一种农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法

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作者 夏启玉 降彦苗 +5 位作者 刘亚男 李海权 程汝宏 郭安平 刘国庆 赵辉 《热带作物学报》 北大核心 2025年第1期44-50,共7页

糜子(Panicum miliaceum L.)是我国传统的粮食作物,截至目前,针对糜子遗传转化方法的研究仍较少,本研究旨在建立农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法。以糜子品种冀黍5号的成熟种子为外植体,在CIM和MSD诱导培养基上分别诱导糜子的胚性愈伤... 糜子(Panicum miliaceum L.)是我国传统的粮食作物,截至目前,针对糜子遗传转化方法的研究仍较少,本研究旨在建立农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法。以糜子品种冀黍5号的成熟种子为外植体,在CIM和MSD诱导培养基上分别诱导糜子的胚性愈伤,以其作为转化受体材料,用含植物表达载体的农杆菌侵染60min并共培养6d,转接至含0.025g/L潮霉素的筛选培养基上筛选出抗性愈伤,接着在含0.015g/L潮霉素的分化培养基上分化,最后在含0.015g/L潮霉素的生根培养基上生根成苗,用载体特异性引物对再生植株进行PCR检测,鉴定其是否为阳性转基因植株。根据多个批次的转化实验统计糜子的抗性再生植株的筛选效率和转化效率。结果表明:CIM和MSD诱导培养基均能诱导出糜子胚性愈伤,但CIM培养基诱导的糜子胚性愈伤效果更好;糜子胚性愈伤在被农杆菌侵染及与农杆菌共培养后,经在含潮霉素的培养基上筛选、分化和生根后获得多株抗性再生糜子植株,3次试验获得的糜子抗性再生植株的PCR鉴定阳性率为100%,平均转化效率为30%以上。本研究成功建立了农杆菌介导的糜子遗传转化方法,操作简单,转化效率高,成本低廉,且转化不受季节限制,能规模化开展,为糜子的遗传改良提供有效的技术手段。 展开更多

关键词 糜子 农杆菌 遗传转化 转化效率

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复方羟氯扎胺混悬液对西门塔尔肉牛肝片吸虫和胃肠道线虫的临床药效试验

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作者 张志锦 商子璇 +7 位作者 周绪正 白玉彬 徐晶 戴钰茵 李海權 李杰航 朱阵 张继瑜 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第8期21-30,共10页

为了评估本团队研发的复方羟氯扎胺混悬液对西门塔尔肉牛自然感染肝片吸虫(Fasciola hepatica)和胃肠道线虫(GINs)的临床药效,并确定其最佳临床推荐剂量,为其临床应用提供参考依据。本试验将75头经虫卵筛选呈阳性的西门塔尔肉牛随机分为... 为了评估本团队研发的复方羟氯扎胺混悬液对西门塔尔肉牛自然感染肝片吸虫(Fasciola hepatica)和胃肠道线虫(GINs)的临床药效,并确定其最佳临床推荐剂量,为其临床应用提供参考依据。本试验将75头经虫卵筛选呈阳性的西门塔尔肉牛随机分为5个组,每组15头,分别为复方羟氯扎胺混悬液低剂量组[0.125 mL/(kg·bw)]、中剂量组[0.250 mL/(kg·bw)]、高剂量组[0.500 mL/(kg·bw)]、对照药物组[Levafas diamond,0.250 mL/(kg·bw)]和空白对照组,分别在给药后第0、28天,采集血液,进行血液生理生化指标测定;在给药后第0、7、14、21、28天,采集每头牛的新鲜粪便,测定肝片吸虫和GINs的每克粪便虫卵数(EPG),计算精计驱虫率和虫卵转阴率。结果显示,给药后第0、28天,各给药组与空白对照组的血液生理生化指标无显著差异(P>0.05)。在给药后第28天,与空白对照组相比,低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照药物组肝片吸虫和GINs的EPG均显著减少(P<0.05);在给药后第14天,各给药组精计驱虫率和虫卵转阴率均达到最大值。结果表明,复方羟氯扎胺混悬液对西门塔尔肉牛肝片吸虫和GINs具有显著的驱杀效果,推荐复方羟氯扎胺混悬液的临床应用剂量为0.250 mL/(kg·bw)。 展开更多

关键词 复方羟氯扎胺混悬液 西门塔尔肉牛 肝片吸虫 胃肠道线虫 药效学

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氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查方法的适用性试验

