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非洲猪瘟病毒感染机制和诊断方法的研究进展 被引量:12
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作者 李洪利 张维 +2 位作者 李慧 王君玮 曹金山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期836-840,共5页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由属于非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的猪的一种急性、高度接触性传染病。强病毒株感染家猪的发病率和死亡率达100%,曾在非洲、美洲和欧洲部分地区广泛流行,并... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由属于非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的猪的一种急性、高度接触性传染病。强病毒株感染家猪的发病率和死亡率达100%,曾在非洲、美洲和欧洲部分地区广泛流行,并造成了严重的经济损失。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 感染机制 诊断方法 接触性传染病 经济损失 死亡率 发病率 病毒株
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非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:33
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作者 李洪利 曹金山 +1 位作者 王君玮 张维 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期37-40,共4页
本研究为了建立一套检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的实时荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的23株编码ASFV结构蛋白p72的基因序列,设计引物和探针,优化退火温度、Mg2+浓度和引物、探针浓度,生成标准曲线,进行重... 本研究为了建立一套检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的实时荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的23株编码ASFV结构蛋白p72的基因序列,设计引物和探针,优化退火温度、Mg2+浓度和引物、探针浓度,生成标准曲线,进行重复性、敏感性、特异性试验,并检测样品。结果显示,优化的退火温度为60℃,Mg2+终浓度为4mmol/L,引物、探针终浓度分别为0.8、0.3μmol/L。重复性试验变异系数均小于1.3%,敏感性试验最低能够检测到10拷贝/μL的质粒,以其他5种猪病病毒和ASFV质粒为模板进行特异性试验,只有ASFV质粒出现扩增曲线。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法是快速、灵敏、特异的检测ASFV的方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 ASFV 荧光定量PCR
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非小细胞肺癌中FHIT基因异常甲基化对其蛋白、mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 李洪利 张伟栋 +1 位作者 李文通 尹崇高 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第7期760-764,共5页
背景与目的脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是一种新的抑癌基因,其启动子甲基化在肿瘤的发生和发展过程中发挥重要作用。本研究的目的是通过检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中抑癌基因FHIT启动子Cp... 背景与目的脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是一种新的抑癌基因,其启动子甲基化在肿瘤的发生和发展过程中发挥重要作用。本研究的目的是通过检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中抑癌基因FHIT启动子CpG岛异常甲基化和蛋白、转录表达情况及其相互关系,探讨FHIT基因在NSCLC发生发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)、免疫印迹(Western Blot)及RT-PCR测定52例NSCLC组织及其癌旁正常组织(>5cm)中FHIT的甲基化、蛋白表达和转录水平。结果NSCLC癌组织中FHIT甲基化率为38.46%(20/52),在癌旁正常组织中FHIT甲基化率为7.69%(4/52),两者差异存在统计学意义(P<0.05);癌组织中FHIT蛋白表达率为28.8%(15/52),癌旁正常组织FHIT蛋白表达率为88.5%(46/52),两者差异存在统计学意义(P=0.000);FHIT mRNA在癌组织中表达率为51.9%(27/52),在癌旁正常组织中全部表达,且表达量明显高于癌组织(P=0.000)。结论在NSCLC中,FHIT基因启动子甲基化频率明显升高,其蛋白表达率明显下降,mRNA表达率下降,提示FHIT启动子甲基化在肺癌的发生和发展中起着一定作用,而且FHIT基因的甲基化与蛋白及mRNA的表达存在一定的关系。 展开更多
