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抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制
被引量：
4
1
作者
李木楠
李双双
+3 位作者
孟凡爽
韩鹏
张文慧
张林波
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期64-69,共6页
【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率...
【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率,Real time-PCR法检测miR-29a-3p及凋亡相关基因caspase3、caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax的表达水平,流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率。【结果】重组抑制载体转染后,细胞内miR-29a-3p表达水平明显下降;而caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax等基因的表达出现不同程度的上调;流式细胞术分析发现随着转染时间延长,细胞凋亡率增加,且36 h凋亡率最高。【结论】p EZX-AM02-miR-29a-3p重组载体可抑制小鼠巨噬细胞中miR-29a-3p的表达,通过靶向上调caspase7、caspase8、Bcl-2和Mcl-1等基因的表达促进巨噬细胞的凋亡。
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关键词
miR-29a-3p
抑制载体
巨噬细胞
细胞凋亡
靶基因
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职称材料
结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因的克隆及重组真核表达载体的构建
2
作者
李双双
李木楠
+2 位作者
关松磊
张文慧
张林波
《安徽农学通报》
2017年第8期12-15,共4页
目的:克隆结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因,并构建Rv3872与Rv3873基因的重组真核表达载体,为研究这2个基因的功能奠定实验基础。方法:利用PCR技术克隆Rv3872与Rv3873基因序列,将其连接至pMD-18T载体,鉴定成功后将Rv3872与Rv3873序列插...
目的:克隆结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因,并构建Rv3872与Rv3873基因的重组真核表达载体,为研究这2个基因的功能奠定实验基础。方法:利用PCR技术克隆Rv3872与Rv3873基因序列,将其连接至pMD-18T载体,鉴定成功后将Rv3872与Rv3873序列插入真核表达载体pEGFP-C1,构建重组pEGFP-C1-Rv3872和pEGFP-C1-Rv3873真核表达载体,并进行质粒PCR、双酶切以及测序验证。结果:经测序比对后,Rv3872与Rv3873序列与Gene Bank中公布的基因序列一致,重组载体构建成功。结论:成功构建重组pEG-FP-C1-Rv3872和pEGFP-C1-Rv3873真核表达载体。
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关键词
结核分枝杆菌
Rv3872
Rv3873
真核载体
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职称材料
题名
抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制
被引量：
4
1
作者
李木楠
李双双
孟凡爽
韩鹏
张文慧
张林波
机构
吉林农业大学生命科学学院
生物反应器与药物开发教育部工程研究中心
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期64-69,共6页
基金
吉林省科技发展计划项目(20130101105JC
20140204018YY)
+1 种基金
吉林省教育厅"十三五"科学技术项目(2016-177JJKH20170304KJ)
吉林农业大学博士科研启动基金(2015015)
文摘
【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率,Real time-PCR法检测miR-29a-3p及凋亡相关基因caspase3、caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax的表达水平,流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率。【结果】重组抑制载体转染后,细胞内miR-29a-3p表达水平明显下降;而caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax等基因的表达出现不同程度的上调;流式细胞术分析发现随着转染时间延长,细胞凋亡率增加,且36 h凋亡率最高。【结论】p EZX-AM02-miR-29a-3p重组载体可抑制小鼠巨噬细胞中miR-29a-3p的表达,通过靶向上调caspase7、caspase8、Bcl-2和Mcl-1等基因的表达促进巨噬细胞的凋亡。
关键词
miR-29a-3p
抑制载体
巨噬细胞
细胞凋亡
靶基因
Keywords
miR-29a-3p
inhibitor vector
macrophage
cell apoptosis
target gene
分类号
S854.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因的克隆及重组真核表达载体的构建
2
作者
李双双
李木楠
关松磊
张文慧
张林波
机构
吉林农业大学生命科学学院
出处
《安徽农学通报》
2017年第8期12-15,共4页
基金
吉林省科技发展计划资助项目(20130101105JC
20140204018YY)
吉林农业大学博士科研启动基金项目(2015015)
文摘
目的:克隆结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因,并构建Rv3872与Rv3873基因的重组真核表达载体,为研究这2个基因的功能奠定实验基础。方法:利用PCR技术克隆Rv3872与Rv3873基因序列,将其连接至pMD-18T载体,鉴定成功后将Rv3872与Rv3873序列插入真核表达载体pEGFP-C1,构建重组pEGFP-C1-Rv3872和pEGFP-C1-Rv3873真核表达载体,并进行质粒PCR、双酶切以及测序验证。结果:经测序比对后,Rv3872与Rv3873序列与Gene Bank中公布的基因序列一致,重组载体构建成功。结论:成功构建重组pEG-FP-C1-Rv3872和pEGFP-C1-Rv3873真核表达载体。
关键词
结核分枝杆菌
Rv3872
Rv3873
真核载体
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Rv3872
Rv3873
Eukaryotic vector
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制
李木楠
李双双
孟凡爽
韩鹏
张文慧
张林波
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌Rv3872与Rv3873基因的克隆及重组真核表达载体的构建
李双双
李木楠
关松磊
张文慧
张林波
《安徽农学通报》
2017
0
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