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作者 白玉婷 张欣欣 +4 位作者 于方凌 白玉彬 李海權 张继瑜 李冰 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期80-86,共7页

为了建立并验证氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查方法,本试验分别考察平皿常规法和平皿中和法去除氟雷拉纳咀嚼片中抑菌成分活性的效果,进行需氧菌(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)、霉菌和酵母菌总数的测定,并对控制菌(大肠... 为了建立并验证氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查方法,本试验分别考察平皿常规法和平皿中和法去除氟雷拉纳咀嚼片中抑菌成分活性的效果,进行需氧菌(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)、霉菌和酵母菌总数的测定,并对控制菌(大肠埃希菌和沙门菌)进行检查,筛选出最优的检查方法进行供试品微生物限度检查。结果显示,中和法可以较好地消除氟雷拉纳咀嚼片中抑菌成分的抑菌活性,使用中和法进行试验,需氧菌、霉菌和酵母菌的回收率均介于50%~200%,控制菌阳性对照组中菌落生长良好,供试品组和阴性对照组中均无细菌生长,符合《中华人民共和国兽药典》规定,可使用中和法进行供试品中微生物计数及控制菌大肠埃希菌和沙门菌检查。本试验所建立方法(中和法)准确可行,能有效去除氟雷拉纳咀嚼片处方中抑菌成分的抑菌性,适用于氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查,为氟雷拉纳咀嚼片的质量评价提供参考。 展开更多

关键词 氟雷拉纳咀嚼片 微生物限度检查 适用性试验 中和法

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适宜机械化生产的优质抗逆糜子新品种冀黍9号的选育及其配套栽培技术 被引量：1

4

作者 刘亚男 降彦苗 +8 位作者 谭琦 李昊天 梁国辉 刘峰 杨洪升 王伟博 董立 刘国庆 李海权 《河北农业科学》 2024年第4期1-3,34,共4页

针对糜子生产中倒伏严重、不适宜机械化种植的问题,以黄糜子为母本、晋黍5号为父本进行有性杂交,采用系谱法选育出糜子新品种“冀黍9号”。该品种中矮秆,主茎高140.8cm,千粒重7.9g,丰产性好,稳产性高,抗逆性强,适宜机械化生产;2 a区域... 针对糜子生产中倒伏严重、不适宜机械化种植的问题,以黄糜子为母本、晋黍5号为父本进行有性杂交,采用系谱法选育出糜子新品种“冀黍9号”。该品种中矮秆,主茎高140.8cm,千粒重7.9g,丰产性好,稳产性高,抗逆性强,适宜机械化生产;2 a区域试验计14点次全部增产,平均产量为2 848.5 kg/hm^(2),较对照增产18.6%;抗倒性0级,抗旱性1级,抗黑穗病2级。 展开更多

关键词 糜子 冀黍9号 中矮秆 抗倒伏

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糜子EMS诱变条件优化及突变体库的构建 被引量：1

5

作者 刘亚男 降彦苗 +6 位作者 李昊天 谭琦 刘峰 王伟博 董立 刘国庆 李海权 《河北农业科学》 2024年第5期1-5,共5页

丰富糜子种质资源,可以为糜子育种和功能基因组学研究提供新材料。采用EMS诱变技术,构建糜子突变体库。以河北高产、优质糜子品种冀黍3号为试验材料,采用二因素(EMS溶液浓度、浸种时间)三水平(EMS溶液浓度0.6%、0.8%和1.0%,浸种时间8、1... 丰富糜子种质资源,可以为糜子育种和功能基因组学研究提供新材料。采用EMS诱变技术,构建糜子突变体库。以河北高产、优质糜子品种冀黍3号为试验材料,采用二因素(EMS溶液浓度、浸种时间)三水平(EMS溶液浓度0.6%、0.8%和1.0%,浸种时间8、10、12 h)试验设计,以不进行EMS诱变为对照,对糜子EMS诱变条件进行优化;并在此条件下进行糜子突变体库构建,在M_(2)代进行表型性状鉴定,在M4代进行表型性状验证鉴定。结果表明:糜子EMS诱变的最优条件为EMS溶液浓度0.8%、浸种10 h;经M4代表型性状验证,获得稳定遗传的13个表型突变性状,共计139个突变材料,突变频率为3.53%。 展开更多