关键词 肺肿瘤 甲基化 Methylation—specific PCR FHIT基因
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冠状动脉合并颈动脉粥样硬化性狭窄患者同期血运重建七例临床分析 被引量:4
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作者 李洪利 焦力群 +3 位作者 王亚冰 冯磊 李杨 刘燕晖 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期405-412,共8页
目的探讨同期行颈动脉及冠状动脉血运重建治疗冠心病合并颈动脉粥样硬化性狭窄的临床经验,评估其安全性及可行性。方法回顾性分析2018年12月至2020年10月于首都医科大学宣武医院心脏外科与神经外科连续收治的7例冠心病合并颈动脉粥样硬... 目的探讨同期行颈动脉及冠状动脉血运重建治疗冠心病合并颈动脉粥样硬化性狭窄的临床经验,评估其安全性及可行性。方法回顾性分析2018年12月至2020年10月于首都医科大学宣武医院心脏外科与神经外科连续收治的7例冠心病合并颈动脉粥样硬化性狭窄患者,均同期行不停跳冠状动脉旁路移植术(CABG)和颈动脉内膜切除术(CEA)或颈动脉支架置入术(CAS)。7例患者中,男6例,女1例;年龄57~67岁,平均(62±4)岁;冠状动脉DSA示,4例为左主干+3支病变,2例为3支病变,1例为双支病变;颈动脉DSA示,1例为单侧颈动脉闭塞,6例存在双侧颈动脉粥样硬化性狭窄,双侧狭窄率≥50%且靶血管狭窄率≥80%,包括对侧中度狭窄(50%~69%)4例、重度狭窄(≥70%)1例。所有患者优先处理颈动脉病变,再行冠状动脉旁路移植术。收集并分析所有患者的人口学资料(性别、年龄)、危险因素(高血压病、糖尿病、高脂血症、吸烟史)及临床资料,临床资料包括病变特征(颈动脉责任病变侧别、冠状动脉病变部位及其狭窄程度)、围手术期及随访等情况。结果7例冠心病合并颈动脉粥样硬化性狭窄患者中,3例同期行CAS+不停跳CABG,3例同期行CEA+不停跳CABG,1例同期行CEA+CAS+不停跳CABG。术后住院期间2例患者出现低血压(收缩压<90 mmHg),1例患者出现短暂性脑缺血发作。围手术期无死亡,无新发心肌梗死以及脑梗死等并发症。术后随访患者7例,随访时间6~19个月,1例再发间断头晕症状入院就诊,为双侧颈动脉病变,拒绝再次手术;1例因胸闷症状入院,冠状动脉CTA示桥血管及吻合口显影良好;其余患者无主要心脑血管不良事件以及死亡发生。结论初步分析显示,同期行颈动脉及冠状动脉血运重建术可考虑作为冠心病合并颈动脉粥样硬化性狭窄患者的一种治疗选择,但需进一步验证。 展开更多
关键词 冠心病 颈动脉狭窄 冠状动脉旁路移植术 颈动脉内膜切除术 颈动脉支架置入术
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过表达Snail增强肺癌细胞A549的体外侵袭能力 被引量:4
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作者 李洪利 尹崇高 +2 位作者 李文通 孙永红 钟延美 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期943-948,共6页
用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载... 用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载体转染肺癌A549细胞后,进行G418筛选;光镜观察培养后细胞形态学的改变、免疫细胞化学与免疫荧光检测细胞表达E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的改变,Western印迹检测细胞中E-钙黏着蛋白和波形蛋白的改变,Transwell侵袭小室法进行细胞体外侵袭能力检测.采用pcDNA3.1-snail转染细胞后,A549细胞变得细长,细胞融合度降低.免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹结果显示,E-钙黏着蛋白表达降低,波形蛋白表达升高;transwell侵袭小室法结果显示,过表达Snail的A549细胞穿透matrigel胶的细胞数明显增多.结果提示,Snail能有效诱导肺癌发生EMT,并且能增强肺癌的体外侵袭能力. 展开更多
关键词 转录因子SNAIL 上皮细胞-间质转化 肺癌 侵袭能力
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一种高保真同态滤波遥感影像薄云去除方法 被引量:13
6
作者 李洪利 沈焕锋 +2 位作者 杜博 吴柯 《遥感信息》 CSCD 2011年第1期41-44,58,共5页
