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酵母细胞生物转化反式-肉桂酸生产L-苯丙氨酸的研究 被引量:12
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作者 杨顺楷 赵健身 +2 位作者 李果龙 蒋耀忠 刘桂兰 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1990年第1期1-7,共7页
据文献调查,搜集了国内可能相关的30株酵母,进行生物转化反式-肉桂酸(t-Ca) 生产L-苯丙氨酸 (L-Phe) 的微生物筛选研究,并对部分菌株生物转化能力,即苯丙氨酸解氨酶 (PAL,EC _(4、3、1、5) 活性水平进行了初步评估。筛选结果是:22株酵... 据文献调查,搜集了国内可能相关的30株酵母,进行生物转化反式-肉桂酸(t-Ca) 生产L-苯丙氨酸 (L-Phe) 的微生物筛选研究,并对部分菌株生物转化能力,即苯丙氨酸解氨酶 (PAL,EC _(4、3、1、5) 活性水平进行了初步评估。筛选结果是:22株酵母具有转化 t-Ca 生成 L-Phe 的能力,转化率在2—67%范围。选出7株酵母研究在液体培养条件下细胞生长和PAL活性的时间过程关系,PAL 活性范围在 2.3—14.4x10^(-s)u/m g细胞干重。深红酵母 (Rhodotorularubra) AS2.166作为生物转化制备实经菌株,在静止细胞和固定化细胞批式反应条件下,结果获得L-Phe分离产率分别为42.0%,28.7%。 展开更多
关键词 L-苯丙氨酸 酵母细胞 生物转化
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酵母全细胞苯丙氨酸鲜氨酶(PAL)活性的紫外分光光度测定法 被引量:17
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作者 杨顺楷 李果龙 赵健身 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1990年第1期59-62,共4页
本文报告以L-苯丙氨酸 (L-phe) 为底物,酵母全细胞作酶源,酶促生成产物反式-肉桂酸 (t-Ca)测定苯丙氨解氨酸 (PAP,EC_(4.3.1.5) 活性的紫外分光光度法。测定程序包括标准物质t-Ca的加样试验,绝对回收率试验,线性回归分析的整套定量分析... 本文报告以L-苯丙氨酸 (L-phe) 为底物,酵母全细胞作酶源,酶促生成产物反式-肉桂酸 (t-Ca)测定苯丙氨解氨酸 (PAP,EC_(4.3.1.5) 活性的紫外分光光度法。测定程序包括标准物质t-Ca的加样试验,绝对回收率试验,线性回归分析的整套定量分析研宄步骤,建立了一套经过修改的Kalghatgi和Subba Rao(1975) PAL 活性测定法。此法具有良好的准确度和精密度,已经用于评价具有PAL活性的酵母菌株在液体培养物中细胞生长和PAL活性形成的时间过程研究。 展开更多
关键词 PAL活性 紫外分光光度 酵母全细胞
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地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis mediteranei)U-32硝酸还原酶的定位、纯化及性质 被引量:2
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作者 李果龙 杨蕴刘 焦瑞身 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期710-714,共5页
在力复霉素SV研究中,发现硝酸盐对抗生素合成呈现多效性作用,不仅大幅度提高产量,还对产生菌——地中海拟无枝菌酸菌生理产生多方面的影响,从而提出整体性调节的结论.这一多效性作用是由硝酸盐所引起的,为此对硝酸还原酶进行了... 在力复霉素SV研究中,发现硝酸盐对抗生素合成呈现多效性作用,不仅大幅度提高产量,还对产生菌——地中海拟无枝菌酸菌生理产生多方面的影响,从而提出整体性调节的结论.这一多效性作用是由硝酸盐所引起的,为此对硝酸还原酶进行了研究.首先,通过原生质体渗透裂解发现地中海拟无枝菌酸菌U-32的硝酸还原酶是一个胞质酶.该酶极不稳定,缓冲液中加入硝酸钾、甘油等保护剂能极大地提高其稳定性.通过硫酸鱼精蛋白沉淀,硫酸铵分级分离,Phenyl-SepharoseCL4B、Bio-GelA1.5mDEAE-Sephacel和SephadexG-75柱层析等多步纯化得到了电泳纯的硝酸还原酶.该酶为一79kD的单亚基酶,每分子酶含有约2.29原子的钼,但并不含有非血红素铁、酸不稳定硫、FMN及FAD,其等电点为6.2,反应最适pH为7.2,最适温度为40℃.对硝酸根的Km值为13.3μmol/L.同时分析了该酶的吸收光谱. 展开更多
关键词 硝酸还原酶 定位 纯化 A.mediterranei
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