关键词 糜子 EMS诱变 突变体

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测土配方施肥对黍子产量和化肥利用率的影响

6

作者 李静静 郑贵银 +4 位作者 刘旺 徐冰 刘猛 李海权 崔纪菡 《河北农业科学》 2024年第5期12-15,32,共5页

为明确黍子氮磷钾肥需求特征、优化施肥结构减少化肥损失,开展了测土配方施肥方式下的黍子化肥利用率试验。以黍子品种榆黍2号为试材,采用大田试验,施肥方式设不施肥(空白对照,CK)、缺氮施肥(PK)、缺磷施肥(NK)、缺钾施肥(NP)、测土配... 为明确黍子氮磷钾肥需求特征、优化施肥结构减少化肥损失,开展了测土配方施肥方式下的黍子化肥利用率试验。以黍子品种榆黍2号为试材,采用大田试验,施肥方式设不施肥(空白对照,CK)、缺氮施肥(PK)、缺磷施肥(NK)、缺钾施肥(NP)、测土配方施肥(NPK)5个处理,收获后测定子粒产量和茎叶干重,计算谷草比;测定子粒和茎叶的全氮、全磷、全钾含量,计算氮、磷、钾的肥料利用率。结果表明:NPK处理的氮、磷、钾肥料利用率分别为51.27%、47.94%和13.33%;缺素施肥的黍子产量均磷肥>钾肥。测土平衡施用氮磷钾肥对黍子增产效果最好,但目前钾肥利用率偏低。建议生产上配合测土配方施肥,减少化肥施用量,以防土壤污染。 展开更多

关键词 测土配方施肥 黍子 产量 养分吸收量 化肥利用率

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谷子干草饲用品质性状变异及相关性分析 被引量：66

7

作者 智慧 牛振刚 +7 位作者 贾冠清 柴杨 李伟 王永芳 李海权 陆平 白素兰 刁现民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期800-807,共8页

谷子是重要的饲草作物,但其饲草品质性状研究滞后制约了谷子饲草品种培育和栽培。本研究对47个谷子品种在我国高寒农牧地区栽培的饲用干草品质性状进行了系统测定。结果表明,供试材料粗蛋白含量的变异范围为5.42%～12.45%,变异系数为14.... 谷子是重要的饲草作物,但其饲草品质性状研究滞后制约了谷子饲草品种培育和栽培。本研究对47个谷子品种在我国高寒农牧地区栽培的饲用干草品质性状进行了系统测定。结果表明,供试材料粗蛋白含量的变异范围为5.42%～12.45%,变异系数为14.25;粗脂肪含量的变异范围为0.64%～1.43%,变异系数为15.84;粗灰分含量的变异范围为8.50%～15.60%,变异系数为13.71;总磷含量的变异范围为0.10%～0.32%,变异系数为20.00;总钙含量的变异范围为0.27%～0.67%,变异系数为20.00。粗纤维、无氮浸出物和水分含量表现出较小的变异。主成分分析表明,影响谷子饲草品质的主要性状是粗纤维、粗灰分、粗蛋白和无氮浸出物,粗蛋白与粗纤维和无氮浸出物均为负相关。综合表明,Li05-569、饿死驴、系295和红根谷是品质性状综合表现优良的品种。 展开更多

关键词 谷子 饲草 粗蛋白 粗纤维

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谷子全生育期抗旱性鉴定及抗旱指标筛选 被引量：86

8

作者 张文英 智慧 +6 位作者 柳斌辉 彭海成 李伟 王永芳 李海权 栗雨勤 刁现民 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期560-565,共6页

作物全生育期抗旱性对发掘和利用抗旱品种和抗旱基因至关重要,但谷子全生育期抗旱鉴定至今未有报道,抗旱鉴定缺乏鉴定指标。本试验在干旱池模拟干旱条件下,对苗期抗旱性表现不同的谷子品种进行了全生育期抗旱性研究,调查分析了根干重等... 作物全生育期抗旱性对发掘和利用抗旱品种和抗旱基因至关重要,但谷子全生育期抗旱鉴定至今未有报道,抗旱鉴定缺乏鉴定指标。本试验在干旱池模拟干旱条件下,对苗期抗旱性表现不同的谷子品种进行了全生育期抗旱性研究,调查分析了根干重等形态和生理性状在干旱胁迫条件下的变化;采用相关和灰色关联度等方法,分析这些指标与抗旱性(DRI)的关系。结果表明,相对根冠比、相对单穗粒重和灌浆期光合速率、蒸腾速率同抗旱性表现极显著相关,可以作为谷子全生育期抗旱性鉴定的指标;而相对根干重、相对单穗重、相对株高和气孔导度则可以作为谷子全生育期抗旱性鉴定的参考指标;在供试的品种中,红根谷和大齐头白表现了良好的综合抗旱性。本文还讨论了抗旱性的复杂性以及不同性状对干旱胁迫的反应,所建立的指标对谷子全生育期抗旱鉴定具有指导意义。 展开更多