同态滤波是一种常用的遥感影像薄云去除方法,但传统方法在抑制薄云对应的低频区域时,会不可避免地改变非云区的辐射信息。本文提出一种高保真遥感影像薄云去除方法,在同态滤波框架内利用基于区域模板的检测方法进行云区判别,处理时仅对... 同态滤波是一种常用的遥感影像薄云去除方法,但传统方法在抑制薄云对应的低频区域时,会不可避免地改变非云区的辐射信息。本文提出一种高保真遥感影像薄云去除方法,在同态滤波框架内利用基于区域模板的检测方法进行云区判别,处理时仅对云区用同态滤波结果进行替换,无云区则保留原始影像的亮度值。为进一步提高影像的保真度,影像拉伸处理时进一步剔除了云区对拉伸系数的影响。实验结果表明,本文方法能够在有效去除薄云的同时保留非云区的辐射信息,具有高保真特性。 展开更多
关键词 同态滤波 云区判别 区域模板 去薄云
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5-氮杂脱氧胞苷对非小细胞肺癌细胞A549中抑癌基因FHIT表达的影响 被引量:3
7
作者 李洪利 李文通 +3 位作者 张伟栋 尹崇高 唐勇 刘传亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1399-1400,共2页
关键词 5-氮杂脱氧胞苷 肺肿瘤 FHIT基因 甲基化 甲基化特异性聚合酶链式反应
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非洲猪瘟病毒VP73蛋白主要抗原表位区的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:5
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作者 李洪利 王君玮 +7 位作者 张维 吴晓东 赵永刚 李慧 李娟 包静月 曹金山 王志亮 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期7-10,共4页
构建重组原核表达载体pET32a-VP73,将pET32a-VP73转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导,VP73蛋白主要抗原表位区可稳定高效的表达,SDS-PAGE结果表明,IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导5h蛋白质表达量最高,表达蛋白为融合蛋白,分子质量约为42ku。蛋... 构建重组原核表达载体pET32a-VP73,将pET32a-VP73转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导,VP73蛋白主要抗原表位区可稳定高效的表达,SDS-PAGE结果表明,IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导5h蛋白质表达量最高,表达蛋白为融合蛋白,分子质量约为42ku。蛋白质纯化后,经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,确定表达产物为非洲猪瘟病毒VP73主要抗原表位区融合蛋白。将纯化的蛋白质免疫新西兰大白兔,免疫前后收集血清。用间接ELISA方法测定血清抗体效价,并以非洲猪瘟阳性血清、兔免疫前后血清及猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病阳性血清为一抗,确定该蛋白质的特异性。结果表明,制备的抗血清效价达到1∶1024000,能与纯化的VP73主要抗原表位区蛋白质发生反应。制备的多克隆抗体为VP73蛋白的免疫学研究和非洲猪瘟血清学诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 VP73 原核表达 多克隆抗体
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内窥镜大隐静脉获取术在冠状动脉旁路移植术中的应用 被引量:2
9
作者 李洪利 徐东 +4 位作者 尚学斌 刘燕辉 刘飞 张科峰 姚青 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期231-234,共4页
目的探讨冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)中应用内窥镜获取大隐静脉的手术技巧及可行性和安全性。方法首都医科大学宣武医院心脏科2007年1月至2008年2月行择期CABG术患者118例,根据患者意愿分为内窥镜大隐静... 目的探讨冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)中应用内窥镜获取大隐静脉的手术技巧及可行性和安全性。方法首都医科大学宣武医院心脏科2007年1月至2008年2月行择期CABG术患者118例,根据患者意愿分为内窥镜大隐静脉获取术(EVH)组(40例)和全程切开大隐静脉获取术(OVH)组(78例)。对2组患者高危因素和术后合并症进行比较,并对EVH组所取静脉进行组织学评价。结果2组患者下肢切口合并症高危因素的差异无统计学意义,但合并症总发生率EVH组较OVH组低,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。2组患者静脉获取时间相当,获取的静脉长度差异有统计学意义(P<0.05)。EVH组更多地采用了序贯吻合血管桥技术以保证完全再血管化的需要。组织学评估结果显示,内窥镜获取的大隐静脉内膜完整,质量可靠。2组患者术后平均随访5.8个月,均未再发生心肌梗死。冠状动脉CT检查结果显示,EVH组桥血管共73支,仅2支存在局限性轻度内膜增生,未见桥血管闭塞。结论EVH技术在降低术后下肢伤口合并症方面有明显优势,适用于存在高危因素的患者。内窥镜大隐静脉获取术可能成为冠状动脉旁路移植术的常规静脉获取手段。 展开更多
