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人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的宫颈癌细胞株构建 被引量:1
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作者 李宏帅 王鑫廷 +1 位作者 王媛 杨洁 《山东医药》 CAS 2018年第35期46-49,共4页
目的构建人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的人宫颈癌Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin基因对宫颈癌潜在的调控作用提供细胞模型。方法采用TRIzol提取宫颈癌细胞Hela细胞株总RNA,RT-PCR法逆转录出含有目的基因Calnexin的... 目的构建人Calnexin基因慢病毒载体及稳定表达Calnexin蛋白的人宫颈癌Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin基因对宫颈癌潜在的调控作用提供细胞模型。方法采用TRIzol提取宫颈癌细胞Hela细胞株总RNA,RT-PCR法逆转录出含有目的基因Calnexin的cDNA序列;根据Calnexin的cDNA序列,选择EcoR1、Bam H1限制性酶切位点作为目的位点,设计FLAG-Calnexin基因的PCR引物;利用PCR法从Hela细胞cDNA中扩增出FLAG-Calnexin基因片段,连接到慢病毒载体pLVX-IRES-puro中,得到重组慢病毒pLVX-FLAG-Calnexin质粒。将慢病毒包装质粒与pLVX-FLAG-Calnexin重组质粒共转染到人肾上皮293T细胞中,获得携带FLAG-Calnexin基因序列的重组慢病毒。将慢病毒感染Hela细胞24 h,在细胞培养基中加入1.0μg/m L嘌呤霉素,药筛48 h。最后筛选出稳定表达FLAG-Calnexin蛋白的Hela细胞,采用Western blotting法、Real-time PCR法检测该细胞内的Calnexin蛋白及mRNA。结果构建完成的重组质粒经菌落PCR、重组质粒的双酶切、质粒PCR验证后,条带位置对应片段大小与目的基因大小一致,且经质粒测序后与Calnexin基因片段比对一致。经过慢病毒感染、药物筛选后得到的Hela细胞中的Calnexin蛋白及mRNA的相对表达量分别为2.14±0.25、6.15±0.21,高于野生型Hela细胞及转入空载的对照细胞(P均<0.01)。结论成功构建了人Calnexin基因慢病毒载体,同时建立、筛选出了能够稳定表达Calnexin蛋白的Hela细胞株,为进一步探讨Calnexin在宫颈癌发生发展中的作用提供了细胞模型。 展开更多
关键词 Calnexin基因 慢病毒载体 宫颈癌细胞 HELA细胞
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在地质找矿中大比例找矿技术的应用分析 被引量:1
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作者 李宏帅 《世界有色金属》 2019年第13期54-55,共2页
随着我国国民经济的迅猛发展,行业对自然资源的需求有了进一步的提高,矿产资源作为一种重要的自然资源,对很多行业的发展产生至关重要的作用,地质找矿工作就是矿产资源开发利用过程中的首要工作。大比例找矿技术是找矿工作中应用日益广... 随着我国国民经济的迅猛发展,行业对自然资源的需求有了进一步的提高,矿产资源作为一种重要的自然资源,对很多行业的发展产生至关重要的作用,地质找矿工作就是矿产资源开发利用过程中的首要工作。大比例找矿技术是找矿工作中应用日益广泛的一种技术,对矿业开发的长远发展有重要的促进作用。对大比例找矿技术在地质找矿工作中的实际应用进行分析显得很有必要,一方面能对有效的提升找矿的精准性,另一方面也能对矿产开发利用地方经济发展提供较好的技术支撑。本文结合我国地质找矿工作的实际情况,对大比例找矿技术的应用进行了分析。 展开更多
关键词 地质找矿 大比例找矿技术 应用
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大隐静脉高位结扎加腔内微波消融联合泡沫硬化剂治疗下肢静脉曲张的临床研究 被引量:5
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作者 金雄伟 李宏帅 +1 位作者 唐石驹 梁江 《中国实用医药》 2020年第35期51-53,共3页
目的探究大隐静脉曲张高位结扎加腔内微波消融联合泡沫硬化剂治疗下肢静脉曲张患者的临床疗效。方法 100例下肢静脉曲张患者作为研究对象,随机分为常规组与联合组,各50例。常规组患者接受常规临床治疗措施,联合组在常规组基础上行大隐... 目的探究大隐静脉曲张高位结扎加腔内微波消融联合泡沫硬化剂治疗下肢静脉曲张患者的临床疗效。方法 100例下肢静脉曲张患者作为研究对象,随机分为常规组与联合组,各50例。常规组患者接受常规临床治疗措施,联合组在常规组基础上行大隐静脉高位结扎加腔内微波消融联合泡沫硬化剂治疗。比较两组患者相关临床指标及并发症发生情况。结果联合组术中出血量(21.36±6.54)ml、住院时间(4.39±1.26)d、皮下淤血范围(2.01±1.02)cm、手术时间(50.43±8.67)min及切口疼痛评分(1.19±0.35)分均优于常规组的(75.36±8.69)ml、(9.44±4.01)d、(6.21±0.62)cm、(80.32±9.51)min及(3.27±0.88)分,差异均具有统计学意义(P<0.05)。联合组患者并发症发生率2.00%显著低于常规组的14.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对下肢静脉曲张患者进行大隐静脉曲张高位结扎加腔内微波消融联合泡沫硬化剂治疗可以显著提升患者的临床治疗效果,并降低患者发生不良事件的几率,具有极高的临床使用推广价值。 展开更多