关键词 谷子 干旱胁迫 抗旱指数 鉴定指标

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谷子孕穗期一些生理性状与品种抗旱性的关系 被引量：37

9

作者 张文英 智慧 +6 位作者 柳斌辉 李伟 王永芳 李海权 贾冠清 栗雨勤 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期128-133,共6页

探索谷子孕穗期对干旱环境的生理生化适应机制,筛选谷子孕穗期抗旱性鉴定的生理指标。利用抗旱性不同的20个谷子品种,在模拟干旱棚内通过孕穗期干旱胁迫,研究可溶性糖、脯氨酸、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)等渗透势调节物质的含量和保... 探索谷子孕穗期对干旱环境的生理生化适应机制,筛选谷子孕穗期抗旱性鉴定的生理指标。利用抗旱性不同的20个谷子品种,在模拟干旱棚内通过孕穗期干旱胁迫,研究可溶性糖、脯氨酸、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)等渗透势调节物质的含量和保护性酶活性的变化。孕穗期干旱胁迫使谷子叶片脯氨酸、可溶性糖和MDA含量增加,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性增高,而过氧化物酶(Peroxi-dase,POD)的活性则降低。相关分析表明,比较干旱胁迫与非干旱胁迫条件下可溶性糖、MDA含量和SOD活性的相对值与品种的抗旱指数相关性达到显著或极显著水平。水、旱条件下可溶性糖、MDA含量和SOD活性相对值可作为谷子孕穗期抗旱性鉴定指标,利用此3项相对值与抗旱指数所建立的回归方程:y=0.111x1-0.893x2+0.682x3,可预测谷子品种孕穗期的抗旱性。 展开更多

关键词 谷子 干旱胁迫 孕穗期 生理生化性状

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谷子孕穗期抗旱指标筛选 被引量：20

10

作者 张文英 智慧 +9 位作者 柳斌辉 谢俊雪 李积铭 李伟 贾冠清 王永芳 李海权 柴杨 栗雨勤 刁现民 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期765-772,共8页

为研究谷子孕穗期在干旱环境的形态、生理、生化性状变化趋势,筛选谷子孕穗期抗旱性鉴定指标,以20个谷子品种为试验材料,在模拟干旱棚中分析了谷子孕穗期干旱胁迫条件下形态和生理、生化指标的变化。试验表明:单穗重、单穗粒重、株高、... 为研究谷子孕穗期在干旱环境的形态、生理、生化性状变化趋势,筛选谷子孕穗期抗旱性鉴定指标,以20个谷子品种为试验材料,在模拟干旱棚中分析了谷子孕穗期干旱胁迫条件下形态和生理、生化指标的变化。试验表明:单穗重、单穗粒重、株高、穗下茎长、千粒重与抗旱指数的相关性显著,可作为孕穗期抗旱性的形态指标;叶绿素含量、可溶性糖、丙二醛含量和超氧化岐化酶活性(SOD)4个指标与抗旱指数的相关性显著,可作为孕穗期的生理、生化指标。通过主成分分析确立了千粒重、单穗重、叶绿素和SOD等4个指标的相对值为谷子孕穗期抗旱性综合指标,以抗旱指数为因变量,4个综合指数为自变量建立的回归方程对供试品种的抗旱性进行预测具有高的准确性。 展开更多

关键词 谷子 孕穗期 抗旱性指标 旱胁迫

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狗尾草属野生近缘种的染色体鉴定 被引量：15

11

作者 王永强 智慧 +3 位作者 李伟 李海权 王永芳 刁现民 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2007年第2期159-164,共6页