关键词 冠状动脉旁路移植术 大隐静脉 内窥镜 组织学
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NUAK1增加乳腺癌细胞的趋化和粘附能力 被引量:2
10
作者 李洪利 尹崇高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期503-507,共5页
本课题组先前已证明NUAK1/ARK5可通过影响F-actin的聚合从而促进乳腺癌细胞的侵袭和转移.但是NUAK1是否还通过其它机制影响乳腺癌的侵袭和转移尚有待于探讨.本文证明NUAK1还可以影响乳腺癌细胞趋化、粘附能力从而在乳腺癌细胞侵袭转移... 本课题组先前已证明NUAK1/ARK5可通过影响F-actin的聚合从而促进乳腺癌细胞的侵袭和转移.但是NUAK1是否还通过其它机制影响乳腺癌的侵袭和转移尚有待于探讨.本文证明NUAK1还可以影响乳腺癌细胞趋化、粘附能力从而在乳腺癌细胞侵袭转移中起重要作用.应用化学合成的小RNA干扰质粒转染到乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,用免疫印迹技术检测NUAK1蛋白的表达情况.结果显示,在敲除NUAK1的细胞(siNUAK1/MDA231)中,NUAK1蛋白表达水平明显降低;趋化运动实验结果显示,siNUAK1/MDA231细胞的趋化运动能力比未处理组(Scr/MDA231)细胞明显降低;细胞粘附实验结果显示,EGF刺激5 min、15 min后,siNUAK1/MDA231细胞比Scr/MDA231细胞粘附细胞数量均明显减少;免疫印迹技术检测integrinβ1磷酸化验证NUAK1影响乳腺癌细胞粘附的机制.结果显示,siNUAK1/MDA231细胞内integrinβ1磷酸化比Scr/MDA231细胞不同程度降低.上述结果表明,NUAK1通过磷酸化integrinβ1促进乳腺癌细胞与纤维粘连蛋白的粘附,从而促进乳腺癌的侵袭和转移. 展开更多
关键词 乳腺癌 整合素Β1 粘附 侵袭 转移
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面向自由空间光通信波前校正的改进模拟退火算法 被引量:2
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作者 李洪利 刘欣悦 +2 位作者 杜博军 曹景太 张恒 《中国光学(中英文)》 北大核心 2025年第4期784-793,共10页
为了补偿大气湍流对相干自由空间光通信的影响,本文研发了一种基于改进模拟退火算法的自适应光学系统,旨在优化系统的混频效率和降低误码率,从而提升整体系统性能。首先,介绍了含有无波前自适应光学部分的相干光通信系统的组成,并重点... 为了补偿大气湍流对相干自由空间光通信的影响,本文研发了一种基于改进模拟退火算法的自适应光学系统,旨在优化系统的混频效率和降低误码率,从而提升整体系统性能。首先,介绍了含有无波前自适应光学部分的相干光通信系统的组成,并重点分析了混频效率和误码率等关键参数。随后,详细阐述了改进模拟退火算法的工作原理及其在自适应光学系统中的应用。为了验证算法的有效性,进行了数值模拟分析,并与传统算法进行了对比分析。最后,在实验平台上收集实际数据以进一步评估算法性能。实验结果表明:改进模拟退火算法相比于普通模拟退火算法,迭代次数减少50%的情况下,误码率降低到10^(-9),混频效率提高到0.9。改进模拟退火算法可以减少传统自适应光学系统的迭代次数,提高波前校正精度,满足通信系统的需求。 展开更多
关键词 波前校正 自适应光学 无波前传感 混频效率 误码率
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水体常见几种重金属污染物及对水生生物的危害 被引量:18
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作者 李洪利 高晓田 《河北渔业》 2007年第3期1-4,27,共5页
主要介绍了几种水体常见且毒性较大的重金属污染物的特点、基本性质以及对水生生物产生的影响,并且简要论述了多种重金属对水生生物的联合作用。
关键词 重金属 污染物 水生生物 联合作用
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分形方法在海洋溢油的气相色谱鉴别中的应用研究
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作者 李洪利 王坚红 +2 位作者 程军 刘刚 高鑫鑫 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期93-97,共5页
将分形理论应用于溢油的气相色谱鉴别,建立了一种新的海洋溢油气相色谱鉴别方法。即首先采用小波分解将气相色谱图曲线分解至不同的尺度,计算各尺度曲线分量的分形维数,基于分形维数参量,采用欧几里得距离判断不同样品气相色谱曲线的近... 将分形理论应用于溢油的气相色谱鉴别,建立了一种新的海洋溢油气相色谱鉴别方法。即首先采用小波分解将气相色谱图曲线分解至不同的尺度,计算各尺度曲线分量的分形维数,基于分形维数参量,采用欧几里得距离判断不同样品气相色谱曲线的近似程度,达到对溢油样品进行鉴别的目的。溢油事故实例数据分析表明,分形维数能较好的反映不同色谱曲线的差异,所建立的方法在筛选溢油样品时,能在一定程度上缩小鉴别范围,可作为溢油鉴别的一种有效辅助方法。 展开更多
