大项目 (963 0 0 7)
广东省科技攻关项目 (99B0 5 60 1G)
广东省农科院院长基金项目 (96 基金 10 )
文摘
根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ,符合率 10 0 % ,证明该方法特异。与经典方法动物接种试验比较 ,其灵敏度提高10 0倍左右 ;对O3I3株的细胞毒进行检测 ,其敏感度达 10个TCID50 。初步结果表明所建立的RT
关键词
RT-PCR
快速检测
口蹄疫病毒
Keywords
Foot and mouth disease virus
RNA detection
RT-PCR
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化
被引量:
7
2
作者
黄忠
黄引贤
杜伟贤
赵心贤
伍惠卿
张春红
机构
广东省农科院兽医研究所
华南农业大学动物医学系
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1997年第5期40-41,共2页
文摘
应用ELISA间接法检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体,具有快速及特异的优点。鸭免疫禽霍乱疫苗1周后,抗体滴度开始上升,4周后达到高峰。用巴氏杆菌C48-1攻击不同抗体滴度的鸭只,抗体滴度为1:400时,保护率为90%,抗体滴度下降时,攻毒保护率也随即降低。
关键词
ELISA
巴氏杆菌
抗体
鸭病
分类号
S858.325.1 [农业科学—临床兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定
被引量:
3
3
作者
敖敬群
娄高明
杨林
杜伟贤
龙綮新
王珣章
谢明权
机构
中山大学生物防治国家重点实验室
广东省兽医生物技术重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期492-495,共4页
基金
国家"十五"科技攻关项目 ( 2 0 0 2BA5 14A -1-3)
国家自然科学基金项目 ( 396 0 0 10 9)
广东省自然科学基金项目 ( 990 5 17)
文摘
用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到 pMD18-T载体后 ,转化大肠杆菌XL 1-blue菌株。重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较 ,确证含有PRV闽A株 gE基因的表位抗原编码区。此区段与PRVRice株相应区段的DNA序列同源性为 97 3% ,氨基酸序列同源性为 94 7%。
关键词
伪狂犬病病毒
gE基因表位抗原编码区
序列测定
PCR扩增
基因克隆
Keywords
Pseudorabies virus
gE gene fragment encoding epitopes
PCR amplification
Gene cloning
Sequencing
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
伪狂犬病流行概况及猪场防制策略
被引量:
38
4
作者
娄高明
杜伟贤
机构
广东省农科院兽医研究所兽医生物技术重点实验室
出处
《中国动物检疫》
CAS
1999年第5期43-45,共3页
关键词
伪狂犬病
流行病学
猪场
防制策略
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
S858.285.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
抗鸡IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
被引量:
6
5
作者
张春红
伍惠卿
杜伟贤
黄忠
赵心贤
林惠婵
机构
广东省农科院兽医所
出处
《广东农业科学》
CSCD
1996年第1期39-41,共3页
文摘
利用纯化鸡血清IgG免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡lgG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3,其培养上清和诱生Balb/c小鼠腹水的McAb效价分别为1:4x102—1.28x104和1:8x105—1x1010,经染色体分析可见到两种形态的染色体,该细胞株经体外连续培养6个月以上仍能稳定地分泌特异性抗体,在液氮中冻存1年之后仍保持分泌抗体的能力。
关键词
IGG
单克隆抗体
杂交瘤细胞
免疫球蛋白G
鸡病
分类号
S858.312.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
抗鸭IgG单克隆抗体的研究及其酶结合物的制备
被引量:
2
6
作者
伍惠卿
杜伟贤
赵心贤
黄忠
机构
广东省农科院兽医所
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1993年第1期41-43,共3页
文摘
本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉淀二步法提纯,获得纯度高的抗大丰鸭IgGMcAb,用过碘酸钠氧化法与辣根过氧化物酶进行交联,获得一种抗鸭 IgG McAb 酶结合物免疫学试剂。经测定,该试剂对鸭 IgG 具有专一性。
关键词
单克隆抗体
鸭IgG
制备
疫苗
分类号
S859.797 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
伪狂犬病抗原抗体诊断方法研究进展
被引量:
4
7
作者
娄高明
杜伟贤
机构
广东省农业科学院兽医研究所兽医生物技术重点实验室
出处
《动物科学与动物医学》
2000年第1期10-12,共3页
关键词
病毒病
伪狂犬病
抗原抗体
诊断方法
进展
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
育肥猪暴发弓形体病
8
作者
娄高明
杜伟贤
机构
广东省农业科学院兽医研究所
出处
《中国动物检疫》
CAS
2002年第4期29-29,共1页
关键词
育肥猪
弓形体病
临床症状
病理
诊断
治疗
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
现代分子生物学在NDV研究和生产中的应用
被引量:
1
9
作者
宋长绪
刘福安
杜伟贤
机构
广东省兽医研究所
华南农业大学
出处
《动物医学进展》
CSCD
1997年第2期5-6,共2页
文摘
本文论述了现代分子生物学技术在NDV的检测和基因工程疫苗方面的应用。评估了RNA指纹图谱、核酸探针及PCR等方法的优缺点及应用前景,重点概述了可以用于NDV强弱毒株鉴别检测的核酸探针法和F蛋白裂解位点多肽抗血清法。介绍了NDV在各种载体包括禽痘病毒、痘苗病毒。
关键词
分子生物学
新城疫
病毒
疫苗
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
S859.797 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RT-PCR快速检测口蹄疫病毒
娄高明
杜伟贤
杨傲冰
周秀蓉
张春红
谢明权
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
12
在线阅读
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职称材料
2
应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化
黄忠
黄引贤
杜伟贤
赵心贤
伍惠卿
张春红
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1997
7
在线阅读
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职称材料
3
伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定
敖敬群
娄高明
杨林
杜伟贤
龙綮新
王珣章
谢明权
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
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职称材料
4
伪狂犬病流行概况及猪场防制策略
娄高明
杜伟贤
《中国动物检疫》
CAS
1999
38
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职称材料
5
抗鸡IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
张春红
伍惠卿
杜伟贤
黄忠
赵心贤
林惠婵
《广东农业科学》
CSCD
1996
6
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职称材料
6
抗鸭IgG单克隆抗体的研究及其酶结合物的制备
伍惠卿
杜伟贤
赵心贤
黄忠
《广东农业科学》
CAS
CSCD
1993
2
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职称材料
7
伪狂犬病抗原抗体诊断方法研究进展
娄高明
杜伟贤
《动物科学与动物医学》
2000
4
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职称材料
8
育肥猪暴发弓形体病
娄高明
杜伟贤
《中国动物检疫》
CAS
2002
0
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职称材料
9
现代分子生物学在NDV研究和生产中的应用
宋长绪
刘福安
杜伟贤
《动物医学进展》
CSCD
1997
1
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职称材料
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