对来自多个国家和地区的10个种(青狗尾草S.viridis,法氏狗尾草S.faberii,轮生狗尾草S.verticillata、S.verticillifor-mis,金色狗尾草S.glauca、S.pumila、S.grisebachii、S.leucopila、S.parviflora、S.queenslandica等)50份狗尾草材... 对来自多个国家和地区的10个种(青狗尾草S.viridis,法氏狗尾草S.faberii,轮生狗尾草S.verticillata、S.verticillifor-mis,金色狗尾草S.glauca、S.pumila、S.grisebachii、S.leucopila、S.parviflora、S.queenslandica等)50份狗尾草材料进行了染色体计数及倍性鉴定。发现狗尾草属中的青狗尾草均为二倍体,金色狗尾草S.glauca有四倍体和八倍体,轮生狗尾草S.verticillata有二倍体和四倍体,法氏狗尾草S.faberii为四倍体,S.pumila有二倍体和四倍体,S.grisebachii为二倍体,S.leucopila为二倍体,S.queenslandica为四倍体。本研究中对S.grisebachii、S.leucopila、S.queenslandica3个种是首次染色体倍性观察。发掘近缘种的有益基因是作物育种的重要途径之一,本研究搜集的谷子近缘野生种对谷子远缘杂交育种和谷子起源进化分析有重要意义。 展开更多

关键词 狗尾草属 野生近缘种 染色体数目 倍性

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基因水平转移的评判方法和转移方式研究进展 被引量：18

12

作者 李志江 李海权 刁现民 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1108-1114,共7页

基因水平转移是不同物种之间或细胞器间基因的交流。基因水平转移现象在原核生物中普遍存在,在真核生物中近年来也发现了众多例证,说明水平转移是生物界的普遍现象。文章着重对基因水平转移的概念、评判基因水平转移的标准,水平转移的... 基因水平转移是不同物种之间或细胞器间基因的交流。基因水平转移现象在原核生物中普遍存在,在真核生物中近年来也发现了众多例证,说明水平转移是生物界的普遍现象。文章着重对基因水平转移的概念、评判基因水平转移的标准,水平转移的特点和转移方式,以及基因水平转移对基因组进化的作用等方面的研究进展进行了综述。在已有的基因水平转移研究中进化树分析法、碱基组成分析法、选择压力分析法、内含子分析法、特殊序列分析法和核苷酸组成偏向性分析法等几种是常用的方法;转座序列是生物中最易于发生水平转移的基因类型;原核生物基因水平转移的主要方式有转化、接合和转导,真核生物中水平转移发生方式尚不清楚。基因水平转移在基因、基因组和生物进化中有着其独特的作用。 展开更多

关键词 基因水平转移 基因组进化 转移方式研究 生物进化

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利用野生青狗尾草的细胞质培育谷子质核互作雄性不育材料 被引量：11

13

作者 智慧 王永强 +4 位作者 李伟 王永芳 李海权 陆平 刁现民 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2007年第3期261-264,共4页

利用野生青狗尾草N10为母本,谷子农家品种大青秸为父本,进行种间杂交,获得了3株杂种。杂种在农艺性状上表现为谷子和青狗尾草的种间类型,花器表现了雄性败育,但雌蕊发育正常,能接受外来花粉结实。细胞形态学观察表明,其雄性败育表现为... 利用野生青狗尾草N10为母本,谷子农家品种大青秸为父本,进行种间杂交,获得了3株杂种。杂种在农艺性状上表现为谷子和青狗尾草的种间类型,花器表现了雄性败育,但雌蕊发育正常,能接受外来花粉结实。细胞形态学观察表明,其雄性败育表现为单核小孢子典败。该谷子雄性不育材料的获得,为利用野生青狗尾草的细胞质培育谷子质核互作雄性不育系,进而为实现谷子三系配套杂种优势利用奠定了基础。 展开更多

关键词 谷子 青狗尾草 雄性不育系 远缘杂交

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基于马尔可夫模型对徐州市土地利用动态变化的研究 被引量：12

14

作者 胡召玲 张国成 +2 位作者 禚昌芬 李海权 赵昕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第8期2344-2345,共2页