关键词 溢油 分形维数 气相色谱 小波分解
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淋巴上皮样T细胞淋巴瘤1例
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作者 李洪利 王军梅 李光 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第5期667-668,共2页
关键词 T细胞淋巴瘤 淋巴上皮样 淋巴结肿大 左颈部 基底部
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Gab2通过PI3K/Akt/ARK5/MMP途径影响乳腺癌的侵袭和转移 被引量:16
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作者 田红艳 陈萍萍 +5 位作者 李笑 李洪利 任甜甜 张宝刚 尹崇高 刘雨清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1014-1018,共5页
目的探讨Gab2在乳腺浸润性导管癌侵袭和转移中的分子机制,为临床预防乳腺癌的侵袭和转移提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测80例乳腺浸润性导管癌组织及癌旁相对正常组织(>5 cm)中Gab2蛋白表达情况,并分析其表达与乳腺浸润... 目的探讨Gab2在乳腺浸润性导管癌侵袭和转移中的分子机制,为临床预防乳腺癌的侵袭和转移提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测80例乳腺浸润性导管癌组织及癌旁相对正常组织(>5 cm)中Gab2蛋白表达情况,并分析其表达与乳腺浸润性导管癌临床病理参数的相关性,分析浸润性导管癌中Gab2、MMP-2及MMP-9蛋白表达的相关性。采用Western blot检测乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231中Gab2蛋白的表达情况。采用RNAi技术将小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,应用Western blot检测转染成功后各组细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况,应用Transwell体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭性,用EGF刺激细胞后Western blot检测Akt及ARK5的磷酸化情况。结果浸润性导管癌组织中Gab2蛋白的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),浸润性导管癌中Gab2蛋白的表达与ER、组织学分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),且其表达与MMP-2及MMP-9蛋白的表达呈正相关;MDA-MB-231细胞系中Gab2蛋白表达量高于MCF-7细胞系中表达量;转染干扰质粒24 h后,与转染空载细胞组相比,SiG ab2/MDA-MB-231细胞组中Gab2蛋白的表达量明显降低,结果显示转染成功。同时,SiG ab2/MDA-MB-231细胞组穿过Transwell小室人工基膜数量明显减少(P<0.05),并伴有MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P<0.05)。用EGF刺激各组细胞,结果显示:在SiG ab2/MDAMB-231细胞组Akt及ARK5的磷酸化明显受到抑制。结论Gab2通过PI3K/Akt/ARK5信号通路影响MMP-2、MMP-9的表达从而促进乳腺癌的侵袭与转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 Gab2 AKT ARK5 MMP 侵袭 转移
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基于ELCOM-CAEDYM模型的太湖蓝藻水华早期预测探讨 被引量:20
16
作者 王长友 于洋 +5 位作者 孙运坤 李洪利 孔繁翔 张民 史小丽 阳振 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期491-502,共12页
结合太湖蓝藻水华形成的"四阶段理论",基于澳大利亚西澳大学水研究中心开发的ELCOM-CAEDYM耦合模型框架构建了太湖水华蓝藻生态动力学模型,对蓝藻水华的形成进行模拟,分析了太湖蓝藻水华早期预测的可行性.结果表明:该模型在... 结合太湖蓝藻水华形成的"四阶段理论",基于澳大利亚西澳大学水研究中心开发的ELCOM-CAEDYM耦合模型框架构建了太湖水华蓝藻生态动力学模型,对蓝藻水华的形成进行模拟,分析了太湖蓝藻水华早期预测的可行性.结果表明:该模型在较长时间尺度上对春季复苏阶段及生长上浮阶段蓝藻水华的形成模拟效果较好,蓝藻生物量模拟值与站点调查值的误差变化范围在1.0%~70.4%,平均误差为28.0%,与MODIS卫星反演值的误差变化范围在3.8%~83.9%,平均误差40.5%;但越冬阶段蓝藻生物量模拟输出值与站点调查值的误差变化范围在3.0%~143.6%,平均误差为40.1%,与MODIS卫星反演值的误差变化范围在9.7%~118.4%,平均误差为48.8%,表明模型对蓝藻越冬过程模拟能力还不强,应在蓝藻越冬机制模拟计算方面进一步改进,以满足蓝藻水华早期预测的需要. 展开更多