关键词 大隐静脉高位结扎 腔内微波消融 泡沫硬化剂 下肢静脉曲张
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2010年吉林省食品添加剂污染状况分析 被引量:3
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作者 桑育红 王金英 李宏帅 《中国实用医药》 2012年第23期261-262,共2页
目的了解吉林省所采集食品的食品添加剂化学污染状况。方法采用国家标准检验方法。结果发现的主要问题:一是食品添加剂二氧化硫在金针菇中严重超标,超标率为46.67%。二是食品添加剂糖精钠在软饮料、酒类等食品中超量使用,超标率为13.33... 目的了解吉林省所采集食品的食品添加剂化学污染状况。方法采用国家标准检验方法。结果发现的主要问题:一是食品添加剂二氧化硫在金针菇中严重超标,超标率为46.67%。二是食品添加剂糖精钠在软饮料、酒类等食品中超量使用,超标率为13.33%。结论食品安全关系民生,应加强对食品添加剂的管理和控制,加强卫生监督和监测。 展开更多
关键词 食品 食品添加剂
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保留肋间臂神经对改良性乳腺癌根治术术后临床疗效的价值分析 被引量:1
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作者 郑永华 刘国常 李宏帅 《中国实用医药》 2020年第28期33-35,共3页
目的分析保留肋间臂神经(ICBN)对改良性乳腺癌根治术术后患者上臂内侧疼痛减轻及感觉的临床价值。方法94例乳腺癌患者,根据手术方式不同分成Ⅰ组和Ⅱ组,各47例。两组均行改良性乳腺癌根治术,Ⅰ组清扫乳腺癌腋淋巴结时给予切除肋间臂神... 目的分析保留肋间臂神经(ICBN)对改良性乳腺癌根治术术后患者上臂内侧疼痛减轻及感觉的临床价值。方法94例乳腺癌患者,根据手术方式不同分成Ⅰ组和Ⅱ组,各47例。两组均行改良性乳腺癌根治术,Ⅰ组清扫乳腺癌腋淋巴结时给予切除肋间臂神经治疗,Ⅱ组清扫腋窝时给予保留肋间臂神经治疗。全部患者术后随访2年。对比两组患者上臂疼痛及上臂内侧感觉异常的发生情况。结果Ⅱ组患者术后1个月、半年、1年、2年上臂疼痛发生率分别为27.7%、17.0%、12.8%、10.6%,低于Ⅰ组的48.9%、40.4%、38.3%、36.2%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ组患者术后1个月、半年、1年、2年上臂感觉异常发生率分别为31.9%、14.9%、12.8%、8.5%,低于Ⅰ组的63.8%、57.4%、53.2%、48.9%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在行改良性乳腺癌术中保留肋间臂神经,术后可以明显减少患侧上臂内侧疼痛以及感觉异常(烧灼感及麻木)的发生,对于患者术后心理及生理的康复有明显改善,符合生物-心理-社会医学模式的发展要求。 展开更多
关键词 乳腺癌 改良性根治术 上臂内侧疼痛 感觉异常 肋间臂神经
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甲状腺全切术中精细化被膜解剖结合环甲间隙显露喉返神经应用于甲状腺癌治疗的价值 被引量:1
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作者 金雄伟 李宏帅 +2 位作者 杨祚豪 李满志 张浩 《临床普外科电子杂志》 2022年第1期2-6,共5页
目的 探讨甲状腺全切术中精细化被膜解剖结合环甲间隙显露喉返神经在甲状腺癌患者治疗中的应用价值。方法 选取2018年1月至2020年9月东莞康华医院接诊的90例甲状腺癌患者,按照随机数字表对照法分为对照组和观察组,每组45例。对照组行常... 目的 探讨甲状腺全切术中精细化被膜解剖结合环甲间隙显露喉返神经在甲状腺癌患者治疗中的应用价值。方法 选取2018年1月至2020年9月东莞康华医院接诊的90例甲状腺癌患者,按照随机数字表对照法分为对照组和观察组,每组45例。对照组行常规甲状腺全切术+甲状腺下动脉显露喉返神经治疗,观察组采取精细化被膜解剖结合环甲间隙显露喉返神经治疗,比较两组患者手术情况、手术前后甲状腺功能指标检测结果变化情况、术后并发症情况以及随访6个月复发情况。结果 两组患者手术时间、术中失血量、淋巴结清扫数目比较,差异无显著性(P> 0.05);观察组患者术后1d、3d血清甲状旁腺激素、Ca^(2+)水平高于对照组,差异有显著性(P<0.05);观察组患者术后喉返神经损伤、甲状旁腺功能减退、低钙血症发生率均低于对照组,差异有显著性(P <0.05);两组患者术后随访6个月复发率比较,差异无显著性(P> 0.05)。结论 甲状腺癌患者甲状腺全切术中进行精细化被膜解剖结合环甲间隙显露喉返神经有利于保护喉返神经和甲状旁腺功能。 展开更多
关键词 甲状腺癌 甲状腺全切术 精细化被膜解剖 环甲间隙 喉返神经
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