利用1994和2003年2期TM/ETM+影像,获得徐州市区土地利用现状图,据此计算出1994～2003年徐州市区各土地利用类型的年变化率指数和转移矩阵,并运用马尔可夫模型对该区土地利用变化进行研究。结果表明,在1994～2003年徐州市区土地利用变化... 利用1994和2003年2期TM/ETM+影像,获得徐州市区土地利用现状图,据此计算出1994～2003年徐州市区各土地利用类型的年变化率指数和转移矩阵,并运用马尔可夫模型对该区土地利用变化进行研究。结果表明,在1994～2003年徐州市区土地利用变化明显,其中建设用地和未利用地变化较大,城市绿地和农业用地变化次之,水体的变化则不明显。预测在未来18年间,建设用地持续增加,农业用地进一步减少,城市绿地增长缓慢。 展开更多

关键词 土地利用 遥感 马尔可夫模型 徐州市

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利用花粉管通道转化谷子DNAj基因获得转基因小麦 被引量：8

15

作者 王永芳 张军 +4 位作者 崔润丽 李伟 智慧 李海权 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期17-21,共5页

为提高小麦的抗旱能力,采用花粉管通道法将本实验室克隆的谷子抗逆相关基因DNAj转入小麦中。对授粉方式、柱头处理方式、质粒DNA浓度及DNA稀释试剂等因素对结实率的影响进行了对比,结果只有授粉方式对结实率的影响有显著差异,其他条件... 为提高小麦的抗旱能力,采用花粉管通道法将本实验室克隆的谷子抗逆相关基因DNAj转入小麦中。对授粉方式、柱头处理方式、质粒DNA浓度及DNA稀释试剂等因素对结实率的影响进行了对比,结果只有授粉方式对结实率的影响有显著差异,其他条件下结实率均未显示显著差异。对转化获得的703株T0小麦植株提取DNA进行分子检测,有1株小麦稳定扩增到了预期的1 260 bp的目的基因片段。虽然转化效率偏低(1.42‰),但说明利用花粉管通道法将谷子的抗逆相关基因DNAj导入小麦是可行的,为创造抗逆性改良的小麦新材料奠定了基础。 展开更多

关键词 小麦 DNAj基因 花粉管通道法 转化

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谷子DnaJ蛋白基因的克隆 被引量：11

16

作者 崔润丽 智慧 +4 位作者 王永芳 李伟 李海权 黄占景 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期9-13,共5页

DnaJ蛋白是近年研究较多的同热激等胁迫反应相关的基因。本研究用0.8%NaCl胁迫下的谷子幼苗提取RNA,用反转录酶M-MLV扩增得到第一链cDNA,再以第一链cDNA为模板进行PCR扩增,克隆获得了完整的谷子DnaJ蛋白基因,该基因cDNA全长1 260 bp,编... DnaJ蛋白是近年研究较多的同热激等胁迫反应相关的基因。本研究用0.8%NaCl胁迫下的谷子幼苗提取RNA,用反转录酶M-MLV扩增得到第一链cDNA,再以第一链cDNA为模板进行PCR扩增,克隆获得了完整的谷子DnaJ蛋白基因,该基因cDNA全长1 260 bp,编码419个氨基酸,具有DnaJ蛋白分子伴侣系统的3个保守结构域。将谷子DnaJ蛋白基因构建入表达载体pGFP,获得了谷子DnaJ基因的表达载体。该基因的克隆和表达载体构建,为谷子DnaJ蛋白基因的功能分析以及谷子耐热抗旱机理研究有重要意义。 展开更多

关键词 谷子 DNAJ 基因克隆

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适合于狗尾草属遗传分析的ISSR标记筛选及反应体系优化研究 被引量：10

17

作者 李伟 智慧 +2 位作者 王永芳 李海权 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期141-145,共5页

利用公共数据库已有的ISSR序列信息,检验了29条ISSR引物在谷子等狗尾草属植物基因组的扩增性,其中14条在狗尾草属中有良好扩增,其余15条在狗尾草属中无任何扩增。能稳定扩增的14条引物全为3'-锚定引物,6条5'-锚定引物在狗尾草... 利用公共数据库已有的ISSR序列信息,检验了29条ISSR引物在谷子等狗尾草属植物基因组的扩增性,其中14条在狗尾草属中有良好扩增,其余15条在狗尾草属中无任何扩增。能稳定扩增的14条引物全为3'-锚定引物,6条5'-锚定引物在狗尾草属中得不到扩增。研究发现AG,GA和CA重复的引物在狗尾草属植物有较好扩增,且多态性强。利用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物、Taq酶4种因素、4个水平对狗尾草属谷子ISSR反应体系进行优化,确定了适合谷子的ISSR反应体系,在20μL体系中,含1×PCR buffer、Mg2+浓度2.0 mmol/L,dNTP浓度0.25 mmol/L,Taq酶0.4μL,引物浓度0.25μmol/L,50 ng模板,通过梯度PCR确定了引物的退火温度。本研究筛选的ISSR引物及建立的优化反应体系可用于谷子等狗尾草属植物遗传多样性和基因组研究,并对其他近缘作物有指导意义。 展开更多