关键词 水华 蓝藻 ELCOM-CAEDYM 预测
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miR-186-5p通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转化 被引量:19
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作者 张国新 徐新伟 +4 位作者 孟斌 朱优秀 曾国栋 尹崇高 李洪利 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期380-385,共6页
先前研究表明,miR-186-5p在人类许多恶性肿瘤中扮演抑癌基因的作用,但其在肺腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用并不明确。本研究旨在证明,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转... 先前研究表明,miR-186-5p在人类许多恶性肿瘤中扮演抑癌基因的作用,但其在肺腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用并不明确。本研究旨在证明,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制肺腺癌细胞的上皮-间质转化。我们首先分析了miR-186-5p在人肺癌细胞中的表达。荧光定量PCR(QRT-PCR)结果显示,与人正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,肺腺癌细胞SPC-A1、A549中的miR-186-5p表达量明显降低。为研究miR-186-5p在肺腺癌细胞中的功能,利用GV369-miR-186-5p表达载体,实现了在A549细胞中的过表达。基因转染结合Transwell侵袭结果显示,与对照质粒转染的A549细胞相比,过表达miR-186-5p的A549细胞的体外侵袭能力明显下降。Western印迹检测细胞中EMT相关标志物揭示,GV369-miR-186-5p转染的A549细胞中的上皮-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达明显上调,而神经-钙黏着蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达明显下调。同时,GV369-miR-186-5p转染引起其靶基因——垂体肿瘤转化基因1(pituitary tumor-transforming gene 1,PTTG1)编码蛋白在A549细胞中明显降低。重要的是,过表达miR-186-5p与敲减PTTG1均可导致上皮-钙黏着蛋白表达上调,而神经-钙黏着蛋白和波形蛋白下调;而miR-186-5p和PTTG1表达载体共转染后,3种EMT相关标志物在A549的表达与对照细胞的表达无明显差异,提示过表达PTTG1可抵消miR-186-5p对EMT相关标志物表达的影响。综上所述,miR-186-5p可通过靶向调控PTTG1抑制EMT的发生,进而抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。 展开更多
关键词 肺腺癌 miR-186-5p 侵袭 转移 上皮-间质转化
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乳腺癌中PKCζ、MMP-2、MMP-9的表达及相关性 被引量:11
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作者 杨硕 李洪利 +5 位作者 李文通 杨璐 倪明 翟丽敏 尹崇高 张宝刚 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期958-962,共5页
目的探讨乳腺癌中蛋白激酶Cζ(protein kinase Cζ,PKCζ)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两... 目的探讨乳腺癌中蛋白激酶Cζ(protein kinase Cζ,PKCζ)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两步法检测PKCζ、MMP-2、MMP-9在100例乳腺癌组织及对应癌旁正常乳腺组织中的表达,并分析三者表达的相关性。应用RNAi技术将合成的PKCζ-siRNA转染入乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,即siPKCζ/MDA-MB-231细胞组,以转染空载质粒的scr/MDA-MB-231的细胞组作为对照组,应用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。利用Western blot法检测转染细胞中PKCζ蛋白的表达。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养基中MMP-2、MMP-9的含量。结果PKCζ、MMP-2、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为62.5%、37.5%、32.5%,明显高于乳腺导管内癌和癌旁正常乳腺组织(P均<0.05)。PKCζ蛋白表达与淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、ER、PR等无关(P均>0.05);转染siRNA的siPKCζ/MDA-MB-231细胞组与scr/MDA-MB-231组相比,体外侵袭能力以及PKCζ蛋白的表达水平明显下降(P均<0.05),培养基中MMP-2、MMP-9蛋白表达量亦明显下降(P均<0.05)。结论 PKCζ通过影响乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的分泌来促进乳腺癌的侵袭、转移。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 PKCζ MMP-2 MMP-9 侵袭 转移
