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LncRNA DANCR靶向miR-423-5p调控ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、炎症反应 被引量:6
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作者 李骞 李秀研 +2 位作者 林丽丽 许景芬 陈芬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期2187-2193,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)分化拮抗非蛋白编码RNA(DANCR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的血管内皮细胞(HUVEC)凋亡、炎症因子分泌的影响和可能机制。方法:50μg/ml的ox-LDL诱导HUVEC。RT-qPCR检测LncRNA DANCR和miR-423-5p表达... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)分化拮抗非蛋白编码RNA(DANCR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的血管内皮细胞(HUVEC)凋亡、炎症因子分泌的影响和可能机制。方法:50μg/ml的ox-LDL诱导HUVEC。RT-qPCR检测LncRNA DANCR和miR-423-5p表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡;ELISA试剂盒检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平。将LncRNA DANCR过表达载体、miR-423-5p抑制物分别转染HUVEC,检测过表达LncRNA DANCR或抑制miR-423-5p对ox-LDL诱导的HUVEC增殖、凋亡、炎症因子分泌的影响。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR确定Ln⁃cRNA DANCR与miR-423-5p之间靶向调控作用。结果:ox-LDL诱导后HUVEC中LncRNA DANCR表达、存活率显著降低,miR-423-5p表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05)。过表达LncRNA DANCR或抑制miR-423-5p表达后,ox-LDL诱导的HUVEC存活率显著升高,凋亡率显著降低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。miR-423-5p是LncRNA DANCR的靶基因,LncRNA DANCR负性调控miR-423-5p表达。过表达miR-423-5p能够逆转LncRNA DANCR过表达对ox-LDL诱导的HUVEC存活、凋亡和炎症因子分泌的影响(P<0.05)。结论:LncRNA DANCR能够提高HUVEC存活率,改善ox-LDL诱导的细胞凋亡和炎症反应,其机制与靶向调控miR-423-5p表达有关。 展开更多
关键词 LncRNA DANCR OX-LDL 内皮细胞 增殖 凋亡 miR-423-5p
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激活腺苷酸活化蛋白激酶α在苯扎贝特抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞炎症中的作用
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作者 李骞 张强 +2 位作者 叶伟祥 黄志坚 李秀研 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期528-534,共7页
目的探索激活腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)在苯扎贝特(BZF)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症中的作用。方法将HUVEC与ox-LDL 50 mg·L^(-1)和(或)BZF(25~100μmol·L^(-1))共孵育24 h,荧光定量PC... 目的探索激活腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)在苯扎贝特(BZF)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症中的作用。方法将HUVEC与ox-LDL 50 mg·L^(-1)和(或)BZF(25~100μmol·L^(-1))共孵育24 h,荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)m RNA的表达。Western蛋白印迹法检测TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和NF-κB(P65)的磷酸化水平。采用分子对接软件Autodock探索AMPK用于进行分子对接的蛋白结构是AMPKα与β复合物,与BZF之间的相互关系。将原代HUVEC与BZF 25~100μmol·L^(-1)孵育24 h后,Western蛋白印迹法检测p-AMPKα和AMPKα表达水平。BZF与AMPKα抑制剂Compound C5μmol·L^(-1)共孵育HUVEC 24 h,观察AMPKα对BZF抑制ox-LDL诱导HUVEC炎症的影响。结果与细胞对照组比较,ox-LDL刺激24 h,HUVEC的TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和p-P65的表达明显升高(P<0.01);不同浓度BZF显著抑制ox-LDL诱导的HUVEC中TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和p-P65表达的升高(P<0.01)。分子对接模拟显示,BZF与AMPK结合力为-8.66 kcal·mol-1。与细胞对照组比较,BZF能显著升高HUVEC中p-AMPKα的表达(P<0.01)。与ox-LDL+BZF处理组比较,AMPKα抑制剂ox-LDL+BZF+Compound C组TNF-α,IL-6,ICAM-1和VCAM-1表达显著升高(P<0.01)。结论 AMPKα的激活在BZF抑制ox-LDL诱导HUVEC炎症中发挥重要作用。 展开更多
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶α 苯扎贝特 氧化低密度脂蛋白 血管内皮细胞 炎症
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