关键词 谷子 ISSR标记 狗尾草属

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谷子3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与结构分析 被引量：10

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作者 崔润丽 王永芳 +4 位作者 智慧 李伟 李海权 黄占景 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期10-14,共5页

3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)在谷子盐旱胁迫早期高频率表达,为研究该基因在胁迫反应及其他代谢中的详细功能,本研究利用RACE技术克隆了谷子的GAPDH基因。该基因cDNA全长1 328 bp,包括1 008 bp的开放阅读框,共编码338个氨基酸,肽段的... 3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)在谷子盐旱胁迫早期高频率表达,为研究该基因在胁迫反应及其他代谢中的详细功能,本研究利用RACE技术克隆了谷子的GAPDH基因。该基因cDNA全长1 328 bp,包括1 008 bp的开放阅读框,共编码338个氨基酸,肽段的分子量为35 911.03 Da,极性氨基酸占29.12%。序列比较分析发现,谷子的GAPDH同玉米的同源序列表现了最高的相似性,同水稻和小麦同源序列的相似性次之,同双子叶植物的同源序列则相差较远。 展开更多

关键词 谷子 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 基因克隆

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衰老小鼠脑组织mtDNA缺失呼吸链酶复合体活性的变化以及独活作用机制的实验研究 被引量：11

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作者 李海权 李德新 孙松辉 《中医药学刊》 CAS 2006年第2期279-281,共3页

目的:研究独活及其醇提物对衰老小鼠脑组织线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法:用聚合酶链反应(PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果:自然衰老小鼠脑组织m tDNA缺失较青年小鼠明显增多,线粒体呼吸链酶复合体... 目的:研究独活及其醇提物对衰老小鼠脑组织线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法:用聚合酶链反应(PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果:自然衰老小鼠脑组织m tDNA缺失较青年小鼠明显增多,线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活性较青年小鼠明显下降。独活及其醇提物可减少自然衰老小鼠脑组织的m tDNA缺失,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活性。结论:独活及其醇提物对自然衰老小鼠线粒体DNA的氧化损伤有保护作用。 展开更多

关键词 独活 独活醇提物 脑老化 线粒体DNA 呼吸链 复合体酶活性

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豫谷1号和青狗尾草RIL群体根系变异和垂直分布 被引量：4

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作者 张文英 智慧 +10 位作者 柳斌辉 王雪征 庞昭进 李积铭 王广才 李明哲 王永芳 李伟 李海权 贾冠清 刁现民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1717-1724,共8页

根系在谷子生长发育过程中起着极为重要的作用。本试验以豫谷1号和青狗尾草杂交衍生的RIL群体196个家系为材料,采用根管土柱栽培实测根系性状的方法,调查谷子根系性状的变异及在土壤中垂直空间的分布情况。结果表明,谷子单株根系长度平... 根系在谷子生长发育过程中起着极为重要的作用。本试验以豫谷1号和青狗尾草杂交衍生的RIL群体196个家系为材料,采用根管土柱栽培实测根系性状的方法,调查谷子根系性状的变异及在土壤中垂直空间的分布情况。结果表明,谷子单株根系长度平均为（89.42±32.67）m,单株根系总面积平均为（2.74±0.93）dm2,单株根系总体积平均为（30.94±13.93）mL,单株根系根直径平均数为（0.52±0.06）mm,单株根系平均干重为（0.98±0.45）g,除根系直径外,各根系性状在家系间均表现很高的变异系数;单株根量垂直分布分析表明,谷子根深可到2.4 m,90%的根量分布在0~200 cm范围之内,根量在土壤中整体分布呈＂8＂型架构;根系性状和地上农艺性状的相关分析表明,单株地上生物量和单株籽粒产量与地下根量呈极显著正相关,是根系选择的间接指标。 展开更多

关键词 谷子 根系 耕层 重组自交系群体

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