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不同年代冬小麦品种光合特性差异的研究 被引量:10
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作者 兰进好 张宝石 +2 位作者 周鸿飞 刘源霞 李洪利 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第1期12-15,共4页
选择不同年代的3个代表性小麦品种 ,从光合特性及相关性状加以分析比较结果表明 :就光合速率而言 ,新品种小麦并无明显优势 ,但其光合面积和光合时间明显高于老品种 ,叶绿素含量提高不明显 ,叶绿素a/b比值略有下降 ;新品种株高降低幅度... 选择不同年代的3个代表性小麦品种 ,从光合特性及相关性状加以分析比较结果表明 :就光合速率而言 ,新品种小麦并无明显优势 ,但其光合面积和光合时间明显高于老品种 ,叶绿素含量提高不明显 ,叶绿素a/b比值略有下降 ;新品种株高降低幅度大 ,各节间缩短明显 ,基部节间秆壁加厚 ,叶倾角和叶子长/宽比值减小 ,株型更加合理 ;新老品种的干物质分配曲线大致相似 ,但新品种的干物质向穗部的转移速率和数量明显高于老品种 ;单株产量构成因素方面 ,新品种的穗数、穗粒数。 展开更多
关键词 冬小麦 光合特性 品种 产量构成因素 光合面积 光合时间 光合速率 叶绿素 干物质分配曲线
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NUAK1能促进乳腺癌上皮-间质转化的发生引起侵袭转移 被引量:7
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作者 刘菲 孙磊 +5 位作者 张丽娜 田慧玲 李洪利 李文通 张宝刚 尹崇高 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1680-1684,共5页
目的探讨NUAK1(NUAK family SNF1-like kinase 1)与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及乳腺癌侵袭转移之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中NUAK1、EMT相关蛋... 目的探讨NUAK1(NUAK family SNF1-like kinase 1)与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及乳腺癌侵袭转移之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中NUAK1、EMT相关蛋白上皮-钙黏素(epithelial-cadherin,E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并分析其相关性。应用RNAi技术将合成的小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,进行Western blot检测转染成功后,应用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力,再检测转染细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况。结果浸润性导管癌组织中NUAK1蛋白的表达率明显高于导管内癌和癌旁正常组织(P<0.01);浸润性导管癌中NUAK1蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、远处转移、E-cadherin、Vimentin的表达有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤的大小、ER、PR及c-erbB-2的表达无关(P>0.05)。转染72 h后,与Scr/MDA-MB-231细胞相比,siNUAK1/MDA-MB-231细胞中NUAK1蛋白表达水平明显降低的同时,细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。并且伴有Vimentin蛋白表达水平的降低和E-cadherin蛋白表达水平的升高(P<0.05)。结论 NUAK1能促进乳腺癌EMT的发生,从而促进乳腺癌的侵袭转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 NUAK1 上皮间质转化 E-CADHERIN VIMENTIN 侵袭
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